A novel reverse transcription-multi

A novel reverse transcription-multiplex polymerase chain reaction assay was developed to detect Aichi
virus, human parechovirus, enteroviruses, and human bocavirus. A mixture of four pairs of published
specific primers, 6261 and 6779, ev22(+) and ev22(−), F1 and R1, 188F and 542R, was used to amplify
the viral genomes and specifically generate four different amplicon sizes of 519, 270, 440, and 354 bp for
Aichi virus, human parechovirus, enteroviruses, and human bocavirus, respectively. A total of 247 fecal
specimens previously screened for rotavirus, adenovirus, norovirus, sapovirus, and astrovirus-negative,
collected from infants and children with acute gastroenteritis in Japan from July 2007 to June 2008, were
tested further for the presence of the four viruses, Aichi virus, human parechovirus, enteroviruses, and
human bocavirus, by RT-multiplex PCR. The total detection rate of these viruses was 26.7% (66 out of
247 samples). Of these, HPeV, EVs, and HBoV were identified in 20, 41, and 5 specimens. No Aichi virus
was found among these subjects. The sensitivity and specificity of RT-multiplex PCR were assessed and
demonstrated a strong validation against RT-monoplex PCR. This is the first report of detecting these
types of viruses in fecal samples from infants and children with acute gastroenteritis by RT-multiplex
PCR.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นวนิยายย้อนกลับถอดความ multiplex-โพลิเมอร์ห่วงโซ่ทดสอบปฏิกิริยาได้รับการพัฒนาในการตรวจจับไวรัสไอจิ
parechovirus มนุษย์ enteroviruses และ bocavirus มนุษย์ ส่วนผสมของสี่คู่ตีพิมพ์
ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง, 6261 และ 6779, ev22 () และ ev22 (-), F1 และ r1, 188f 542r และถูกนำมาใช้เพื่อขยายจีโนมของไวรัส
และโดยเฉพาะการสร้างสี่ขนาด amplicon ที่แตกต่างกันของ 519, 270, 440,และ 354 bp สำหรับ
ไอจิไวรัส parechovirus มนุษย์ enteroviruses และ bocavirus มนุษย์ตามลำดับ จำนวน 247 ตัวอย่างอุจจาระ
ฉายก่อนหน้านี้สำหรับโรตาไวรัส, adenovirus เชื้อ norovirus, sapovirus และ astrovirus ลบ
ที่เก็บได้จากทารกและเด็กที่มีภาวะกระเพาะและลำไส้อักเสบเฉียบพลันในประเทศญี่ปุ่นตั้งแต่เดือนกรกฎาคม 2007 ถึงมิถุนายน 2008 เป็น
ทดสอบต่อไปสำหรับการปรากฏตัวของ สี่ไวรัสไอจิไวรัสparechovirus มนุษย์ enteroviruses และ
bocavirus มนุษย์โดย RT-PCR multiplex อัตราการตรวจจับได้แล้วทั้งหมดของไวรัสเหล่านี้คือ 26.7% (66 จาก 247 ตัวอย่าง
) เหล่านี้ hpev, EVS และ hbov ถูกระบุไว้ใน 20, 41, และ 5 ตัวอย่าง ไม่มี
ไวรัสไอจิถูกพบในวิชาเหล่านี้ ความไวและความจำเพาะของ multiplex RT-PCR โดยประเมินและ
แสดงให้เห็นถึงการตรวจสอบที่แข็งแกร่งกับ RT-PCR monoplex นี้เป็นครั้งแรกที่รายงานการตรวจสอบชนิด
