A sensitive and selective reverse-p

A sensitive and selective reverse-phase high performance liquid chromatographic method with fluorescence detection has been developed for determination of capsaicin (8-methyl-N-vanillyl-(trans)-6-nonenamid) and dihydrocapsaicin (8-methyl-N-vanillylnonanamide) in samples generated in rat small intestine luminal perfusion experiments. The experiments were designed to study the biotransformation of capsaicinoids in the small intestine in the rat. The chromatographic separation was performed at room temperature on a ZORBAX Eclipse® XDB-C8 column using isocratic elution with a mobile phase consisting 0.05M orthophosphoric acid solution and acetonitrile (60:40, v/v; pH 3.0) with a flow rate of 1.5mL/min. Fluorescence detection was performed at excitation and emission wavelengths of 230 and 323nm, respectively. The method was evaluated for a number of validation characteristics (accuracy, repeatability and intermediate precision, limit of detection, limit of quantification and calibration range). The limit of detection (LOD) was 50ng/mL and the limit of quantification (LOQ) was 100ng/mL for both capsaicin and dihydrocapsaicin reference standards dissolved in blank perfusate. The method was successfully applied for investigation of intestinal absorption of capsaicin and dihydrocapsaicin while 30μg/mL standardized Capsicum extract - containing capsaicin and dihydrocapsaicin - was luminally perfused for a 90min period. The structure of the glucuronide metabolites of capsaicin and dihydrocapsaicin appeared in the perfusate was identified by mass spectrometry.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประสิทธิภาพสูงมีความสำคัญ และเลือกกลับเฟสโครมาวิธีของเหลว ด้วยการตรวจหาสารเรืองแสงได้รับการพัฒนาสำหรับการวัดปริมาณของแคปไซซิน (8-methyl-N-vanillyl-(trans)-6-nonenamid) และ dihydrocapsaicin (8-เมทิล-N-vanillylnonanamide) ในตัวอย่างที่สร้างขึ้นในหนูทดลอง luminal กำซาบของลำไส้เล็ก การทดลองที่ได้ออกแบบมาเพื่อศึกษา biotransformation ของ capsaicinoids ในลำไส้เล็กในหนู การแยกโครมาทำที่อุณหภูมิห้องในคอลัมน์ ZORBAX Eclipse® XDB-C8 isocratic คิดชะด้วยเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยโซลูชันกรด orthophosphoric 0.05M และ acetonitrile (เบาะ v/v ค่า pH 3.0) มีอัตราการไหลของ 1.5 mL/นาที สารเรืองแสงในการตรวจหาดำเนินการที่กระตุ้นและปล่อยความยาวคลื่น 230 และ 323nm ตามลำดับ วิธีการรับการประเมินสำหรับการตรวจสอบลักษณะ (ความถูกต้อง ทำซ้ำ และความ แม่นยำปานกลาง ขีดจำกัดของการตรวจสอบ จำนวนนับและการสอบเทียบช่วง) ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (LOD) 50ng/mL และจำนวนนับ (ของ LOQ) 100ng/mL สำหรับแคปไซซินและ dihydrocapsaicin มาตรฐานอ้างอิงใน perfusate ว่างเปล่า วิธีการถูกนำไปใช้เพื่อการตรวจสอบของลำไส้การดูดซึมของแคปไซซินและ dihydrocapsaicin ขณะ 30μg/mL มาตรฐานพริกสารสกัด -ประกอบด้วยแคปไซซินและ dihydrocapsaicin - luminally เป็นหลอดเข้าไปเลี้ยงเป็นเวลา 90 นาที โครงสร้างของ glucuronide สารแคปไซซินและ dihydrocapsaicin ปรากฏใน perfusate ที่ถูกระบุ โดยรเมท

