3. Results
3.1. Effect of temperature, 1-MCP and low oxygen on storage
of GS apple fruits
Ethylene production was monitored in different sets of
experiments every alternate day. At the time of harvest GS
apples did not produce any detectable ethylene (Fig. 1). The
untreated fruit connected to air supply started producing detectable
ethylene at day 5 at 18 °C (0.63±0.06 nl C2H4/g/h), day
12 at 7 °C (0.515±0.08 nl C2H4/g/h) and day 17 at 1 °C (0.67±
0.05 nl C2H4/g/h). Fruits connected to 1.5% O2 supply started
producing ethylene after 37 days (0.178±0.01 nl C2H4/g/h) at
18 °C, 60 days (0.19±0.02 nl C2H4/g/h) at 7 °C and 70 days
(0.2±0.01 nl C2H4/g/h) at 1 °C respectively. 1-MCP treated
fruits started producing detectable ethylene after 73, and
104 days at 18 °C and 7 °C respectively. 1-MCP treated fruits
stored at 1 °C did not produce detectable ethylene even
196 days post harvest.
3.2. Expression pattern of ethylene biosynthesis and perception
related genes
Expression pattern of ethylene biosynthesis and signal
transduction genes was analyzed in fruits 35 days post harvest
and kept at 1 °C under various conditions (Fig. 2). The
expression of MdETR1, MdACO, MdACS3 and MdADH was
observed in air, 1-MCP and 1.5% low oxygen treatments.
However, the expression of MdACS1 and MdERS1 could be
observed only fruits which were kept in air and had started
producing ethylene. No detectable transcript for MdACS1 and
MdRES1 was observed in fruits treated with 1-MCP or those
connected to or low oxygen. No detectable transcript for
MdACS2 is observed in our study. MdADH was taken in the
experiment to verify that apples were sensing low oxygen as
alcohol dehydrogenase is treated as marker for hypoxia. The
Fig. 1. Ethylene production by GS apples stored under different treatments. Ethylene
wasmeasured every day from continuous airflow fromdesiccators containing apples
using gas chromatography. The detectable ethylene produced for the first day after
storage was taken as day for ethylene production in different treatments. Average of
three readings was taken as measure of ethylene for each set. Data are expressed as
means±SD of at least 3–4 replicates. ⁎⁎ and ⁎⁎⁎ significantly different from air at
P≤0.01 and 0.001, respectively, according to Student's unpaired t-test.
Fig. 2. Accumulation of transcripts for different genes after 35 days post harvest
under different treatments stored at 1 °C. C, control fruits connected to
continuous air flow; L, fruits under continuous 1.5% O2 air flow; M, fruits
pretreated with 1-MCP and connected to continuous air flow. Northern blot
analysis was carried out using 30 μg total RNA samples electrophoresed and
probed with respective radiolabelled probes. Ethidium bromide staining of gel is
shown below the blot as loading control.
3. ผลการ
3.1 ผลของอุณหภูมิ, 1-MCP และออกซิเจนต่ำในการจัดเก็บข้อมูล
ของผลไม้แอปเปิ้ล GS
การผลิตเอทิลีนได้รับการตรวจสอบในชุดที่แตกต่างของ
การทดลองทุกวันสลับกัน ในช่วงเวลาของการเก็บเกี่ยว GS
แอปเปิ้ลไม่ได้ผลิตเอทิลีนใด ๆ ที่ตรวจพบ (รูปที่ 1).
ผลไม้ที่ได้รับการรักษาที่เชื่อมต่อกับอากาศที่เริ่มผลิตตรวจพบ
เอทิลีนในวันที่ 5 ที่ 18 ° C (0.63 ± 0.06 nl C2H4 / g / ชั่วโมง) วัน
ที่ 7 12 ° C (0.515 ± 0.08 nl C2H4 / g / h) และวันที่ 17 วันที่ 1 ° C (0.67 ±
0.05 nl C2H4 / g / h) ผลไม้ที่เชื่อมต่อกับ 1.5% อุปทาน O2 เริ่มต้น
การผลิตเอทิลีนหลังจาก 37 วัน (0.178 ± 0.01 nl C2H4 / g / h) ที่
18 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 วัน (0.19 ± 0.02 nl C2H4 / g / h) ที่ 7 องศาเซลเซียสและ 70 วัน
( 0.2 ± 0.01 nl C2H4 / g / h) ณ วันที่ 1 ° C ตามลำดับ 1-MCP รับการรักษา
ผลไม้เริ่มต้นการผลิตเอทิลีนที่ตรวจพบหลังจากที่ 73 และ
104 วันที่ 18 องศาเซลเซียสและ 7 องศาเซลเซียสตามลำดับ 1-MCP รับการรักษาผลไม้
ที่เก็บไว้ ณ วันที่ 1 ° C ไม่ได้ผลิตเอทิลีนที่ตรวจพบแม้กระทั่ง
196 วันหลังการเก็บเกี่ยว.
