Gene expression levels of relevant pro-inflammatory
(TNF-a, IL-6) and adaptive immune (IFN-g, IL-10) cytokines
were determined in swine PBMC. Total RNA
extraction and quantification was performed within 1
week after sample collection and storage. RNA extraction
was performed by using TRI-reagent (Ambion-Life Technologies,
Grand Island, NY, USA) according to the
manufacturer’s instructions; purity and concentration
were assessed by UV-spectrophotometry at 260/280 and
260 nm respectively (GeneQuant Pro, Amersham Pharmacia
Biotech-GE Healthcare Life Sciences, Little Chalfont,
UK). RNA integrity and quality were assessed by using an
Agilent Bioanalyzer 2100 and RNA 6000 Labchip kit
(Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA). RNA samples
were stored at 80 8C until reverse-transcription (RT).
ระดับการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องโปรอักเสบ
(TNF-A, IL-6) และภูมิคุ้มกัน (IFN-G, IL-10) cytokines ที่
ได้รับการพิจารณาในสุกร PBMC RNA รวม
สกัดและปริมาณที่ได้ดำเนินการภายใน 1
สัปดาห์หลังจากการเก็บตัวอย่างและการเก็บรักษา สกัด RNA
ถูกดำเนินการโดยใช้น้ำยา TRI-(Ambion-Life Technologies,
เกาะแกรนด์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) ตาม
คำแนะนำของผู้ผลิต; ความบริสุทธิ์และความเข้มข้น
ที่ได้รับการประเมินจาก UV-spectrophotometry ที่ 260/280 และ
260 นาโนเมตรตามลำดับ (GeneQuant Pro, Amersham Pharmacia
Biotech-GE Healthcare วิทยาศาสตร์สิ่งมีชีวิตเล็ก ๆ น้อย ๆ Chalfont,
สหราชอาณาจักร) ความสมบูรณ์ของ RNA และคุณภาพได้รับการประเมินโดยใช้
ชุด Agilent Bioanalyzer 2100 และ RNA 6000 Labchip
(Agilent Technologies, ซานตาคลารา, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ตัวอย่าง RNA
ถูกเก็บไว้ที่? 80 8C จนย้อนกลับถอดความ (RT)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ระดับการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้อง pro-inflammatory( tnf-a , IL-6 ) และปรับภูมิคุ้มกัน ( ifn-g เตอร์ชนิด , )วิเคราะห์พื้นฐานในสุกร อาร์เอ็นเอทั้งหมดการสกัดและการบอกจำนวนได้ภายใน 1สัปดาห์หลังจากการเก็บตัวอย่างและการเก็บข้อมูล การสกัดอาร์เอ็นเอกระทำโดยการใช้เทคโนโลยี ambion ไตร ( ชีวิต ,เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก , สหรัฐอเมริกา ) ไปตามคําแนะนําของผู้ผลิต ; ความบริสุทธิ์และความเข้มข้นมีการประเมินโดยวิธียูวีที่ 260 / 280 และ260 nm ตามลำดับ ( genequant มุ่งมั่นโปรชามเทคโนโลยีชีวภาพโดยโรคริดสีดวงทวาร วิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต , น้อย ,สหราชอาณาจักร ) ความสมบูรณ์ของ RNA และคุณภาพจะถูกประเมินโดยใช้ด้าน bioanalyzer 2100 และ RNA 6000 labchip ชุด( Agilent Technologies , ซานตาคลารา แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) ตัวอย่างอาร์เอ็นเอเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 80 8C จนกระทั่งกลับถอดความ ( RT )
การแปล กรุณารอสักครู่..
