Finally, single molecule amplificat

Finally, single molecule amplification using micPCR actually prevented the generation of chimeric products, due to the fact that we found an increase in chimeric sequences in the micPCR/NGS as the amount of template DNA molecules in PCR amplification reactions was increased (Supplementary Table 1). Importantly, the total template DNA molecules in a micelle PCR/NGS protocol should be kept below 10% of total micelle count to avoid any detectable chimera formation due to individual micelles hosting more than one template molecule. Therefore, the final numbers of target DNA molecules have to be carefully adjusted for each micPCR/NGS project to balance reaction yield and reaction specificity according to the experimental requirements.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สุดท้าย เดี่ยวขยายโมเลกุลที่ใช้ micPCR ที่จริง ทำให้ไม่สามารถสร้างผลิตภัณฑ์ chimeric เนื่องจากว่า เราพบการเพิ่มขึ้นใน micPCR/NGS chimeric ลำดับเป็นจำนวนโมเลกุลดีเอ็นเอต้นแบบในปฏิกิริยา PCR ขยายเพิ่มขึ้น (เสริมตาราง 1) สำคัญ โมเลกุลดีเอ็นเอแม่แบบรวมใน micelle ที่ PCR/NGS โพรโทคอลควรเก็บไว้ด้านล่าง 10% ของ micelle รวมนับเพื่อ หลีกเลี่ยงการใด ๆ ก่อตัวชิเมร่าอาสาจาก micelles แต่ละโฮสต์มากกว่าหนึ่งแม่แบบโมเลกุล ดังนั้น หมายเลขสุดท้ายของโมเลกุลดีเอ็นเอเป้าหมายมีการปรับปรุงสำหรับแต่ละโครงการ micPCR/NGS สมดุลผลผลิตของปฏิกิริยาและปฏิกิริยา specificity ตามความต้องการทดลองอย่างระมัดระวัง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สุดท้ายขยายโมเลกุลเดียวโดยใช้ micPCR จริงป้องกันไม่ให้เกิดการสร้างผลิตภัณฑ์ลูกผสมเนื่องจากความจริงที่ว่าเราพบว่าการเพิ่มขึ้นในลำดับลูกผสมใน micPCR / NGS เป็นจำนวนเงินที่แม่แบบโมเลกุลดีเอ็นเอปฏิกิริยาขยาย PCR ที่เพิ่มขึ้น (เสริมตารางที่ 1) . ที่สำคัญแม่แบบโมเลกุลดีเอ็นเอรวมในไมเซลล์โปรโตคอล PCR / NGS ควรจะเก็บไว้ต่ำกว่า 10% ของการนับรวมไมเซลล์เพื่อหลีกเลี่ยงการก่อความฝันที่ตรวจพบอันเนื่องมาจากไมเซลล์แต่ละโฮสติ้งมากกว่าหนึ่งโมเลกุลแม่แบบ ดังนั้นตัวเลขสุดท้ายของโมเลกุลดีเอ็นเอเป้าหมายที่จะต้องมีการปรับอย่างระมัดระวังสำหรับแต่ละโครงการ micPCR / NGS เพื่อความสมดุลของผลตอบแทนและความจำเพาะปฏิกิริยาปฏิกิริยาตามความต้องการของการทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สุดท้าย แบบโมเลกุลเดี่ยวที่ใช้ micpcr จริงป้องกันไม่ให้รุ่นของผลิตภัณฑ์ที่ , เนื่องจากความจริงที่ว่าเราพบการเพิ่มขึ้นของยีน ~ i ใน micpcr / เทคเป็นยอดเงินของแม่แบบดีเอ็นเอของโมเลกุลในปฏิกิริยา PCR ที่ขยายเพิ่มขึ้น ( ตารางประกอบ 1 ) ที่สำคัญรวมแม่แบบดีเอ็นเอของโมเลกุลในไมเซลล์ PCR / แทนพิธีสารควรจะเก็บไว้ต่ำกว่า 10% นับไมเซลล์ทั้งหมดเพื่อหลีกเลี่ยงการใด ๆที่ตรวจพบ คิเมร่าเกิดเนื่องจากบุคคลไมเซลล์โฮสต์มากกว่าหนึ่งแม่แบบโมเลกุล ดังนั้นตัวเลขสุดท้ายของโมเลกุลของดีเอ็นเอเป้าหมาย ต้องปรับอย่างระมัดระวังสำหรับโครงการ micpcr / แทนแต่ละสมดุลปฏิกิริยาต่อผลผลิตและปฏิกิริยาตามความต้องการทดลอง