3.2 รูปแบบการแสดงออกของการสังเคราะห์เอทิลีนและการรับรู้
ของยีนที่เกี่ยวข้องกับ
รูปแบบการแสดงออกของการสังเคราะห์เอทิลีนและสัญญาณ
ยีนพลังงานได้รับการวิเคราะห์ในผลไม้ 35 วันหลังการเก็บเกี่ยว
และเก็บไว้ ณ วันที่ 1 ° C ภายใต้เงื่อนไขต่าง ๆ (รูปที่ 2).
การแสดงออกของ MdETR1, MdACO, MdACS3 MdADH และถูก
ตั้งข้อสังเกตในอากาศ, 1-MCP และ 1.5% การรักษาออกซิเจนต่ำ.
แต่การแสดงออกของ MdACS1 MdERS1 และอาจจะมีการ
ตั้งข้อสังเกตผลไม้เท่านั้นที่ถูกเก็บไว้ในอากาศและได้เริ่ม
การผลิตเอทิลีน ไม่มีหลักฐานที่ตรวจพบสำหรับ MdACS1 และ
MdRES1 พบว่าในผลไม้ที่รับการรักษาด้วย 1-MCP หรือผู้ที่
เชื่อมต่อกับหรือออกซิเจนต่ำ ไม่มีหลักฐานที่ตรวจพบสำหรับ
MdACS2 เป็นที่สังเกตในการศึกษาของเรา MdADH ถูกนำใน
การทดลองเพื่อตรวจสอบว่าแอปเปิ้ลได้รับการตรวจวัดออกซิเจนต่ำเป็น
dehydrogenase แอลกอฮอล์จะถือว่าเป็นเครื่องหมายสำหรับการขาดออกซิเจน
รูป 1. การผลิตเอทิลีนโดยแอปเปิ้ล GS เก็บอยู่ภายใต้การรักษาที่แตกต่างกัน เอทิลีน
wasmeasured ทุกวันตั้งแต่ fromdesiccators ไหลเวียนของอากาศอย่างต่อเนื่องที่มีแอปเปิ้ล
ใช้แก๊สโครมา เอทิลีนที่ตรวจพบการผลิตสำหรับวันแรกหลังจาก
การจัดเก็บข้อมูลที่ถูกนำมาเป็นวันสำหรับการผลิตเอทิลีนในการรักษาที่แตกต่างกัน เฉลี่ย
อ่านสามถูกนำมาเป็นตัวชี้วัดของเอทิลีนสำหรับแต่ละชุด ข้อมูลจะแสดงเป็น
หมายความ SD ±อย่างน้อย 3-4 ซ้ำ ⁎⁎และ⁎⁎⁎อย่างมีนัยสำคัญที่แตกต่างจากอากาศที่
P≤0.01และ 0.001 ตามลำดับตาม unpaired นักเรียน t-test.
รูป 2. ใบรับรองผลการเรียนสะสมของยีนที่แตกต่างกัน 35 วันหลังจากที่โพสต์เก็บเกี่ยว
ภายใต้การรักษาที่แตกต่างกันเก็บไว้ที่ 1 ° C C, ผลไม้เชื่อมต่อกับการควบคุม
การไหลของอากาศอย่างต่อเนื่อง L, ผลไม้ภายใต้อย่างต่อเนื่อง 1.5% O2 การไหลของอากาศ; M, ผลไม้
ปรับสภาพด้วย 1-MCP และเชื่อมต่อกับการไหลของอากาศอย่างต่อเนื่อง ภาคเหนือ blot
การวิเคราะห์ได้ดำเนินการโดยใช้ 30 ไมโครกรัมตัวอย่าง RNA ทั้งหมด electrophoresed และ
การตรวจสอบกับยานสำรวจรังสีที่เกี่ยวข้อง ethidium bromide การย้อมสีของเจล
ที่แสดงด้านล่าง blot การควบคุมการโหลด
การแปล กรุณารอสักครู่..
