detection limit to 0.2% (Figure 3).

detection limit to 0.2% (Figure 3). The results showed that we
were able to detect a true signal for blood samples spiked
with 5 PANC1 cells (ie less than 1 KRAS mutant copy per mL
blood). Moreover, we obtained a linear abundance ratio with
samples spiked with a higher number of PANC1 cells. In
contrast, Sanger sequencing showed a sensitivity close to
100 cells per 6 mL (ie about 16 copies per mL blood)
(Figure 4A) while TaqMelt and HRM had a sensitivity close to
75 and 50 cells per 6 mL, respectively (ie about 12 copies or 8
copies per mL blood) (Figure 4B and C). A summary of these
findings are presented in Table 1.
3.2. ddPCR can detect KRAS mutations in CTCs from
CRC patients
Next, we wished to evaluate the detection of mutant KRAS in
CTCs obtained from CRC patients. For this, we enrolled 35
CRC patients at any stage of the disease who were admitted
to the digestive surgery department of the Pitie-Salp
etri ^ ere
University Hospital. The characteristics of this cohort are indicated
in Table 2. First, we performed CTC analysis of blood
samples obtained just before curative surgery. This analysis
showed that 90% (26/29) of patients harbored at least one
CTC per 3 mL of total blood and among then 7% (2/29) of patients
had also cell clusters named circulating tumor microemboli
or multicellular CTC clusters (Table 3 and Supp. Data
2). In contrast, the analysis of blood from ten healthy donors
revealed no CTCs. We observed a trend of increasing numbers
of CTCs according to disease stage ranging from in situ to metastatic
disease. In contrast, no correlation was observed between
the number of CTCs and serum concentrations of the
tumor markers CEA (carcinoma embryonic antigen) and
CA19.9 (Supp. data 2). Next, we performed the multiplex
KRAS genotype assay by ddPCR. 86% (30/35) was performed
successfully, since 5 samples could not be amplified by whole

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขีดจำกัดการตรวจจับถึง 0.2% (รูปที่ 3) ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าเราได้มีการตรวจพบสัญญาณจริงสำหรับตัวอย่างเลือดที่ได้ถูกแทง5 PANC1 เซลล์ (เช่นสำเนากลายพันธุ์คราสน้อยกว่า 1 ต่อมิลลิลิตรเลือด) นอกจากนี้ เราได้รับอัตราส่วนเส้นความอุดมสมบูรณ์ด้วยตัวอย่างที่ได้ถูกแทง ด้วยของเซลล์ PANC1 ในความคมชัด Sanger ลำดับแสดงให้เห็นว่าความไวแสงไป100 เซลล์ต่อมล. 6 (ie เกี่ยวกับสำเนา 16 ต่อเลือด mL)(รูปที่ 