qPCR. Material stored at 280 uC was

qPCR. Material stored at 280 uC was finely ground in liquid N2 and
600 mg rice or 200 mg haulms was used for DNA extraction using
a CTAB protocol as described at http://gmo-crl.jrc.ec.europa.eu/
summaries/TC1507-DNAextrc.pdf. DNA was spectrophotometrically
quantified by measuring OD at 260 nm.
The iCycler IQ System (Bio-Rad) was used for amplification and
melting curve analysis. The following were used as primers: FGtub
forward (59-GGTCTCGACAGCAATGGTGTT-39) and FGtub reverse
(59-GCTTGTGTTTTTCGTGGCAGT-39) (Reischer et al., 2004) for F.
graminearum, FculC561 forward (59-CACCGTCATTGGTATGTTGTCACT-
39) and FculC614 reverse (59-CGGGAGCGTCTGATAGTCG-
39) (Nicolaisen et al., 2009) for F. culmorum, and tef1 (Gruber et al.,
2011) for Trichoderma. SYBR Green was used as dye for the qPCR
analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

qPCR การ วัสดุที่เก็บไว้ที่ 280 uC ประณีตพื้นใน N2 เหลว และใช้ haulms ข้าวหรือ 200 มิลลิกรัม 600 มิลลิกรัมการใช้สกัดดีเอ็นเอโพรโทคอ CTAB ตามที่อธิบายไว้ใน http://gmo-crl.jrc.ec.europa.eu/สรุป/TC1507-DNAextrc.pdf ดีเอ็นเอถูก spectrophotometricallyquantified โดยวัด OD ที่ 260 nmICycler ระบบ IQ (ไบ-Rad) ใช้สำหรับขยาย และละลายวิเคราะห์เส้นโค้ง ต่อไปนี้ถูกใช้เป็นไพรเมอร์: FGtubFGtub ย้อนกลับและไปข้างหน้า (59-GGTCTCGACAGCAATGGTGTT-39)(59-GCTTGTGTTTTTCGTGGCAGT-39) (Reischer et al., 2004) สำหรับเอฟgraminearum, FculC561 ไปข้างหน้า (59 - CACCGTCATTGGTATGTTGTCACT-39) และย้อนกลับ FculC614 (59 - CGGGAGCGTCTGATAGTCG-39) (Nicolaisen et al., 2009) F. culmorum และ tef1 (Gruber et al.,2011) สำหรับ Trichoderma SYBR Green ใช้เป็นสีย้อมสำหรับ qPCR การวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

qPCR วัสดุเก็บไว้ที่ 280 UC ถูกบดละเอียดในของเหลว N2 และ
600 มิลลิกรัมข้าวหรือ 200 มิลลิกรัม haulms ถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอโดยใช้
โปรโตคอล CTAB ตามที่อธิบายไว้ใน http://gmo-crl.jrc.ec.europa.eu/
สรุป / TC1507 -DNAextrc.pdf ดีเอ็นเอ spectrophotometrically
วัดโดยการวัด OD ที่ 260 นาโนเมตร.
ปฏิทินสาธารณะระบบไอคิว (Bio-Rad) ถูกนำมาใช้สำหรับการขยายและ
การวิเคราะห์โค้งละลาย ต่อไปนี้จะถูกนำมาใช้เป็นไพรเมอร์: FGtub
ไปข้างหน้า (59 GGTCTCGACAGCAATGGTGTT-39) และ FGtub ย้อนกลับ
(59 GCTTGTGTTTTTCGTGGCAGT-39) (Reischer et al, 2004.) สำหรับเอฟ
graminearum, FculC561 ไปข้างหน้า (59 CACCGTCATTGGTATGTTGTCACT-
39) และ FculC614 ย้อนกลับ (59 CGGGAGCGTCTGATAGTCG-
39) (Nicolaisen et al., 2009) สำหรับเอฟ culmorum และ tef1 (กรูเบอร์ et al.,
2011) สำหรับเชื้อรา Trichoderma SYBR สีเขียวที่ใช้เป็นสีย้อมสำหรับ qPCR
การวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

qpcr . วัสดุเก็บไว้ที่ 280 UC เป็นบดละเอียดในไนโตรเจนเหลวและ
600 มก. 200 มก. haulms ข้าว หรือใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอโดยใช้การ ctab โปรโตคอลตามที่อธิบายไว้ที่ http : / / จีเอ็มโอ CRL . jrc EC . ยุโรป อียู /
สรุป / tc1507-dnaextrc.pdf . ดีเอ็นเอนี้
quantified โดยวัดจากที่ 260 nm .
ระบบ IQ icycler ( ไบโอ ราด ) ใช้เครื่องขยายเสียงและ
จุดหลอมเหลวการวิเคราะห์เส้นโค้งต่อไปนี้ใช้เป็นไพรเมอร์ : fgtub
ไปข้างหน้า ( 59-ggtctcgacagcaatggtgtt-39 ) และ fgtub ย้อนกลับ
( 59-gcttgtgtttttcgtggcagt-39 ) ( reischer et al . , 2004 ) F .
graminearum fculc561 ไปข้างหน้า , ( 59-caccgtcattggtatgttgtcact -
39 ) และ fculc614 ย้อนกลับ ( 59-cgggagcgtctgatagtcg -
39 ) ( nicolaisen et al . , 2009 ) . culmorum และ tef1 ( กรูเบอร์ et al . ,
2011 ) สำหรับเชื้อรา .SYBR กรีนถูกใช้เป็นสีย้อมสำหรับการวิเคราะห์ qpcr