③ Chromatography - Chromatography o

③ Chromatography
- Chromatography offers a variety of methods to separate proteins based on charge, size,
hydrophobicity, and molecular recognition

A. Size exclusion (gel permeation or filtration) chromatography
1. The principle of separating proteins according to their hydrodynamic volume
2. Their molecular weight can be used if the size of the molecule to be separated is presumably different
from that of the contaminant proteins
3. The limitation is the largest sample volume suitable for an optimal separation is relatively small with
regards to the column size
4. This method has been successfully used for separation of other biomolecules, growth factors, tissue
plasminogen activator(TPA), and monoclonal antibodies

B. Ion exchange chromatography
1. It is dependent on the electrostatic interactions between the protein and charged groups on the exchangers
2. The nature of the ion exchange :
- Weak acid (carboxylmethyl, CM) vs weak base (diethylaminoethyl, DEAE)
- Strong (quaternary amine, Q) and quaternary aminoethyl, QAE)
3. The bound proteins are usually eluted with an ionic strength gradient or a pH gradient for strongly
bound proteins

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

③ Chromatography -Chromatography มีหลากหลายวิธีในการแยกโปรตีนตามค่า ขนาด hydrophobicity และการรับรู้โมเลกุล A. ขนาด chromatography แยก (เจลซึมผ่านหรือกรอง) 1. หลักการของการแยกโปรตีนตามปริมาณของพวกเขาเกิด hydrodynamic 2. น้ำหนักโมเลกุลการใช้ถ้าขนาดของโมเลกุลกันสันนิษฐานว่าแตกต่าง จากโปรตีนสิ่งปลอมปน 3. ข้อจำกัดคือปริมาณตัวอย่างที่ใหญ่ที่สุดเหมาะสำหรับการแยกที่ดีที่สุดค่อนข้างเล็กด้วย กับขนาดคอลัมน์ 4 วิธีที่นี้เรียบร้อยแล้วใช้สำหรับแยกของชื่อโมเลกุลชีวภาพ ปัจจัยการเจริญเติบโต เนื้อเยื่ออื่น ๆ plasminogen activator(TPA) และแอนตี้ monoclonal B. แลกเปลี่ยนไอออน chromatography 1. มันเป็นขึ้นอยู่กับการโต้ตอบที่ไฟฟ้าสถิตระหว่างโปรตีนและกลุ่มที่คิดค่าธรรมเนียมในการแลกเปลี่ยน 2. ลักษณะของการแลกเปลี่ยนไอออน: -อ่อนกรด (carboxylmethyl, CM) กับฐานอ่อน (diethylaminoethyl, DEAE) -แข็งแรง (quaternary มีน Q) และ quaternary aminoethyl, QAE) 3.โปรตีนที่ถูกผูกไว้มักจะ eluted กับการไล่ระดับความแรงของไอออนหรือไล่ค่า pH สำหรับการขอ โปรตีนที่ถูกผูกไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

③โครมาโต
- โครมามีความหลากหลายของวิธีการที่จะแยกโปรตีนขึ้นอยู่กับค่าใช้จ่ายขนาด
hydrophobicity และการรับรู้ในระดับโมเลกุลA. ยกเว้นขนาด (เจลซึมผ่านหรือกรอง) โครมาโต1 หลักการของโปรตีนแยกตามปริมาณอุทกพลศาสตร์ของพวกเขา2 น้ำหนักโมเลกุลของพวกเขาสามารถนำมาใช้ถ้าขนาดของโมเลกุลที่จะแยกออกจากกันเป็นสันนิษฐานที่แตกต่างจากที่ของโปรตีนสารปนเปื้อนที่ 3 ข้อ จำกัด คือปริมาณตัวอย่างที่ใหญ่ที่สุดที่เหมาะสมสำหรับการแยกที่ดีที่สุดมีขนาดค่อนข้างเล็กมีเรื่องที่เกี่ยวกับขนาดของคอลัมน์4 วิธีการนี้ได้รับการใช้ประสบความสำเร็จสำหรับการแยกสารชีวโมเลกุลอื่น ๆ ปัจจัยการเจริญเติบโตของเนื้อเยื่อplasminogen Activator (TPA) และโคลนอลแอนติบอดีบี แลกเปลี่ยนไอออน1 มันขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์ไฟฟ้าสถิตระหว่างโปรตีนและกลุ่มเรียกเก็บในแลกเปลี่ยน2 ลักษณะของการแลกเปลี่ยนไอออน: - กรดอ่อน (carboxylmethyl, CM) VS ฐานอ่อนแอ (diethylaminoethyl, ดีอีเออี) - แข็งแกร่ง (amine สี่, Q) และ aminoethyl สี่, QAE) 3 โปรตีนที่ถูกผูกไว้มักจะชะด้วยการไล่ระดับความแรงของอิออนหรือค่า pH สำหรับการไล่ระดับสีอย่างยิ่งโปรตีนที่ถูกผูกไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

③โครมาโตกราฟี- สามารถมีความหลากหลายของวิธีการที่จะแยกโปรตีนตามธรรมเนียม ขนาดบรรจุภัณฑ์และการรับรู้ของโมเลกุล1 . ขนาดการยกเว้น ( เจลซึมหรือการกรอง ) โครมาโตกราฟี1 . หลักการของการแยกโปรตีนตามปริมาณของอุทกพลศาสตร์2 . น้ำหนักโมเลกุลของพวกเขาสามารถใช้ ถ้าขนาดของโมเลกุลที่ถูกแยกจากกันต่างสันนิษฐานว่าจากที่ของโปรตีนปนเปื้อน3 . ข้อจำกัดที่ใหญ่ที่สุดตัวอย่างปริมาณที่เหมาะสมสำหรับการแยกที่เหมาะสมจะค่อนข้างเล็กเกี่ยวกับคอลัมน์ขนาด4 . วิธีการนี้ได้ถูกนำมาใช้สำหรับการแยกสารชีวโมเลกุลอื่นๆ ปัจจัยการเจริญเติบโตเนื้อเยื่อหากิจกรรม ( TPA ) และโมโนโคลนอล แอนติบอดีแลกเปลี่ยนไอออนโครมาโทกราฟี B1 . มันขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์ไฟฟ้าสถิตระหว่างโปรตีนและค่าใช้จ่ายในกลุ่มแลกเปลี่ยน2 . ลักษณะของการแลกเปลี่ยนไอออน :- เป็นกรดอ่อน ( carboxylmethyl , cm ) VS ( diethylaminoethyl อ่อนแอ , ฐานการทำ )- แข็งแกร่ง ( Quaternary เอมีน , Q ) และควอ aminoethyl qae ) ,3 . โปรตีนมักจะผูกพันกับความแรงของไอออนในตัวอย่างสีไล่ระดับเพื่อขอหรืออผูกพันโปรตีน