4A) ขณะที่ TaqMelt และ HRM มีความไวใกล้เคียงกับ75 และ 50 เซลล์ต่อมิลลิลิตร 6 ตามลำดับ (เช่นเกี่ยวกับ 12 สำเนาหรือ 8สำเนาต่อเลือด mL) (รูปที่ 4B และ C) สรุปเหล่านี้ผลการวิจัยจะนำเสนอในตารางที่ 13.2. ddPCR สามารถตรวจหาการกลายพันธุ์คราสใน CTCs จากผู้ป่วยที่ CRCถัดไป เราอยากจะประเมินการตรวจสอบของ mutant คราสในCTCs ได้จากผู้ป่วย CRC สำหรับนี้ เราเรียน 35CRC ในขั้นตอนใด ๆ ของโรคผู้ป่วยได้เข้ารับการรักษาแผนกศัลยกรรมทางเดินอาหารของ etri Pitie Salp ^ โบราณโรงพยาบาลมหาวิทยาลัย มีระบุลักษณะของการศึกษานี้ตารางที่ 2 ครั้งแรก เราทำการวิเคราะห์เลือด CTCตัวอย่างที่ได้รับก่อนที่จะผ่าตัดแก้ การวิเคราะห์นี้พบว่า 90% ของผู้ป่วย (26/29) harbored อย่างน้อยหนึ่งCTC ต่อ 3 มิลลิลิตร ของเลือดทั้งหมด และ หมู่แล้ว 7% (2/29) ของผู้ป่วยมีกลุ่มเซลล์ชื่อยังหมุนเวียนเนื้องอก microemboliหรือหลายเซลล์ CTC clusters (ตารางที่ 3 และข้อมูล Supp.2) . ความเปรียบต่าง การวิเคราะห์เลือดจากผู้บริจาคมีสุขภาพดี 10เปิดเผยไม่ CTCs เราสังเกตเห็นแนวโน้มของตัวเลขที่เพิ่มขึ้นของ CTCs ตามระยะของโรคตั้งแต่ในแหล่งกำเนิดการแพร่กระจายโรค ตรงกันข้าม พบว่า ไม่มีความสัมพันธ์ระหว่างจำนวน CTCs และเซรั่มความเข้มข้นของการตัวบ่งชี้มะเร็ง CEA (มะเร็งตัวอ่อน antigen) และCA19.9 (Supp. ข้อมูล 2) ถัดไป เราทำการมัลติเพล็กซ์ทดสอบจีโนไทป์คราส โดย ddPCR ทำ 86% (30/35)เรียบร้อย เนื่องจากไม่สามารถขยายตัวอย่าง 5 โดยทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจสอบวงเงิน 0.2% (รูปที่ 3) ผลการศึกษาพบว่าเรา
มีความสามารถในการตรวจสอบสัญญาณจริงสำหรับตัวอย่างเลือดถูกแทง
ด้วย 5 PANC1 เซลล์ (เช่นน้อยกว่า 1 KRAS สำเนากลายพันธุ์ต่อมิลลิลิตร
เลือด) นอกจากนี้เรายังได้รับความอุดมสมบูรณ์อัตราการเชิงเส้นที่มี
ตัวอย่างถูกแทงด้วยจำนวนที่สูงขึ้นของเซลล์ PANC1 ใน
ทางตรงกันข้ามแซงเจอร์ลำดับพบว่ามีความไวใกล้เคียงกับ
100 เซลล์ต่อ 6 มล (คือประมาณ 16 สำเนาต่อเลือดมิลลิลิตร)
(รูปที่ 4A) ในขณะที่ TaqMelt และการบริหารทรัพยากรมนุษย์มีความไวใกล้เคียงกับ
75 และ 50 เซลล์ต่อ 6 มิลลิลิตรตามลำดับ (คือประมาณ 12 สำเนาหรือ 8
ชุดต่อเลือดมิลลิลิตร) (รูปที่ 4B และ C) บทสรุปของเหล่านี้
ผลการวิจัยจะถูกนำเสนอในตารางที่ 1
3.2 ddPCR สามารถตรวจพบการกลายพันธุ์ KRAS ใน CTCs จาก
ผู้ป่วย CRC
ต่อไปเราอยากที่จะประเมินผลการตรวจสอบของ KRAS กลายพันธุ์ใน
CTCs ที่ได้รับจากผู้ป่วยซีอาร์ซี สำหรับเรื่องนี้เราลงทะเบียนเรียน 35
ผู้ป่วยซีอาร์ซีในขั้นตอนใดของการเกิดโรคที่เข้ารับการรักษา
ไปยังแผนกผ่าตัดย่อยอาหารของ Pitie-SALP? ETRI ^ ERE
โรงพยาบาลมหาวิทยาลัย ลักษณะของการศึกษานี้จะมีการแสดง
ในตารางที่ 2 ครั้งแรกที่เราดำเนินการวิเคราะห์ CTC เลือด
ตัวอย่างที่ได้รับเพียงแค่ก่อนการผ่าตัดรักษาโรค การวิเคราะห์นี้
