Molecular DetectionRNA was extracte

Molecular Detection
RNA was extracted from the nasal swabs or culture
supernatants with the use of the QIAamp
Viral RNA Mini Kit (Qiagen), according to the
manufacturer’s instructions. Eluted RNA was
screened for the MERS-CoV upstream region of
the E gene (upE region) and confirmed by targeting
the open reading frame region ORF1a
and ORF1b with the use of real-time RT-PCR,
as described previously. Further confirmation
was performed by partially sequencing the RNA-dependent
RNA polymerase (RdRp) and nucleocapsid
(N) regions of the viral genome, as recommended
by the World Health Organization. Both assays were conducted on the original
samples collected from the patient and from
Camel B. (Details regarding the RT-PCR assay
and sequencing are provided in the Supplementary
Appendix.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบระดับโมเลกุลอาร์เอ็นเอที่สกัดจากโพรงจมูก swabs หรือวัฒนธรรมsupernatants ด้วยการใช้ QIAamp การชุดมินิอาร์เอ็นเอไวรัส (Qiagen), ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เป็นอาร์เอ็นเอ elutedฉายในภูมิภาค MERS CoV ขั้นต้นน้ำของยีนอี (upE ภูมิภาค) และได้รับการยืนยัน โดยการกำหนดเป้าหมายอ่านเปิดกรอบภูมิภาค ORF1aและ ORF1b มีการใช้จริง RT-PCRตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ยืนยันเพิ่มเติมทำ โดยบางส่วนลำดับเบสในอาร์เอ็นเอขึ้นอยู่กับการอาร์เอ็นเอพอลิเมอเรส (RdRp) และดโปรตีน(N) พื้นที่ของจีโนมไวรัส เป็นแนะนำโดยองค์การอนามัยโลก Assays ทั้งได้ดำเนินการกับต้นฉบับตัวอย่างที่เก็บ จากผู้ป่วย และB. อูฐ (รายละเอียดเกี่ยวกับวิเคราะห์ RT-PCRและจัดลำดับในการ Supplementaryภาคผนวกด้วย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจจับโมเลกุล
RNA ถูกสกัดจากจมูก swabs หรือวัฒนธรรม
supernatants กับการใช้งานของ QIAamp
ไวรัส RNA Mini Kit (Qiagen)
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ชะอาร์เอ็นเอได้รับการคัดเลือกสำหรับเมอร์ส-COV ภูมิภาคต้นน้ำของยีนอี(ภูมิภาค UPE) และได้รับการยืนยันโดยการกำหนดเป้าหมายการอ่านเปิดORF1a ภูมิภาคกรอบและORF1b กับการใช้เวลาจริง RT-PCR ที่ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ยืนยันต่อไปได้ดำเนินการโดยบางส่วนลำดับ RNA ขึ้นอยู่กับโพลีเมออาร์เอ็นเอ(RdRp) และนิวคลีโอ(N) ภูมิภาคของจีโนมของไวรัสตามคำแนะนำขององค์การอนามัยโลก การตรวจทั้งสองถูกดำเนินการในต้นฉบับตัวอย่างที่เก็บได้จากผู้ป่วยและจากอูฐบี(รายละเอียดเกี่ยวกับการทดสอบ RT-PCR และการเรียงลำดับจะได้รับบริการเสริมในภาคผนวก.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจจับโมเลกุล RNA
สกัดจากจมูกหรือ swabs supernatants วัฒนธรรม
กับการใช้งานของ qiaamp
ไวรัส RNA ขนาดเล็กชุด ( เพิ่ม )
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ตัวอย่าง RNA ถูกคัดกรองเพื่อ mers

มีต้นน้ำในเขต E ยีน ( upe ภูมิภาค ) และได้รับการยืนยันโดยเป้าหมาย

กรอบภูมิภาคและเปิดอ่าน orf1a orf1b ด้วยการใช้วิธีเรียลไทม์
ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
ยืนยันเพิ่มเติมโดยใช้ลำดับยีนบางส่วนขึ้นอยู่กับ
อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรส ( rdrp ) และนิวคลีโอแคพซิด
( n ) ภูมิภาคของจีโนมไวรัส แนะนํา
โดยองค์การอนามัยโลก ทั้ง 2 วิธีมีวัตถุประสงค์ในการเก็บตัวอย่างจากผู้ป่วยเดิม

B จากอูฐ ( รายละเอียดเกี่ยวกับวิธี RT-PCR
และการจัดลำดับไว้ในภาคผนวกเสริม
)