3 . ผลลัพธ์
3.1 . ผลของอุณหภูมิและออกซิเจนต่ำในการเก็บรักษาผลไม้
ของ GS แอปเปิ้ลการผลิตเอทธิลีนถูกตรวจสอบในชุดที่แตกต่างกันของ
การทดลองทุกสลับวัน ในเวลาของการเก็บเกี่ยว GS
แอปเปิ้ลไม่ผลิตใด ๆ ที่ตรวจพบเอทิลีน ( รูปที่ 1 )
ดิบผลไม้เชื่อมต่อกับอากาศเริ่มผลิตได้
เอทิลีนในวันที่ 5 ที่ 18 ° C ( 0.63 ± 0.06 NL c2h4 / g / H ,
) วัน12 7 ° C ( 0.515 ± 0.08 NL c2h4 / G / H ) และวันที่ 17 ที่ 1 ° C ( 0.67 ±
+ n1 c2h4 / G / H ) ผลไม้เชื่อมต่อกับ 1.5 % O2
อุปทานเริ่มการผลิตเอทิลีนหลัง 37 วัน ( 0.178 ± 0.01 NL c2h4 / G / H )
18 ° C 60 วัน ( 0.19 ± 0.02 NL c2h4 / G / H ) ที่ 7 องศา C และ 70 วัน
( 0.2 ± 0.01 NL c2h4 / G / H ) 1 ° C ตามลำดับ สามารถรักษาผลไม้เริ่มการผลิตเอทิลีนหลังได้
73 , และ104 วันที่ 18 ° C และ 7 ° C ตามลำดับ สามารถรักษาผลไม้
เก็บไว้ที่ 1 ° C ไม่ผลิตเอทิลีนได้แม้หลังการเก็บเกี่ยว 196 วัน
.
2 . รูปแบบการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับวิถีการสังเคราะห์เอทิลีนและการรับรู้
รูปแบบการแสดงออกของยีนในวิถีการสังเคราะห์เอทิลีนและส่งสัญญาณ
ถูกวิเคราะห์ในผลไม้หลังการเก็บเกี่ยว
35 วัน และเก็บไว้ที่ 1 ° C ภายใต้เงื่อนไขต่าง ๆ ( รูปที่ 2 )
การแสดงออกของ mdetr1 mdaco mdacs3 , และ , mdadh คือ
สังเกตในอากาศ 1-MCP และ 1.5 % การรักษาออกซิเจนต่ำ .
แต่การแสดงออกและ mdacs1 mders1 อาจ
สังเกตเพียงผลไม้ซึ่งถูกเก็บไว้ในอากาศและเริ่ม
การผลิตเอทิลีน ยังไม่พบหลักฐานที่ mdacs1
mdres1 และพบว่าผลไม้ที่ได้รับ 1-MCP ที่
เกี่ยวข้องหรือออกซิเจนต่ำ ไม่พบสำเนา
mdacs2 เป็นที่สังเกตในการศึกษาของเรา mdadh ถ่ายใน
ทดลองเพื่อตรวจสอบว่าแอปเปิ้ลกำลังตรวจจับออกซิเจนต่ำเป็น
ยาถ่ายถือว่าเป็นเครื่องหมายสำหรับสังคม
รูปที่ 1 การผลิตเอทิลีนจาก GS แอปเปิ้ลเก็บไว้ภายใต้การรักษาที่แตกต่างกัน เอธิ
วัดทุกวันจากอย่างต่อเนื่องให้ fromdesiccators ที่มีแอปเปิ้ล
โดยใช้แก๊สโครมาโทกราฟีเอทิลีนสามารถผลิตวันแรกหลัง
กระเป๋าถ่ายเป็นวันสำหรับการผลิตเอทธิลีนในการรักษาที่แตกต่างกัน เฉลี่ย
3 อ่านถ่ายเป็นวัดของเอทิลีนในแต่ละชุด ข้อมูลที่แสดงเป็น
หมายถึง SD ±อย่างน้อย 3 – 4 ได้แก่ และ⁎⁎⁎⁎⁎แตกต่างจากอากาศที่
P ≤ 0.01 และ 0.001 ตามลำดับ ตามสถิติ Unpaired นักเรียน .
รูปที่ 2การสะสมของยีนสำหรับยีนที่แตกต่างกันหลังจาก 35 วัน หลังการเก็บเกี่ยว
ภายใต้การรักษาที่แตกต่างกันที่อุณหภูมิ 1 องศา C . C , การควบคุมการไหลของอากาศอย่างต่อเนื่อง ผลไม้เชื่อมต่อ
; L , ผลไม้ภายใต้การไหลของอากาศอย่างต่อเนื่อง 1.5 % O2
; M , ผลไม้ได้รับชุดและเชื่อมต่อกับการไหลของอากาศอย่างต่อเนื่อง การวิเคราะห์ทางเหนือเปรอะเปื้อน
ได้ดําเนินการใช้ 30 μอาร์เอ็นเอตัวอย่าง electrophoresed และ
g รวมตรวจสอบที่เกี่ยวข้อง radiolabelled เครื่องมือตรวจสอบ ทิเดียมโบรไมด์ชนิดของเจล
แสดงด้านล่างเป็นโหลดต่อการควบคุม
การแปล กรุณารอสักครู่..