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไวและเลือกกลับเฟสที่มีประสิทธิภาพสูงวิธีโครมาของเหลวที่มีการตรวจสอบการเรืองแสงได้รับการพัฒนาสำหรับการกำหนด capsaicin (8-methyl-N-vanillyl- (ทรานส์) -6-nonenamid) และ dihydrocapsaicin (8-methyl-N-vanillylnonanamide) ในตัวอย่างนี้สร้างขึ้นในหนูทดลองลำไส้เล็ก luminal ปะ การทดลองได้รับการออกแบบเพื่อการศึกษาเปลี่ยนรูปทางชีวภาพของ capsaicinoids ในลำไส้เล็กในหนู การแยกสารได้ดำเนินการที่อุณหภูมิห้องในคอลัมน์ ZORBAX Eclipse® XDB-C8 ใช้ชะ isocratic กับเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.05M สารละลายกรด orthophosphoric และ acetonitrile (60:40 v / V; ค่า pH 3.0) ที่มีอัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร / นาที การตรวจสอบการเรืองแสงได้รับการดำเนินการในการกระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น 230 และ 323nm ตามลำดับ วิธีการที่ได้รับการประเมินสำหรับจำนวนของลักษณะการตรวจสอบ (ความถูกต้องและความแม่นยำในการทำซ้ำกลางขีด จำกัด ของการตรวจสอบขีด จำกัด ของปริมาณและช่วงการสอบเทียบ) ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) เป็น 50ng / มิลลิลิตรและขีด จำกัด ของปริมาณ (LOQ) เป็น 100ng / mL สำหรับทั้ง capsaicin และมาตรฐานอ้างอิง dihydrocapsaicin ละลายใน perfusate ว่างเปล่า วิธีการที่ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จสำหรับการตรวจสอบของการดูดซึมในลำไส้ของ capsaicin และ dihydrocapsaicin ขณะ30μg / มลสารสกัดจากพริกที่ได้มาตรฐาน - มี capsaicin และ dihydrocapsaicin - ถูก perfused luminally สำหรับระยะเวลา 90min โครงสร้างของสาร glucuronide ของ capsaicin และ dihydrocapsaicin ปรากฏใน perfusate ถูกระบุมวลสาร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่มีประสิทธิภาพสูงและเลือกกลับเฟสของเหลวโครมาโทกราฟีวิธีตรวจจับการเรืองแสงที่ได้รับการพัฒนาสำหรับการหาปริมาณแคปไซซิน ( 8-methyl-n-vanillyl - ( ทรานส์ ) - 6-nonenamid ) และไดไฮโดรแคปไซซิน ( 8-methyl-n-vanillylnonanamide ) ในตัวอย่างที่สร้างขึ้นในลําไส้เล็ก + หนู ผ่านการทดลอง การทดลองเพื่อศึกษาการออกแบบของแคปไซซินอยด์ในลำไส้ใหญ่ในหนู การแยกและแสดงอุณหภูมิห้องบน zorbax คราส® xdb-c8 คอลัมน์โดยใช้เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยแบบ Isocratic ( 0.05m ออร์โธฟอสฟอริกแอซิดโซลูชั่นและไน ( 60 : 40 , v / V ; pH 3.0 ) ด้วยอัตราการไหล 1.5ml/min การตรวจจับการกระทำที่กระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น 230 และ 323nm ตามลำดับ วิธีการทดสอบสำหรับจำนวนของลักษณะ ( การตรวจสอบความถูกต้องและความแม่นยำของการตรวจระดับกลาง จำกัด จำกัด ปริมาณและช่วงของการสอบเทียบ ) ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) คือ 50ng / ml และข้อจำกัดของปริมาณ ( loq ) คือ 100ng / ml ทั้งแคปไซซินและมาตรฐานอ้างอิงไดไฮโดรแคปไซซินละลายใน perfusate ที่ว่างเปล่า วิธีสามารถนำมาประยุกต์ ใช้ในการศึกษาการดูดซึมลำไส้ของแคปไซซินไดไฮโดรแคปไซซินและในขณะที่ 30 μ g / ml สารสกัดจากพริก capsaicin ที่มีมาตรฐาน และไดไฮโดรแคปไซซิน - luminally สุกรสำหรับออนไลน์ระยะเวลา โครงสร้างของ glucuronide metabolites ของแคปไซซิน และไดไฮโดรแคปไซซินที่ปรากฏใน perfusate ถูกระบุโดยแมสสเปกโทรเมตรี