An isothermal titration calorimeter is composed of two identical cells made of a highly efficient thermally conducting and chemically inert material such as Hastelloy alloy or gold, surrounded by an adiabatic jacket.[2] Sensitive thermopile/thermocouple circuits are used to detect temperature differences between the reference cell (filled with buffer or water) and the sample cell containing the macromolecule. Prior to addition of ligand, a constant power (<1 mW) is applied to the reference cell. This directs a feedback circuit, activating a heater located on the sample cell.[3] During the experiment, ligand is titrated into the sample cell in precisely known aliquots, causing heat to be either taken up or evolved (depending on the nature of the reaction). Measurements consist of the time-dependent input of power required to maintain equal temperatures between the sample and reference cells.In an exothermic reaction, the temperature in the sample cell increases upon addition of ligand. This causes the feedback power to the sample cell to be decreased (remember: a reference power is applied to the reference cell) in order to maintain an equal temperature between the two cells. In an endothermic reaction, the opposite occurs; the feedback circuit increases the power in order to maintain a constant temperature (isothermic/isothermal operation).สังเกตมีพล็อตเป็นพลังงานที่จำเป็นในการรักษาเซลล์ตัวอย่างที่มีอุณหภูมิเหมือนกับเวลาและการอ้างอิง ดัง ข้อมูลวัตถุดิบทดลองประกอบด้วยชุดของ spikes กระแสความร้อน (พลังงาน), กับสไปค์ทุกที่สอดคล้องกับลิแกนด์หนึ่งฉีด เหล่านี้ความร้อนกระแส spikes/กะพริบ อยู่รวมกับเวลา ให้ความร้อนทั้งหมดที่แลกเปลี่ยนต่อการฉีด รูปแบบของผลกระทบความร้อนเหล่านี้เป็นฟังก์ชันของอัตราส่วนสบ [ลิแกนด์] / [macromolecule] สามารถแล้ว analysed ให้พารามิเตอร์ทางอุณหพลศาสตร์ของการโต้ตอบภายใต้การศึกษา ก็ควรจดบันทึกว่า degassing ตัวอย่างมักจะจำเป็นเพื่อให้ได้การประเมินที่ดีเป็นของฟองก๊าซภายในเซลล์ตัวอย่างจะทำให้ข้อมูลผิดปกติผืนในบันทึกผลการ ทดลองทั้งหมดเกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของคอมพิวเตอร์
การแปล กรุณารอสักครู่..