เหล่านี้ของไวรัสในอุจจาระจากเด็กทารกและเด็กที่มีภาวะกระเพาะและลำไส้อักเสบเฉียบพลันโดย multiplex RT-PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดสอบปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมนวนิยายย้อน transcription ล็กอเรสได้รับการพัฒนาสืบจิ
ไวรัส parechovirus มนุษย์ enteroviruses และ bocavirus มนุษย์ ผสมคู่ 4 ของประกาศ
ใช้เฉพาะไพรเมอร์ 6261 และ 6779, ev22 () และ ev22(−), F1 และ R1, 188F และ 542R ขยาย
genomes ไวรัส และโดยเฉพาะสร้างสี่ขนาดต่าง ๆ amplicon 519, 270, 440 และ 354 bp สำหรับ
จิไวรัส parechovirus มนุษย์ enteroviruses และมนุษย์ bocavirus ตามลำดับ จำนวน 247 fecal
ไว้เป็นตัวอย่างฉายก่อนหน้านี้ rotavirus, adenovirus, norovirus, sapovirus และ astrovirus- ลบ,
รวบรวมจากทารกและเด็กที่ มีโรคกระเพาะอักเสบเฉียบพลันในประเทศญี่ปุ่นจาก 2007 กรกฎาคมถึงเดือน 2551 มิถุนายน ถูก
ทดสอบเพิ่มเติมสำหรับสถานะของไวรัส 4 ไวรัสไอจิ มนุษย์ parechovirus, enteroviruses และ
bocavirus มนุษย์ โดยล็ก RT PCR อัตราการตรวจจับทั้งหมดของไวรัสเหล่านี้เป็น 26.7% (66 ของ
ตัวอย่าง 247) เหล่านี้ HPeV และ และ HBoV ได้ระบุใน 20, 41 และไว้เป็นตัวอย่างที่ 5 ไม่มีไวรัสไอจิ
พบในเรื่องเหล่านี้ ประเมินความไวและ specificity ล็ก RT PCR และ
แสดงการตรวจสอบที่แข็งแกร่งกับ RT monoplex PCR เป็นรายงานแรกของการตรวจสอบเหล่านี้
ชนิดของไวรัสในตัวอย่าง fecal จากทารกและเด็กที่ มีโรคกระเพาะอักเสบเฉียบพลันโดย RT ล็ก
PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สอบปฏิกิริยาลูกโซ่ polymerase นวนิยายย้อนกลับการถอดสคริปต์ - แบบมัลติเพล็กซ์ที่ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อตรวจหา aichi
ไวรัส parechovirus มนุษย์ enteroviruses และ bocavirus มนุษย์ การผสมผสานของทั้งสี่คู่ของ primers เฉพาะเผยแพร่
6261 และ 6779 EV 22 ()และ EV 22 ( - ) F 1 และ R 1188 และ F 542 R ถูกใช้เพื่อเพิ่ม
genomes ร่องรอยของไวรัสและโดยเฉพาะสร้างสี่มีขนาดแตกต่างกัน amplicon 519270440และ 354 BP สำหรับ
aichi ไวรัส parechovirus enteroviruses มนุษย์และมนุษย์ bocavirus ตามลำดับ. ยอดรวมของ 247 อุจจาระ
ตัวอย่างที่คัดสรรสำหรับ rotavirus กำลังคร่าชีวิต adenovirus norovirus sapovirus และ astrovirus - ลบ
เก็บรวบรวมจากทารกและเด็กพร้อมด้วย gastroenteritis เฉียบพลันในประเทศญี่ปุ่นตั้งแต่เดือนกรกฎาคม 2007 ถึงเดือนมิถุนายน 2008 มี
ซึ่งจะช่วยเพิ่มเติมได้รับการทดสอบสำหรับการมีอยู่ของสี่ไวรัสไวรัส aichiparechovirus enteroviruses มนุษย์และมนุษย์
bocavirus โดย pcr. Rt - แบบมัลติเพล็กซ์ อัตราการตรวจจับทั้งหมดของการติดไวรัสเหล่านี้ก็คือ 26.7% ( 66 ออกจาก
247 ตัวอย่าง) ของเหล่านี้ hpev evs hbov และได้รับการระบุว่าใน 2041 และ 5 ตัวอย่าง ไวรัส aichi ไม่มี
ก็พบว่าในท่ามกลางเรื่องเหล่านี้ Mainstream )เพียงเท่านั้นและความไวของ pcr Rt - แบบมัลติเพล็กซ์และประเมิน
pcr. แสดงให้เห็นถึงการตรวจสอบต่อต้าน Rt - monoplex โรงแรมแห่งนี้คือรายงานครั้งแรกของ
ซึ่งจะช่วยทำการตรวจหาไวรัส ประเภท นี้ในตัวอย่างอุจจาระจากเด็กทารกและเด็กที่พร้อมด้วย gastroenteritis เฉียบพลันโดย pcr. Rt -
ตามมาตรฐานแบบมัลติเพล็กซ์