Pretreated skin was soaked in 0.5 M acetic acid with a solid to solvent ratio of 1:15 (w/v) for 48 h with continuous stirring using an overhead stirrer model W20.n (IKA-Werke GmbH & CO.KG, Stanfen, Germany). The mixtures were filtered with two layers of cheesecloth. The collagen in the filtrate was precipitated by adding NaCl to a final concentration of 2.6 M in the presence of 0.05 M tris(hydroxymethyl) aminomethane at pH 7.5. The resultant precipitate was collected by centrifugation at 20,000g at 4 C for 60 min using a refrigerated centrifuge model Avanti J-E (Beckman Coulter, Inc., Palo Alto, CA, USA). The pellet was dissolved in a minimum volume of 0.5 M acetic acid, dialysed against 25 volumes of
0.1 M acetic acid for 12 h. Thereafter, it was dialysed against 25 volumes of distilled water for 48 h. The resulting dialysate was freeze dried and referred to as ‘‘acid soluble collagen, ASC”.
ปรับสภาพผิวที่ถูกแช่ใน 0.5 M กรดอะซิติกกับของแข็งต่อตัวทำละลายของ 1:15 (w / v) เวลา 48 ชั่วโมงกับกวนอย่างต่อเนื่องโดยใช้เครื่องกวนค่าใช้จ่ายแบบ W20.n (IKA? -Werke GmbH & CO.KG, Stanfen , เยอรมนี) ผสมถูกกรองที่มีสองชั้นของผ้า คอลลาเจนในการกรองได้รับการตกตะกอนโดยการเพิ่มโซเดียมคลอไรด์ที่จะมีความเข้มข้นสุดท้ายของ 2.6 M ในการปรากฏตัวของ 0.05 M tris (hydroxymethyl) aminomethane ที่ pH 7.5 ตะกอนผลถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 20,000g ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาทีโดยใช้แบบจำลองเหวี่ยงตู้เย็น Avanti? JE (Beckman Coulter, Inc พาโลอัลโต, CA, USA) เม็ดถูกกลืนหายไปในปริมาณขั้นต่ำที่ 0.5 M กรดอะซิติก, ไตกับ 25 เล่ม
0.1 M กรดอะซิติกเป็นเวลา 12 ชั่วโมง หลังจากนั้นมันก็ไตกับ 25 ปริมาณน้ำกลั่นเป็นเวลา 48 ชั่วโมง แปรผลที่ถูกแช่แข็งแห้งและเรียกว่า '' คอลลาเจนที่ละลายกรด ASC "
การแปล กรุณารอสักครู่..