2.3. STEC growth and inoculation
The STEC isolates were cultured independently in 20 ml Tryptic
Soy Broth (TSB) without dextrose (BD-Difco, Sparks, MD) using
50 ml sterile tubes at 37 C (150 rpm) for 18e24 h using a New
Brunswick Model G34 Environmental Shaker (New Brunswick,
Edison, NJ). In previous research we have found that use of TSB with
glucose alters the sensitivity of STEC by generating artificial acid
resistance not found in the actual food, which can lead to the isolates
appear more sensitive to the intervention technology (unpublished
data). The bacteria were then sedimented by
centrifugation (1200 g, Hermle Model Z206A, Hermle Labortechnik,
Germany) and resuspended in an equal volume of sterile
0.1% peptone water (SPW, BD-Difco). Thawed ground beef (10 g)
was aliquoted into 2 oz. Nasco (Ft. Atkinson, WI) Whirl-Pak bags,
inoculated with 0.1 ml of STEC, mixed manually for 30 s, and then
sealed using the Multi-Vac A300 Packager. The final concentration
of STEC in the ground beef was ca. 8 log CFU/g. The sample bags were then sealed in a second bag and stored at 4 C until HPP
treatment.
2.3 การเจริญเติบโตของ STEC และการให้วัคซีน
STEC แยกถูกเลี้ยงอย่างอิสระใน 20 มล. Tryptic
Soy Broth (TSB) โดยไม่เดกซ์โทรส (BD-Difco ประกาย, MD) โดยใช้
50 มลหลอดฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส (150 รอบต่อนาที) สำหรับ 18e24
ชั่วโมงใช้ใหม่บรันสวิกรุ่น G34 Shaker สิ่งแวดล้อม (New Brunswick,
เอดิสัน, นิวเจอร์ซีย์) ในงานวิจัยก่อนหน้านี้เราได้พบว่าการใช้ TSB
กับกลูโคสจะเปลี่ยนแปลงความไวของSTEC
โดยการสร้างกรดเทียมต้านทานไม่พบในอาหารที่เกิดขึ้นจริงซึ่งสามารถนำไปสู่เชื้อปรากฏมีความไวต่อการแทรกแซงเทคโนโลยี(ที่ไม่ได้เผยแพร่ข้อมูล) เชื้อแบคทีเรียที่ถูกตกตะกอนแล้วโดยการหมุนเหวี่ยง (1200? กรัม Hermle รุ่น Z206A, Hermle Labortechnik, เยอรมนี) และ resuspended ในปริมาณที่เท่ากันของการฆ่าเชื้อ0.1% น้ำเปปโตน (SPW, BD-Difco) เนื้อละลายพื้นดิน (10 กรัม) ถูก aliquoted เป็น 2 ออนซ์ Nasco (Ft. แอตกินสัน, WI) ถุงวนปาก, เชื้อด้วย 0.1 มล. ของ STEC ผสมด้วยตนเองสำหรับ 30 วินาทีแล้วปิดผนึกที่ใช้Multi-Vac A300 ห่อ ความเข้มข้นสุดท้ายของ STEC ในเนื้อดินที่ถูกแคลิฟอร์เนีย 8 เข้าสู่ระบบโคโลนี / กรัม ถุงตัวอย่างถูกปิดผนึกแล้วในถุงที่สองและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจน HPP รักษา
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 การเจริญเติบโตและเชื้อ STEC STEC
ไอโซเลทที่เลี้ยงอย่างอิสระในอาหารถั่วเหลือง 20 ml
broth ( TSB ) โดยไม่เดกซ์โทรส ( BD difco , ประกายไฟ , MD ) โดยใช้หลอดฆ่าเชื้อ
50 มิลลิลิตร ที่อุณหภูมิ 37 C ( 150 รอบต่อนาที ) สำหรับ 18e24 H ใช้ใหม่บรุนซ์ g34 สิ่งแวดล้อมเครื่องปั่น ( แบบ
New Brunswick , เอดิสัน NJ ) ในงานวิจัยก่อนหน้านี้พบว่า การใช้ TSB กับ
กลูโคสจะเปลี่ยนแปลงความไวของ STEC โดยการสร้างเทียมกรด
ต้านทานไม่พบในอาหารที่เกิดขึ้นจริง ซึ่งสามารถนำไปสู่การแยก
ปรากฏไวต่อการแทรกแซง เทคโนโลยี ( ข้อมูลเผยแพร่
) แบคทีเรียเป็น sedimented โดย
3 ( 1200 กรัมเฮอร์เมิลแบบ z206a เฮอร์เมิล labortechnik
, , เยอรมนี ) และ resuspended ในปริมาณเท่ากัน น้ำหมัน
0.1% ( SPW extract ,BD difco ) ละลายเนื้อดิน ( 10 g )
คือ aliquoted ออกเป็น 2 oz NASCO ( ft . Atkinson , WI ) วนปากถุงที่ใส่ของ STEC
0.1 มิลลิลิตร ผสมด้วยตนเองเป็นเวลา 30 วินาทีและจากนั้นปิดผนึกโดยใช้มัลติ
Vac A300 ขน . สุดท้ายสมาธิ
ของ STEC ในเนื้อดินได้ประมาณ 8 log CFU / g . ตัวอย่างถุงปิดผนึกแล้วในถุงที่สองและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส จน เอชพี
รักษา
การแปล กรุณารอสักครู่..