Image acquisition and analysis. Images were recorded using a
two-photon laser scanning microscope (Bio-Rad MRC-1024MP)
with excitation at 740 nm (Tsunami Ti : Sapphire laser, Spectra-
Physics) as described before (Aon et al., 2003). Briefly, owing to the
overlap in the cross-sections for two-photon excitation of the three
fluorophores of interest (Xu et al., 1996) (TMRE, CM-DCF, and
NADH or GSB) this wavelength permitted recording of Dym, ROS
production, and NAD(P)H or GSH simultaneously. The red emission
of TMRE was collected at 605±25 nm; the green emission of
CM-DCF was recorded at 525±25 nm; and the blue emission of
GSB detected at 480±20 nm. NADH emission was collected as the
total fluorescence
การควบรวมภาพและการวิเคราะห์ ภาพที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้
สองโฟตอนเลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์ (Bio-Rad MRC-1024MP)
กับการกระตุ้นที่ 740 นาโนเมตร (สึนามิ Ti: ไพลินเลเซอร์ Spectra-
ฟิสิกส์) ตามที่อธิบายไว้ก่อน (. Aon, et al, 2003) สั้น ๆ เนื่องจากการ
ทับซ้อนในส่วนข้ามสำหรับการกระตุ้นสองโฟตอนของสาม
fluorophores ที่น่าสนใจ (Xu et al., 1996) (TMRE, CM-DCF และ
NADH หรือธนาคารออมสิน) ความยาวคลื่นนี้ได้รับอนุญาตให้บันทึก DYM ชมพู
การผลิตและการ NAD (P) H หรือ GSH พร้อมกัน การปล่อยสีแดง
ของ TMRE ถูกเก็บที่ 605 ± 25 นาโนเมตร; การปล่อยสีเขียวของ
CM-DCF เป็นบันทึกที่ 525 ± 25 นาโนเมตร; และการปล่อยสีฟ้าของ
ธนาคารออมสินที่ตรวจพบที่ 480 ± 20 นาโนเมตร การปล่อย NADH ถูกเก็บรวบรวมเป็น
เรืองแสงรวม <490 นาโนเมตร ที่ 3? 5 หรือ 30 วินาทีช่วงเวลาตามที่ระบุ
8 บิต 5,126,512 พิกเซลภาพขาวดำของสามช่องทางปล่อยก๊าซเรือนกระจก
ที่ถูกเก็บรวบรวมและจัดเก็บพร้อมกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
