2.7. Determination of total anthocyanidins (cyanidin and peonidin)
content
The cyanidin and peonidin contents of each sample were determined
according to a modification of the procedure of Zhang, Kou,
Fugal, and McLaughlin (2004). Samples (1.0–2.0 g homogenates)
were extracted with 10 ml of aqueous solution consisting of water,
methanol and concentrated HCl (33:50:17:v/v/v) and sonicated for
20 min (Branson, 2510, Danbury, CT, USA). Extracts were then
placed in a boiling water bath (Memmert, Duesseldorf, Germany)
for 1 h. Cooled extracts were centrifuged at 2000 rpm for 30 min
(HIMAC centrifuge, CR5BB2, HITACHI, Tokyo, Japan). Before injection
for HPLC analysis, the solution was passed through a
0.45 lm membrane filter (Chrom Tech, Milford, MA). Cyanidin
and peodinin analysis was performed using an HPLC system
equipped with a Waters 515 pump (Water corporation, Milford,
MA, USA) and Jasco UV 975 detector (Jasco International, Co., Ltd,
Tokyo, Japan). Cyanidin and peodinin were separated using a C18
column (Waters NovaPac C18, 100 4.6 mm; Water corporation,
Milford, MA, USA). The mobile phase consisted of 0.4% trifluoroacetic
acid (TFA) in water and 0.4% TFA in acetonitrile at ratio of 18:82
and flow rate at 0.9 ml/min. Eluate was monitored at 530 nm. The
results were expressed as milligrams per 100 g of fresh weight
(mg/100 g).
2.7 ความมุ่งมั่นของทั้งหมด anthocyanidins (cyanidin และ peonidin)
เนื้อหา
cyanidin และเนื้อหา peonidin ของแต่ละกลุ่มตัวอย่างได้รับการพิจารณา
เป็นไปตามการเปลี่ยนแปลงของขั้นตอนของ Zhang, Kou,
fugal และกิ้น (2004) ตัวอย่าง (1.0-2.0 กรัม homogenates)
ถูกสกัดด้วย 10 มิลลิลิตรของสารละลายที่ประกอบด้วยน้ำ
และเมทานอลความเข้มข้น HCl (33: 50: 17: V / v / v) และ sonicated สำหรับ
20 นาที (แบรนสัน, 2510, แดนบิวรี สหรัฐอเมริกา) สารสกัดจากนั้นก็
วางไว้ในอ่างน้ำเดือด (Memmert, Duesseldorf, เยอรมนี)
เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ระบายความร้อนด้วยสารสกัดถูกหมุนเหวี่ยงที่ 2000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที
(centrifuge HIMAC, CR5BB2, HITACHI, โตเกียว, ญี่ปุ่น) ก่อนที่จะฉีด
สำหรับการวิเคราะห์ HPLC, การแก้ปัญหาที่ถูกส่งผ่าน
ตัวกรองเมมเบรน LM 0.45 (Chrom เท ?, ฟอร์ด, MA) cyanidin
และการวิเคราะห์ peodinin ได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบ HPLC
พร้อมกับน้ำ 515 เครื่องสูบน้ำ (บริษัท น้ำ, ฟอร์ด,
MA, USA) และ Jasco ยูวี 975 เครื่องตรวจจับ (Jasco อินเตอร์เนชั่นแนล จำกัด ,
โตเกียว, ญี่ปุ่น) cyanidin และ peodinin ถูกแยกออกโดยใช้ C18
คอลัมน์ (น้ำ NovaPac C18, 100 4.6 มม? บริษัท น้ำ,
ฟอร์ด, MA, USA) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.4% Trifluoroacetic
กรด (TFA) ในน้ำและ 0.4% ใน TFA acetonitrile ในอัตราส่วน 18:82
และอัตราการไหล 0.9 มิลลิลิตร / นาที Eluate คือการตรวจสอบที่ 530 นาโนเมตร
ผลการวิจัยแสดงเป็นมิลลิกรัมต่อ 100 กรัมของน้ำหนักสด
(มก. / 100 กรัม)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.7 . การหาปริมาณแอนโธไซยานินทั้งหมด ( ไซยานิดิน และพีโอนิดิน )
และเนื้อหาไซยานิดินพีโอนิดินเนื้อหาของแต่ละตัวอย่างถูก
ตามการเปลี่ยนแปลงของกระบวนการของเตีย โค และ ฟูกัล
, กิ้น ( 2004 ) ตัวอย่าง ( 1.0 และ 2.0 กรัม homogenates )
ถูกสกัดด้วย 10 มิลลิลิตรของสารละลายที่ประกอบด้วยน้ำและเมทานอลเข้มข้น HCl ( 33:50:17
: v / v / v ) และ sonicated สำหรับ
20 นาที ( แบรนสัน พ.ศ. 2510 Danbury CT , สหรัฐอเมริกา ) สารสกัดแล้ว
วางไว้ในอ่างน้ำเดือด ( MEMMERT ดุ ซลดอร์ฟ , เยอรมนี )
1 h . เย็นสารสกัดอยู่ที่ 2000 รอบต่อนาที ระดับ 30 นาที
( himac centrifuge , cr5bb2 , ฮิตาชิ , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) ก่อนฉีด
การวิเคราะห์ HPLC , สารละลายที่ผ่านแผ่นกรอง ( โคลม
0.45 อิมเทค Milford , MA )
ไซยานิดินและการวิเคราะห์ peodinin ได้ดําเนินการโดยใช้ระบบ HPLC
พร้อมกับน้ำหรือปั๊มน้ำ ( น้ำ Corporation , Milford ,
MA , USA ) และเครื่องตรวจจับรังสียูวี 975 jasco ( jasco International Co . , Ltd
โตเกียว , ญี่ปุ่น ) ไซยานิดิน และ peodinin แยกกันใช้ c18
คอลัมน์ ( น้ำ novapac c18 100 4.6 มิลลิเมตร น้ำ Corporation
Milford , MA , USA ) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.4% trifluoroacetic
acid ( กรดไขมัน ) ในน้ำและ 0.4 % ในอัตราส่วนของกรดไขมันในไน 18:82
และอัตราการไหลที่ 0.9 มิลลิลิตร / นาที สารละลาย ( eluate ) คือการตรวจสอบที่ 530 nm .
ผลแสดงเป็นมิลลิกรัมต่อน้ำหนักสด 100 กรัมของ
( มิลลิกรัม / 100 กรัม )
การแปล กรุณารอสักครู่..