Grains: Isolation of Bacteria from Kefir Grains
The LAB were isolated by dilution and plating from 4 kefir grains collected in different regions of Brazil. Briefly, 10 g of each kefir sample was homogenized in 90 mL of sodium citrate (2%). Serial decimal dilutions were obtained and plated on lactobacilli de Man, Rogosa, Sharpe (MRS) and M17 agar media (Difco, Sparks, MD) supplemented with 200 μg/mL of cycloheximide (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), and incubated in aerobic and anaerobic (Gaspak EZ, Difco) conditions at 30°C for 72 h. Representative colonies of all morphologies were taken randomly and purified on the same media by subculturing. Gram-positive, catalase-negative isolates were considered as presumptive LAB, which were stored in 15% glycerol at −80°C.
For all subsequent assays, LAB were activated in the corresponding media at 30°C for 18 to 24 h, and subcultured in the same conditions.
ธัญพืช : การแยกเชื้อแบคทีเรียจาก kefir ธัญพืชห้องปฏิบัติการที่แยกได้โดยการเจือจางและชุบจาก 4 kefir ธัญพืชที่เก็บในภูมิภาคต่าง ๆของบราซิล สั้น ๆ , 10 กรัมในแต่ละตัวอย่างถูกบดในคีเฟอร์ 90 ml ของโซเดียมซิเตรต ( 2% ) อนุกรมทศนิยมเจือจางได้และชุบในแลคโตบาซิลัส เดอ ชาย rogosa ชาร์ป , ( นาง ) และ m17 อาหารวุ้น ( difco , ประกายไฟ , MD ) เสริมด้วยμ 200 g / ml ร้อยเรียง ( ซิกม่า Aldrich St . Louis , MO ) บ่มในแอโรบิค และ anaerobic ( gaspak คือ , difco ) เงื่อนไขที่ 30 เมตร C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง ผู้แทนอาณานิคมของโครงสร้างถูกสุ่มและบริสุทธิ์ในสื่อเดียวกันโดยการ . แกรมบวก สามารถลบไอโซเลทถือว่าให้ผลแล็บ ซึ่งถูกเก็บไว้ใน 15 % กลีเซอรอลที่− 80 องศาสำหรับวิธีที่ตามมาทั้งหมด ถูกใช้งานในแล็บสื่อที่ 30 ° C 18 ถึง 24 ชั่วโมง และ subcultured ในเงื่อนไขเดียวกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
