Since protein kinases have been imp

Since protein kinases have been implicated in numerous human diseases, kinase inhibitors have emerged as promising therapeutic agents. Despite this promise, there has been a relative lag in the development of unbiased strategies to validate both inhibitor specificity and the ability to inhibit target activity within living cells. To overcome these limitations, our efforts have been focused on the development of systematic strategies that employ chemical and functional proteomics. We utilized these strategies to evaluate small molecule inhibitors of protein kinase CK2, a constitutively active kinase that has recently emerged as target for anti-cancer therapy in clinical trials. Our chemical proteomics strategies used ATP or CK2 inhibitors immobilized on sepharose beads together with mass spectrometry to capture and identify binding partners from cell extracts. These studies have verified that interactions between CK2 and its inhibitors occur in complex mixtures. However, in the case of CK2 inhibitors related to 4,5,6,7-tetrabromo-1H-benzotriazole (TBB), our work has also revealed off-targets for the inhibitors. To complement these studies, we devised functional proteomics approaches to identify proteins that exhibit decreases in phosphorylation when cells are treated with CK2 inhibitors. To identify and validate those proteins that are direct substrates for CK2, we have also employed mutants of CK2 with decreased inhibitor sensitivity. Overall, our studies have yielded systematic platforms for studying CK2 inhibitors which we believe will foster efforts to define the biological functions of CK2 and to rigorously investigate its potential as a candidate for molecular-targeted therapy. This article is part of a Special Issue entitled: Inhibitors of Protein Kinases (2012).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เนื่องจากมีการเกี่ยวข้อง kinases โปรตีนในโรคมนุษย์มากมาย kinase inhibitors ได้เกิดเป็นตัวแทนรักษาสัญญา แม้สัญญานี้ มีความล่าช้าที่เกี่ยวข้องในการพัฒนากลยุทธ์คนเพื่อตรวจสอบผล specificity และความสามารถในการยับยั้งกิจกรรมเป้าหมายภายในเซลล์อยู่ เพื่อเอาชนะข้อจำกัดเหล่านี้ ความพยายามของเราได้ถูกเน้นในการพัฒนากลยุทธ์ระบบที่ใช้สารเคมี และการทำงานโปรตีโอมิกส์ เราใช้กลยุทธ์เหล่านี้จะประเมิน inhibitors โมเลกุลขนาดเล็กของโปรตีน kinase CK2, kinase constitutively งานที่เพิ่งได้ผงาดขึ้นเป็นเป้าหมายของการรักษาโรคมะเร็งป้องกันในคลินิก กลยุทธ์ของเราโปรตีโอมิกส์เคมีใช้ ATP หรือ CK2 inhibitors ตรึงบน sepharose ประคำพร้อมรเมท และระบุการผูกพันธมิตรจากเซลล์สารสกัดจาก การศึกษานี้ได้ตรวจสอบว่า ระหว่าง CK2 และ inhibitors ที่เกิดขึ้นในส่วนผสมที่ซับซ้อน อย่างไรก็ตาม ในกรณีของ CK2 inhibitors ที่เกี่ยวข้องกับ 4,5,6,7-tetrabromo-1 H-benzotriazole (TBB), งานของเรายังได้เปิดเผยปิดเป้าหมายสำหรับ inhibitors ที่ เพื่อเติมเต็มการศึกษาเหล่านี้ เราคิดค้นวิธีทำโปรตีโอมิกส์ระบุโปรตีนที่ลดลงแสดงใน phosphorylation เมื่อเซลล์ได้รับ CK2 inhibitors เพื่อระบุ และตรวจสอบโปรตีนเหล่านั้นที่พื้นผิวโดยตรงสำหรับ CK2 นอกจากนี้เราได้จ้างสายพันธุ์ของ CK2 มีสารยับยั้งการลดลงความไว โดยรวม การศึกษาของเรามีผลแพลตฟอร์มระบบสำหรับการศึกษา CK2 inhibitors ซึ่งเราเชื่อว่า จะส่งเสริมความพยายามที่ จะกำหนดหน้าที่ทางชีวภาพของ CK2 และ การทดสอบตรวจสอบศักยภาพเป็นบำบัดโมเลกุลเป้าหมาย บทความนี้เป็นส่วนหนึ่งของปัญหาพิเศษที่ได้รับ: Inhibitors โปรตีน Kinases (2012) .

