Thawing process is important in sem

Thawing process is important in semen cryopreservation as it brings back the sperm cell to physiologic temperature reactivating the metabolism. Aims of the present study were to evaluate survival rate and in vitro penetrability of boar frozen spermatozoa after rapid and transient thawing at a high temperature followed by a warming procedure at 39 °C. Ejaculated semen samples were diluted in an egg yolk–based glycerol-free extender containing 100-mM trehalose and then cryopreserved in 0.5-mL straws according to a common protocol. In experiment 1, when temperature inside the straws was monitored after thawing at 40 °C, 60 °C, 70 °C, and 80 °C, the calculated average warming rate in the straws from −196 °C to 15 °C was much faster when thawed at 70 °C and 80 °C than at 40 °C (P < 0.01). The warming temperature rate inside the straw was 7 to 12 folds faster during the first 2 seconds than the second 2 seconds after immersing in high temperatures. In experiment 2, when frozen straws were thawed at 80 °C for 9 seconds, the viability, motility, and acrosomal integrity were significantly improved (P < 0.05), as compared with controls (at 39 °C). In experiment 3, frozen straws were thawed at 39 °C, 60 °C, 70 °C, and 80 °C for 60, 10, 8, and 6 seconds, respectively, and then maintained at 39 °C for 0, 50, 52, and 54 seconds. Higher viability, motility, mitochondria membrane potential, and acrosome integrity were observed (P < 0.05) when frozen straws were thawed at 70 °C for 8 seconds and then maintained at 39 °C for 52 seconds as compared with the control (39 °C for 60 seconds). In experiment 4, in vitro penetrability of frozen spermatozoa thawed at 70 °C for 8 seconds and maintained at 39 °C for 52 seconds was higher than that of controls. In conclusion, the rapid transient thawing at 70 °C for 8 seconds followed by stabilizing procedure at 39 °C for 52 seconds maintained the viability, motility, mitochondria membrane potential, acrosome integrity, and in vitro penetrability of spermatozoa frozen in a glycerol-free trehalose extender and recommended as an optimum thawing conditions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Thawing กระบวนการเป็นสิ่งสำคัญในน้ำเชื้อ cryopreservation นำกลับเซลล์อสุจิอุณหภูมิ physiologic เปิดเผาผลาญ จุดมุ่งหมายของการศึกษาปัจจุบันถูกประเมินอัตราการอยู่รอดและ penetrability ในของหมูที่แช่แข็ง spermatozoa หลัง thawing ที่อุณหภูมิสูงอย่างรวดเร็ว และแบบฉับพลันตามขั้นตอนร้อนที่ 39 องศาเซลเซียส ตัวอย่างน้ำเชื้อ ejaculated ถูกผสมในไข่แดงใช้กลีเซอรฟรี extender ประกอบด้วย trehalose 100 มม. และ cryopreserved แล้ว ใน 0.5 mL หลอดตามโพรโทคอทั่วไป ในการทดลองที่ 1 เมื่ออุณหภูมิภายในหลอดจะถูกตรวจสอบหลัง thawing ที่ 40 ° C, 60 ° C, 70 ° C และ 80 ° C อัตราเฉลี่ยร้อนที่คำนวณได้ในหลอดจาก −196 ° C ถึง 15 ° C ถูกเร็วเมื่อ thawed ที่ 70 องศาเซลเซียสและ 80 องศาเซลเซียสมากกว่าที่ 40 ° C (P < 0.01) อัตราอุณหภูมิโลกร้อนภายในตัวฟาง 7 12 พับเร็วในช่วง 2 วินาทีแรกวินาทีที่สองหลังจากแช่ในอุณหภูมิที่สูงกว่าได้ ในทดลอง 2 เมื่อหลอดแช่แข็งถูก thawed ที่ 80 ° C วินาที ชีวิต motility และสมบูรณ์ acrosomal ถูกปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.05), เป็นเปรียบเทียบกับตัวควบคุม (ที่ 39 ° C) ในทดลอง 3 หลอดดูดน้ำแข็งถูก thawed ที่ 39 ° C, 60 ° C, 70 ° C และ 80 องศาเซลเซียส 60, 10, 8 และ 6 วินาที ตามลำดับ แล้ว รักษาที่ 39 ° C 0, 50, 52 และวินาที สังเกตชีวิตสูง motility, mitochondria เยื่อศักยภาพ และความสมบูรณ์ของอะโครโซม (P < 0.05) เมื่อน้ำแข็งหลอด thawed ที่ 70 ° C 8 วินาที และรักษาที่ 39 ° C สำหรับวินาทีเมื่อเทียบกับตัวควบคุม (39 ° C สำหรับ 60 วินาที) ในการทดลอง 4, penetrability เพาะเลี้ยงของแช่แข็ง spermatozoa thawed ที่ 70 ° C 8 วินาที และรับการรักษาที่ 39 ° C วินาทีได้สูงกว่าที่ควบคุม เบียดเบียน แบบฉับพลันรวดเร็วที่ thawing ที่ 70 ° C สำหรับวินาทีตาม stabilizing ตอนที่ 39 ° C ในวินาทีที่รักษานี้ motility, mitochondria เยื่อศักยภาพ ความสมบูรณ์ของอะโครโซม และ penetrability เพาะเลี้ยงของ spermatozoa ใน extender trehalose กลีเซอรฟรี และแนะนำเหมาะสมที่ thawing เงื่อนไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระบวนการละลายเป็นสิ่งสำคัญในการเก็บรักษาน้ำเชื้อที่มันนำกลับเซลล์สเปิร์มที่อุณหภูมิทางสรีรวิทยา reactivati​​ng การเผาผลาญอาหาร จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อประเมินอัตราการรอดตายและ penetrability หลอดทดลองของหมูป่าแช่แข็งอสุจิหลังการละลายอย่างรวดเร็วและชั่วคราวที่อุณหภูมิสูงตามด้วยขั้นตอนร้อนที่ 39 องศาเซลเซียส ตัวอย่างน้ำอสุจิหลั่งออกมาถูกเจือจางในไข่ไข่แดงที่ใช้ขยายกลีเซอรีนฟรีที่มีทรีฮาโล 100 มิลลิและแช่แข็งแล้วในหลอด 0.5 มิลลิลิตรตามโปรโตคอลที่พบบ่อย ในการทดลองที่ 1 เมื่ออุณหภูมิภายในหลอดได้รับการตรวจสอบหลังการละลายที่ 40 ° C 60 ° C 70 ° C และ 80 ° C, คำนวณอัตราภาวะโลกร้อนโดยเฉลี่ยในหลอดจาก -196 ° C ถึง 15 ° C ได้มาก เร็วขึ้นเมื่อละลายที่ 70 องศาเซลเซียสและ 80 องศาเซลเซียสกว่า 40 ° C (p <0.01) อัตราอุณหภูมิร้อนภายในฟางเป็น 7-12 เท่าได้เร็วขึ้นในช่วงแรกกว่า 2 วินาทีที่สอง 2 วินาทีหลังจากการแช่ในอุณหภูมิสูง ในการทดลองที่ 2 เมื่อหลอดแช่แข็งถูกละลายที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 9 วินาทีที่มีศักยภาพในการเคลื่อนที่และความซื่อสัตย์ acrosomal ได้รับการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ (P <0.05) เมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม (ที่ 39 ° C) ในการทดลอง 3 หลอดแช่แข็งถูกละลายที่ 39 ° C 60 ° C 70 ° C และ 80 ° C เป็นเวลา 60, 10, 8 และ 6 วินาทีตามลำดับและการบำรุงรักษาแล้ว 39 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 0, 50, 52, และ 54 วินาที มีชีวิตที่สูงขึ้น, การเคลื่อนที่, mitochondria พังผืดศักยภาพและความซื่อสัตย์ acrosome ถูกตั้งข้อสังเกต (P <0.05) เมื่อหลอดแช่แข็งถูกละลายที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 วินาทีและการบำรุงรักษาแล้ว 39 ° C เป็นเวลา 52 ​​วินาทีเมื่อเทียบกับการควบคุม (39 ° C เป็นเวลา 60 วินาที) ในการทดลองที่ 4 ในหลอดทดลอง penetrability ตัวอสุจิแช่แข็งละลายที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 วินาทีและเก็บรักษาไว้ที่ 39 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 52 ​​วินาทีสูงกว่าของการควบคุม สรุปได้ว่าการละลายอย่างรวดเร็วชั่วคราวที่ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 วินาทีตามด้วยการรักษาเสถียรภาพขั้นตอนที่ 39 ° C เป็นเวลา 52 ​​วินาทีการบำรุงรักษามีชีวิต, การเคลื่อนที่, mitochondria ศักยภาพเยื่อสมบูรณ์ acrosome และ penetrability หลอดทดลองของตัวอสุจิแช่แข็งในกลีเซอรอลฟรี ขยายทรีฮาโลและแนะนำในฐานะที่เป็นเงื่อนไขการละลายที่เหมาะสม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ละลายกระบวนการสำคัญในการเก็บรักษาน้ำเชื้อมันทำให้นึกถึงอสุจิกับเซลล์ปกติอุณหภูมิใหม่การเผาผลาญ วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้เพื่อประเมินอัตราการรอดชีวิตและแช่แข็งอสุจิในหลอดทดลองเพนิทระบีลของหมูป่าหลังอย่างรวดเร็วและชั่วคราวละลายในอุณหภูมิที่สูงขึ้นตามขั้นตอนที่ 39 องศาejaculated น้ำเชื้อเจือจางตัวอย่างมีในไข่แดงและ Extender ที่มีการใช้กลีเซอรอลฟรี 100 มิลลิเมตร และจากนั้น ตรวจสอบคุณภาพใน 0.5-ml หลอดตามขั้นตอนทั่วไป ในการทดลองที่ 1 เมื่ออุณหภูมิภายในหลอดถูกตรวจสอบหลังการละลายที่ 40 ° C 60 ° C 70 ° C และ 80 ° Cคำนวณอัตราเฉลี่ยภาวะโลกร้อนในหลอดจาก− 196 องศา C 15 ° C ได้เร็วขึ้นมากเมื่อละลายที่อุณหภูมิ 70 องศา C และ 80 ° C มากกว่า 40 ° C ( P < 0.01 ) ร้อนอุณหภูมิเท่ากันภายในหลอด 7 ถึง 12 เท่าได้เร็วขึ้นในช่วง 2 วินาทีแรกมากกว่าที่สอง 2 วินาที หลังจากแช่ในอุณหภูมิสูง ในการทดลองที่ 2 เมื่อหลอดถูกแช่แข็งละลาย 80 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 9 วินาที อยู่ตลอดเวลาการเคลื่อนที่ และความสมบูรณ์ acrosomal ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.05 ) เมื่อเทียบกับการควบคุม ( 39 ° C ) ในการทดลองที่ 3 หลอดอยู่ที่ 39 องศา แช่แข็งละลาย C 60 ° C 70 ° C และ 80 องศา C นาน 60 , 10 , 8 , 6 วินาที ตามลำดับ และยังคงที่ 39 ° C เป็นเวลา 0 , 50 , 52 , 54 วินาที สูงกว่าความมีชีวิตการเคลื่อนที่ ศักย์ไฟฟ้าเยื่อหุ้มเซลล์ไมโตคอนเดรีย และพบว่าค่าเฉลี่ยอะโครโซมที่สมบูรณ์ ( p < 005 ) เมื่อหลอดถูกแช่แข็งละลายที่อุณหภูมิ 70 องศา C เป็นเวลา 8 วินาทีแล้วไว้ที่ 39 ° C 52 วินาทีเมื่อเทียบกับการควบคุม ( 39 ° C เป็นเวลา 60 วินาที ) การทดลองที่ 4 หลอดอสุจิแช่แข็งที่ละลายแล้ว เพนิทระบีลที่ 70 องศา C เป็นเวลา 8 วินาทีและรักษาที่ 39 ° C 52 วินาที พบว่า การควบคุม สรุปอย่างรวดเร็ว แบบที่ 70 องศา C ละลาย 8 วินาที ตามด้วยขั้นตอนการรักษาเสถียรภาพที่ 39 ° C 52 วินาทีรักษาความมีชีวิตการเคลื่อนที่ , ศักยภาพ , ความสมบูรณ์ที่มีเยื่อมและในหลอดทดลองเพนิทระบีลของอสุจิแช่แข็งในกลีเซอรอลและสารฟรีการแนะนำที่เหมาะสมการเงื่อนไข