ELISA protocolIgG was prepared by c

ELISA protocol
IgG was prepared by chromatography on Protein A
Sepharose. Puri®ed BS1-IgG was coupled to biotin; the
BS1-IgG was separated from the free biotin by gel ®ltration
(Guesdon et al. 1979).
One hundred microlitre volumes were used in each well
for the ELISA, unless stated otherwise, with samples
loaded in duplicate and incubation stages carried out in a
humid chamber at 37 C. Samples and standards were
diluted in PBST (0
05 mol l
ÿ1 phosphate, 0
15 mol l
ÿ1
NaCl, 0
01% Tween 20, pH 7
4), which was supplemented
with 1% bovine serum albumin (BSA) for the dilution of
BS1-IgG-biotin and streptavidin-alkaline phosphatase. In
between each stage, plates (Dyrex Technologies,
Billinghurst, UK) were washed three times with PBST.
Plates were coated with BS1-IgG diluted to 5 mg mlÿ1 in

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โพรโทคอล ELISAIgG ถูกเตรียม chromatography บนโปรตีน ASepharose Puri® ed BS1 IgG ถูกควบคู่กับไบโอติน การBS1 IgG ถูกแยกออกจากไบโอตินฟรี โดยเจล® เป็น(Guesdon et al. 1979)ใช้ปริมาณหนึ่งร้อย microlitre ในแต่ละดีสำหรับ ELISA เว้นแต่ระบุไว้เป็นอย่างอื่น ตัวอย่างโหลดในขั้นตอนที่ดำเนินการซ้ำและบ่มตัวห้องชื้นที่ 37 C. ตัวอย่างและมาตรฐานได้เจือจางใน PBST (โมล 0 05 lÿ1 ฟอสเฟต 0 15 mol lÿ1NaCl, 0 01% แต่ 20, pH 7 4), ซึ่งถูกเสริมกับ 1% วัว serum albumin (บีเอสเอ) สำหรับการเจือจางของBS1-IgG-ไบโอติน และ streptavidin อัลคาไลน์ฟอสฟา ในระหว่างแต่ละขั้นตอน แผ่น (เทคโนโลยี DyrexBillinghurst, UK) ถูกล้าง 3 ครั้ง ด้วย PBSTแผ่นถูกเคลือบ ด้วยผสมกับ mlÿ1 5 mg ใน BS1 IgG

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธี ELISA โปรโตคอล
IgG ถูกจัดทำขึ้นโดยโครมาโตในโปรตีน
Sepharose Puri®ed BS1-IgG ถูกคู่กับไบโอติน;
BS1-IgG ถูกแยกออกจากไบโอตินฟรีโดยเจล®ltration
(Guesdon et al. 1979).
หนึ่งร้อยเล่มไมโครลิตรถูกนำมาใช้ในแต่ละดี
สำหรับวิธี ELISA ยกเว้นที่ระบุไว้เป็นอย่างอื่นกับกลุ่มตัวอย่าง
ในการโหลดที่ซ้ำกันและการบ่มขั้นตอนการดำเนินการใน
ห้องชื้นที่ 37 องศาเซลเซียส ตัวอย่างและมาตรฐานถูก
เจือจางใน PBST (0? 05 mol L
Y1 ฟอสเฟต, 0? 15 mol L
Y1
โซเดียมคลอไรด์, 0? 01% Tween 20 พีเอช 7? 4) ซึ่งได้รับการเสริม
ด้วย 1% อัลบูมิวัวซีรั่ม (BSA) สำหรับ การลดสัดส่วนของ
BS1-IgG-ไบโอตินและฟอสฟาเตอัลคาไลน์ ใน
ระหว่างแต่ละขั้นตอน, จาน (Dyrex Technologies,
Billinghurst สหราชอาณาจักร) ถูกล้างสามครั้งด้วย PBST.
แผ่นถูกเคลือบด้วย BS1-IgG ลดลงเหลือ 5 mlÿ1มิลลิกรัม