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตั้งแต่โปรตีนไคเนสได้รับการที่เกี่ยวข้องในการเกิดโรคของมนุษย์จำนวนมากโปรตีนไคเนสได้กลายเป็นตัวแทนในการรักษาสัญญา แม้จะมีสัญญานี้ได้มีการล่าช้าในการพัฒนาความสัมพันธ์ของกลยุทธ์ที่เป็นกลางในการตรวจสอบทั้งยับยั้งจำเพาะและความสามารถในการยับยั้งกิจกรรมเป้าหมายภายในเซลล์ที่มีชีวิต ที่จะเอาชนะข้อ จำกัด เหล่านี้ความพยายามของเราได้รับการมุ่งเน้นไปที่การพัฒนากลยุทธ์ระบบที่ใช้สารเคมีและโปรตีนทำงาน เราใช้กลยุทธ์เหล่านี้เพื่อประเมินผลการยับยั้งโมเลกุลขนาดเล็กของโปรตีนไคเนส CK2, ไคเนสที่ใช้งาน constitutively ที่ได้เกิดเมื่อเร็ว ๆ นี้เป็นเป้าหมายสำหรับการบำบัดป้องกันมะเร็งในการทดลองทางคลินิก กลยุทธ์โปรตีนสารเคมีที่เราใช้เอทีพีหรือ CK2 สารยับยั้งการตรึงบนเม็ด Sepharose ร่วมกับมวลสารในการจับและระบุคู่ค้าที่มีผลผูกพันจากสารสกัดจากเซลล์ การศึกษาเหล่านี้ได้รับการตรวจสอบว่ามีปฏิสัมพันธ์ระหว่าง CK2 และสารยับยั้งที่เกิดขึ้นในการผสมที่ซับซ้อน แต่ในกรณีของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ CK2 4,5,6,7-tetrabromo-1H-benzotriazole (TBB), การทำงานของเรายังได้รับการเปิดเผยออกเป้าหมายในการยับยั้ง เพื่อเสริมการศึกษาเหล่านี้เราวางแผนวิธีการโปรตีนทำงานในการระบุโปรตีนที่แสดงลดลงใน phosphorylation เมื่อเซลล์ได้รับการรักษาด้วยสารยับยั้ง CK2 การระบุและการตรวจสอบโปรตีนที่เป็นพื้นผิวโดยตรงสำหรับ CK2 เรายังมีงานการกลายพันธุ์ของ CK2 มีความไวยับยั้งลดลง โดยรวมแล้วการศึกษาของเราได้ผลเป็นระบบแพลตฟอร์มสำหรับการศึกษาสารยับยั้ง CK2 ซึ่งเราเชื่อว่าจะส่งเสริมความพยายามที่จะกำหนดฟังก์ชั่นทางชีวภาพของ CK2 อย่างจริงจังและตรวจสอบที่มีศักยภาพในการเป็นผู้สมัครสำหรับการบำบัดโมเลกุลเป้าหมาย บทความนี้เป็นส่วนหนึ่งของรุ่นพิเศษสิทธิ: สารยับยั้งโปรตีนไคเนสของ (2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เนื่องจากยาโปรตีนต้องติดร่างแหไปด้วยโรคในมนุษย์หลาย kinase inhibitors มีชุมนุมเป็นสัญญาตัวแทนผู้ แม้จะมีสัญญา , มีญาติ ความล่าช้าในการพัฒนากลยุทธ์ที่ปราศจากอคติ เพื่อตรวจสอบทั้งยับยั้ง ความจำและความสามารถในการยับยั้งกิจกรรมเป้าหมายภายในเซลล์ที่มีชีวิต ที่จะเอาชนะข้อจำกัดเหล่านี้ความพยายามของเราได้มุ่งเน้นการพัฒนาระบบ กลยุทธ์ที่ใช้สารเคมีและแสดงการทํางาน เราใช้กลยุทธ์เหล่านี้เพื่อศึกษาสารยับยั้งโปรตีนไคเนสโมเลกุลเล็ก CK2 , ไคเนส constitutively ปราดเปรียวที่ได้รับเมื่อเร็ว ๆนี้กลายเป็นเป้าหมายสำหรับต้านมะเร็ง การรักษา ในการทดลองทางคลินิกเคมีของเราแสดงกลยุทธ์การใช้ ATP หรือ CK2 inhibitors ถูกตรึงบนเกี่ยวข้องลูกปัดพร้อมกับมวลสารเพื่อจับภาพ และระบุพันธมิตรผูกพันจากเซลล์ สารสกัด การศึกษาเหล่านี้ได้รับการตรวจสอบว่าปฏิสัมพันธ์ระหว่าง CK2 และการเกิดขึ้นในการผสมที่ซับซ้อน อย่างไรก็ตาม ในกรณีของ CK2 โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ 4,5,6,7-tetrabromo-1h-benzotriazole ( TBB )งานของเราได้พบออกจากเป้าหมายของ . เพื่อเสริมขีดความสามารถการทำงานการศึกษาเหล่านี้เราได้คิดวิธีการระบุโปรตีนที่แสดงการลดลงใน กรุงเทพมหานคร เมื่อเซลล์ได้รับการปฏิบัติด้วย CK2 ตัวยับยั้ง การระบุและตรวจสอบพวกโปรตีนที่มีพื้นผิวโดยตรงสำหรับ CK2 เรายังใช้พันธ์ของ CK2 กับลดลงโดยไว โดยรวมการศึกษาของเราได้จากแพลตฟอร์มระบบการศึกษา CK2 inhibitors ซึ่งเราเชื่อว่าจะสร้างความพยายามที่จะกำหนดฟังก์ชันทางชีวภาพของ CK2 และศึกษาศักยภาพของไทย ให้เป็นโมเลกุลที่กำหนดเป้าหมายการรักษา บทความนี้เป็นส่วนหนึ่งของฉบับพิเศษ เรื่องสารยับยั้งโปรตีนไคเนส
( 2012 )