แสดงให้เห็นว่า 90% (26/29) ของผู้ป่วยที่เก็บงำอย่างน้อยหนึ่ง
CTC ต่อ 3 มิลลิลิตรของเลือดทั้งหมดแล้วและในหมู่ 7% (2/29) ของผู้ป่วย
ยังเซลล์กลุ่มชื่อหมุนเวียน microemboli เนื้องอก
หรือกลุ่ม CTC เซลล์ (ตารางที่ 3 และภาคผนวก. ข้อมูล
2) ในทางตรงกันข้ามการวิเคราะห์เลือดจากผู้บริจาคสิบสุขภาพ
เปิดเผยไม่มี CTCs เราสังเกตเห็นแนวโน้มของตัวเลขที่เพิ่มขึ้น
ของ CTCs ตามระยะของโรคตั้งแต่ในแหล่งกำเนิดการแพร่กระจาย
โรค ในทางตรงกันข้ามไม่มีความสัมพันธ์ที่ถูกพบระหว่าง
จำนวน CTCs และซีรั่มเข้มข้นที่
เนื้องอกเครื่องหมาย CEA (มะเร็งแอนติเจนตัวอ่อน) และ
CA19.9 (ภาคผนวก. ข้อมูล 2) ต่อไปเราจะดำเนินการ multiplex
KRAS จีโนไทป์ทดสอบโดย ddPCR 86% (30/35) ที่ได้ดำเนินการ
เสร็จเรียบร้อยแล้วตั้งแต่ 5 ตัวอย่างไม่สามารถขยายโดยทั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขีดจำกัด 0.2% ( รูปที่ 3 ) ผลการศึกษาพบว่า เราสามารถตรวจจับสัญญาณที่แท้จริงของตัวอย่างเลือดถูกแทง5 เซลล์ panc1 ( คือน้อยกว่า 1 kras กลายพันธุ์คัดลอกต่อมิลลิลิตรเลือด ) นอกจากนี้เราได้รับความอุดมสมบูรณ์เชิงเส้นที่มีอัตราส่วนคนถูกแทงด้วยตัวเลขที่สูงขึ้นของ panc1 เซลล์ ในส่วนแซงเจอร์ลำดับแสดงความใกล้100 เซลล์ต่อมิลลิลิตร ( IE 6 ประมาณ 16 แผ่นต่อเลือดมิลลิลิตร )( รูปที่ 4 ) ในขณะที่ taqmelt หรือมีความไวและใกล้กับ75 และ 50 เซลล์ต่อ 6 มิลลิลิตร ( คือประมาณ 12 เล่ม หรือ 8ชุดต่อเลือด ml ) ( 4B รูป C ) บทสรุปของเหล่านี้ผลจะแสดงในตารางที่ 13.2 . ddpcr สามารถตรวจสอบ kras การกลายพันธุ์ใน ctcs จากกลุ่มซีต่อไปเราต้องการประเมินการ kras กลายพันธุ์ในctcs ที่ได้รับจากผู้ป่วย 3 . สำหรับเรื่องนี้ เราลงทะเบียน 35ผู้ป่วย 3 ในขั้นตอนใดของโรคที่ถูกยอมรับไปแผนกศัลยกรรมทางเดินอาหารของ pitie ซาล์ป etri ^ ด่วนโรงพยาบาลของมหาวิทยาลัย ลักษณะที่ศึกษานี้มีระบุในตารางที่ 2 ครั้งแรกที่เราทำการวิเคราะห์ CTC ของเลือดตัวอย่างที่ได้รับก่อนการผ่าตัดรักษาพยาบาล . การวิเคราะห์นี้พบว่า 90 % ( 26 / 29 ) ของผู้ป่วยยอมรับอย่างน้อยหนึ่งCTC ต่อ 3 มิลลิลิตรของเลือดทั้งหมด และหมู่ 7 % ( 2 / 29 ) ของผู้ป่วยมีกลุ่มเซลล์เนื้องอก microemboli ชื่อหรือ CTC มีกลุ่ม ( ตารางที่ 3 และร่วมกับข้อมูล2 ) ในทางตรงกันข้าม , การวิเคราะห์เลือดจากผู้บริจาคที่มีสิบไม่พบ ctcs . เราพบแนวโน้มของตัวเลขที่เพิ่มขึ้นของ ctcs ตามระยะของโรคที่จะแพร่กระจายตั้งแต่ในแหล่งกำเนิดโรค ในทางตรงกันข้าม ไม่พบความสัมพันธ์ระหว่างจำนวน ctcs และความเข้มข้นของซีรั่มบ่งชี้มะเร็ง CEA ( มะเร็งแอนติเจนจากตัวอ่อนและca19.9 ( ร่วมกับข้อมูล 2 ) ต่อไป เราจะทำการมัลติเพล็กซ์kras genotype การทดสอบโดย ddpcr . 86 % ( 30 / 35 ) กำหนดเรียบร้อยแล้ว ตั้งแต่ 5 ตัวอย่างไม่สามารถขยายทั้งหมด