For measurement of GAD activity, GB

For measurement of GAD activity, GBR (0.5 g) was ground
with 4 mL phosphate buffer (pH 5.8) in an ice bath for extraction
of the enzyme. The homogenate was centrifuged at
10,000 × g for 15 min at 4 °C by using refrigerated high speed
centrifuge (5810R, Eppendorf, SN, Germany). The resulting supernatant
was the crude GAD used for assay of the activity of
GAD. The reaction mixture which consisted of 0.1 mL of crude
enzyme liquid and 0.2 mL of substrate was incubated for 2 h
at 30 °C and then terminated by adding 0.2 mL of 0.2 mol L−1
borate buffer (pH 9.0) and 1 mL of 6% phenol and 0.4 mL of 9%
sodium hypochlorite. After intensive oscillation, the mixture
was put in boiling water for 10 min, then put in ice bath for
20 min.The mixture was analyzed colorimetric at 630 nm wavelength
to determine absorption value. The GAD activity was
defined with reference to a 1 mol of GABA produced at 30 °C
per min per unit dry weight (mol GABA min−1 g−1 DW).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับการวัดกิจกรรมกาด GBR (0.5 กรัม) ถูกพื้นดินกับ 4 มิลลิลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 5.8) น้ำแข็งในการดูดของเอนไซม์ Homogenate การแก้ไขผลิตภัณฑ์ที่ตู้เย็น 10,000 × g 15 นาทีที่อุณหภูมิ 4 ° C โดยใช้ความเร็วสูงเหวี่ยงแยก (5810R, Eppendorf, SN เยอรมนี) Supernatant ผลกาดดิบถูกใช้สำหรับการทดสอบกิจกรรมของเดินไปเดินมา ส่วนผสมของปฏิกิริยาซึ่งประกอบด้วย 0.1 มล.น้ำมันดิบของเหลวเอนไซม์และ 0.2 mL ของพื้นผิวมี incubated สำหรับ 2 ชมที่ 30 ° C และสิ้นสุดลงแล้ว โดยการเพิ่ม 0.2 mL ของ 0.2 โมล L−1borate บัฟเฟอร์ (pH 9.0) และฟีนอล 6% และ 9% 0.4 mLโซเดียมไฮเปอร์คลอไรด์ หลังจากเร่งรัดสั่น ส่วนผสมใส่ในน้ำเดือด 10 นาที แล้วใส่ในอ่างน้ำแข็งสำหรับ20 นาที ส่วนผสมถูกวิเคราะห์เทียบเคียงที่ 630 nm ความยาวคลื่นเพื่อกำหนดค่าการดูดซึม แก้ไขกิจกรรมกาดกำหนดโดยอ้างอิงเป็นโมล 1 ของกาบา 30 ° Cต่อนาทีต่อหน่วยแห้งน้ำหนัก (โมล GABA min−1 g−1 DW)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการตรวจวัดของกิจกรรมท่อง GBR (0.5 กรัม) คือพื้นดิน
ที่มี 4 มลฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 5.8) ในอ่างน้ำแข็งสำหรับการสกัด
ของเอนไซม์ homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่
10,000 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสโดยใช้ความเร็วสูงตู้เย็น
เครื่องหมุนเหวี่ยง (5810R, Eppendorf, SN, เยอรมนี) ใสส่งผลให้
ได้รับกาดดิบที่ใช้ในการทดสอบของกิจกรรมของ
เดินไปเดินมา ผสมปฏิกิริยาซึ่งประกอบไปด้วย 0.1 มลน้ำมันดิบ
ของเหลวเอนไซม์และ 0.2 มิลลิลิตรของพื้นผิวถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง
ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสและสิ้นสุดลงแล้วโดยการเพิ่ม 0.2 มิลลิลิตร 0.2 mol L-1
บัฟเฟอร์ borate (pH 9.0) และ 1 มิลลิลิตรของ 6 ฟีนอล% และ 0.4 มิลลิลิตร 9%
โซเดียมไฮโปคลอไรต์ หลังจากการสั่นเข้มข้นผสม
ถูกใส่ในน้ำเดือด 10 นาทีแล้วใส่ในอ่างน้ำแข็ง
20 min.The ส่วนผสมที่ได้มาวิเคราะห์สีที่ 630 นาโนเมตรความยาวคลื่น
ในการกำหนดมูลค่าการดูดซึม กิจกรรมเดินไปเดินมาถูก
กำหนดด้วยการอ้างอิงถึง 1 mol ของ GABA ผลิตที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส
ต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนักแห้ง (? mol GABA นาที 1 กรัม-1 DW)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับวัดกาดกิจกรรมเพาะ ( 0.5 กรัม ) คือพื้นดิน4 ml ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 5.8 ) ในน้ำแข็งอาบการสกัดของเอนไซม์ โดยแยกเป็นระดับที่10 × G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C โดยการใช้เคาน์เตอร์ความเร็วสูงเครื่องปั่นเหวี่ยง ( 5810r เพนดอร์ฟ , SN , เยอรมัน ) นำผลคือน้ำมันที่ใช้สำหรับการทดสอบกาดของกิจกรรมกาด ปฏิกิริยาผสมซึ่งประกอบด้วย 0.1 ml ดิบของเหลวและ 0.2 มิลลิลิตรเอนไซม์ตั้งต้นถูกบ่ม 2 ชั่วโมงที่ 30 ° C และสิ้นสุดลงโดยการเพิ่ม 0.2 มล. 0.2 mol − 1 ลิตรบอเรตบัฟเฟอร์ pH 9.0 ) และ 1 มิลลิลิตรของฟีนอล 6% และ 9% 0.4 มิลลิลิตรโซเดียมไฮโปคลอไรด์ . หลังจากคาบ เข้มข้น ผสมใส่ในน้ำเดือด 10 นาที แล้วใส่ในอ่างสำหรับน้ำแข็ง20 นาที ส่วนผสมจะถูกวิเคราะห์โดยการวัดสีที่ 630 nm ความยาวคลื่นเพื่อตรวจสอบค่าการดูดซึม กิจกรรมที่กาดกำหนดโดยอ้างอิง 1 โมลของกรดแกมมา 30 ° C ที่ผลิตในต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนักแห้ง ( mol −− 1 GABA มิน 1 กรัม แห้ง )