Female, 8-week-old, specific pathog

Female, 8-week-old, specific pathogen-free C3H/He mice (n ¼ 5; SLC Inc., Shizuoka, Japan) were immunized subcutaneously with a 0.1-mL solution containing equal parts of ntCDMF (0.6 mg/mL) and TiterMax Gold adjuvant (TiterMax USA Inc., Norcross, GA, USA) at 2- week intervals (priming inoculation plus two booster inoculations).
Control mice (n ¼ 3) were injected with a 0.1-mL solution of equal parts of EzRIPA lysis buffer and TiterMax Gold. Blood and intestinal fluid samples were harvested from mice two weeks after the last booster inoculation. Blood was left to clot for 1 h at room temperature, and then centrifuged at 1000  g for 5 min at 4
C to isolate serum. Intestinal contents were collected from the small intestine and centrifuged at 10,000  g for 10 min at 4
C. The supernatantwas then diluted 5-fold with PBS and passed through a 0.20-mm membrane filter (Sartorius AG, G€ottingen, Germany) for use as prepared intestinal fluid. All animal experiments were performed in strict compliance with the animal experimentation guidelines of the National Institute of Infectious Diseases with protocols approved by the Institutional Animal Care and Use Committee (Permit No., 214002).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หญิง อายุ 8 สัปดาห์ การศึกษาอิสระ C3H / หนูเขา (n ¼ 5 SLC Inc. ชิสึโอกะ ญี่ปุ่น) ที่ immunized subcutaneously กับโซลูชัน 0.1 mL ประกอบด้วยเท่าเทียมกันประเมินทอง TiterMax (TiterMax Inc. ประเทศสหรัฐอเมริกา Norcross, GA สหรัฐอเมริกา) และ ntCDMF (0.6 mg/mL) ในช่วงเวลา 2 สัปดาห์ (inoculation ด้วยบวกบูสเตอร์สองประเทศ)ควบคุมเมาส์ (n ¼ 3) ถูกฉีด ด้วยโซลูชั่น 0.1 mL เท่ากับส่วนของบัฟเฟอร์ lysis EzRIPA และ TiterMax ทอง เลือดและตัวอย่างของเหลวลำไส้ถูกเก็บเกี่ยวจากหนูสองสัปดาห์หลัง inoculation บูสเตอร์สุดท้าย เลือดจากการ clot สำหรับ h 1 ที่อุณหภูมิห้อง และ centrifuged ที่ 1000 กรัมใน 5 นาทีที่ 4 C จะแยกซีรั่ม เนื้อหาลำไส้ถูกรวบรวมไว้จากลำไส้เล็ก และ centrifuged ที่ g 10000 ใน 10 นาทีที่ 4 ค Supernatantwas แล้วแตกออก 5-fold กับ PBS และผ่านผ่านตัวกรองเมมเบรน 0.20 มม. (AG บริษัทซาร์โทเรียส G€ ottingen เยอรมนี) สำหรับใช้เป็นน้ำมันเตรียมลำไส้ สัตว์ทดลองทั้งหมดถูกทำในเข้มงวดปฏิบัติตามแนวทางการทดลองสัตว์ของชาติสถาบันของโรคติดเชื้อโรคกับโปรโตคอลที่ได้รับอนุมัติจากสถาบันสัตว์ดูแลและใช้กรรมการ (ใบอนุญาตหมายเลข 214002)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หญิง, 8 สัปดาห์เก่าปลอดเชื้อเฉพาะ C3H / เขาหนู (n ¼ 5; SLC Inc. , Shizuoka, ญี่ปุ่น) ได้รับวัคซีนใต้ผิวหนังด้วยโซลูชั่น 0.1 มิลลิลิตรที่มีส่วนเท่า ๆ กันของ ntCDMF (0.6 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) และ TiterMax เสริมทอง (TiterMax USA Inc. , แอตแลนตา, GA, USA) ที่ 2 ช่วงสัปดาห์ (การฉีดวัคซีนรองพื้นบวกสองวัคซีน Booster).
หนูควบคุม (n ¼ 3) ได้รับการฉีดด้วยการแก้ปัญหา 0.1 มิลลิลิตรของชิ้นส่วนที่เท่ากันสลาย EzRIPA บัฟเฟอร์และ TiterMax ทอง เลือดและตัวอย่างของเหลวในลำไส้ถูกเก็บเกี่ยวจากหนูสองสัปดาห์หลังจากการฉีดวัคซีนสนับสนุนล่าสุด เลือดถูกทิ้งให้แข็งตัวเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องและปั่นแล้วที่ 1000? กรัมเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเพื่อแยกซีรั่ม เนื้อหาลำไส้ถูกเก็บรวบรวมจากลำไส้เล็กและหมุนเหวี่ยงที่ 10,000? กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส supernatantwas แล้วเจือจาง 5 เท่ากับพีบีเอสและผ่านตัวกรองเมมเบรน 0.20 มม (Sartorius AG, G € ottingen, เยอรมนี) เพื่อใช้เป็นของเหลวเตรียมลำไส้ ทั้งหมดสัตว์ทดลองได้รับการดำเนินการในการปฏิบัติตามอย่างเคร่งครัดกับแนวทางสัตว์ทดลองของสถาบันแห่งชาติของโรคติดเชื้อกับโปรโตคอลรับการอนุมัติจากสถาบันการดูแลสัตว์และการใช้คณะกรรมการ (ใบอนุญาตเลขที่ 214002)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หญิง 8-week-old เฉพาะเชื้อโรคฟรี c3h / เขาหนู ( N ¼ 5 ; SLC อิงค์ , ชิซูโอกะ , ญี่ปุ่น ) กลุ่ม subcutaneously กับ 0.1-ml สารละลายที่มีส่วนเท่ากันของ ntcdmf ( 0.6 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) และ titermax ทองเสริม titermax อเมริกาอิงค์ , Norcross , GA , สหรัฐอเมริกา ) ในช่วงสัปดาห์ที่ 2 - ( ปั๊มเชื้อบวกสอง Booster Inoculations ) .
หนูควบคุม ( N ¼ 3 ) ถูกฉีดด้วย 01-ml สารละลายเท่ากับส่วนของ ezripa การสลายบัฟเฟอร์ และ titermax ทอง เลือดและตัวอย่างของเหลวในลำไส้ถูกเก็บเกี่ยวจากหนูสองสัปดาห์หลังจากการเพิ่มล่าสุด ก้อนเลือดเหลือ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง แล้วไฟฟ้าที่ 1000  G สำหรับ 5 นาทีที่ 4
C เพื่อแยกซีรั่ม เนื้อหาในการเก็บรวบรวมจากลำไส้เล็กไฟฟ้าที่ 10000  G สำหรับ 10 นาทีที่ 4
C supernatantwas แล้วเจือจางผู้อื่นด้วย PBS และผ่าน 0.20-mm เมมเบรนกรอง ( Sartorius AG , G ด ottingen , เยอรมนี ) สำหรับใช้เป็นเตรียมของเหลวในลำไส้ .สัตว์ทดลองมีการปฏิบัติตามอย่างเคร่งครัดกับการใช้สัตว์ทดลองแนวทางของสถาบันโรคติดเชื้อกับโปรโตคอลได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการของสถาบันการดูแลสัตว์และใช้ ( ใบอนุญาตเลขที่ , 214002 )