Modified version of the alkaline pr

Modified version of the alkaline protocol described by Uhl et al.13 was performed with drinking water samples. Human hepatoma cell line (HepG2 cells) was obtained from prof. dr. Knasmueller, Institute of Cancer Research of The Univeristy of Vienna. Cells were grown in multilayer culture at 37 °C in humifiedatmosphereof 5% CO2 in Dulbecco’s ModifiedEagle’sMedium(DMEM) supplemented with 10% foetal calf serum (FCS) and antibiotic (0.1% gentamycin) in well plates for 7 days (cell density: 106–108 cells/mL). Medium was changed every 2 days. Seven days old cells were exposed to water samples, negative and positive controls (500 μM hydrogen peroxide) for 20 min and afterwards cell suspensions were prepared with 0.25% trypsin-EDTA solution, passed through injection needle for several times to achieve single cell suspension and finallyresuspendedinDMEM medium, supplemented with 10% FCS medium. The dye-exclusion test with Trypan blue was used to examine the viability of cells before the comet assay was performed.27

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แก้ไขเวอร์ชันของโพรโทคอด่างโดย Uhl et al.13 ทำกับตัวอย่างน้ำดื่ม บรรทัด hepatoma มนุษย์เซลล์ (เซลล์ HepG2) ได้รับจากรศ.ดร. Knasmueller สถาบันมะเร็งวิจัย Univeristy เวียนนา เซลล์มีการเติบโตในวัฒนธรรมหลายชั้นที่ 37 ° C humifiedatmosphereof 5% CO2 ใน ModifiedEagle'sMedium(DMEM) ของดุลเบกโกเสริม ด้วยเซรั่ม 10% ลูก foetal (FCS) และยาปฏิชีวนะ (0.1% gentamycin) ในแผ่นทั้ง 7 วัน (ความหนาแน่นของเซลล์: 106 – 108 เซลล์/มล.) สื่อมีการเปลี่ยนแปลงทุก 2 วัน วันที่เจ็ดเซลล์เก่าถูกสัมผัสกับน้ำตัวอย่าง ควบคุมค่าบวก และค่าลบ (500 μM ไฮโดรเจนเพอร์ออกไซด์) สำหรับ 20 นาทีและหลังจากนั้นเซลล์บริการได้พร้อมโซลูชัน 0.25% EDTA ทริปซิน ผ่านเข็มฉีดยาหลายครั้งเพื่อให้เซลล์เดียวระงับและ finallyresuspendedinDMEM สื่อ เสริม ด้วยสื่อ FCS 10% ทดสอบการแยกสี Trypan blue ถูกใช้เพื่อตรวจสอบศักยภาพของเซลล์ก่อนวิเคราะห์ดาวหางถูก performed.27

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รุ่นที่ปรับเปลี่ยนโปรโตคอลด่างอธิบายโดย Uhl et al.13 ได้ดำเนินการกับตัวอย่างน้ำดื่ม มนุษย์สายพันธุ์ของเซลล์ตับ (เซลล์ HepG2) ที่ได้รับจากศ ดร Knasmueller สถาบันการวิจัยโรคมะเร็งของมหาวิทยาลัยเวียนนา เซลล์ที่ถูกปลูกในหลายวัฒนธรรมที่ 37 ° C ใน humifiedatmosphereof CO2 5% ใน Dulbecco ของ ModifiedEagle'sMedium (DMEM) เสริมด้วยซีรั่ม 10% จากลูกวัว (FCS) และยาปฏิชีวนะ (0.1% Gentamycin) ในแผ่นเดียวเป็นเวลา 7 วัน (ความหนาแน่นของเซลล์: 106-108 เซลล์ / มิลลิลิตร) ก็เปลี่ยนขนาดกลางทุก 2 วัน เจ็ดวันเซลล์เก่าได้สัมผัสกับตัวอย่างน้ำควบคุมเชิงลบและบวก (500 ไมครอนไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์) เป็นเวลา 20 นาทีและหลังจากนั้นเซลล์แขวนลอยได้จัดทำกับการแก้ปัญหา trypsin-EDTA 0.25% ผ่านเข็มฉีดยาสำหรับหลาย ๆ ครั้งเพื่อให้บรรลุการระงับเซลล์เดียวและ กลาง finallyresuspendedinDMEM เสริมด้วย 10% FCS กลาง การทดสอบสียกเว้นสีฟ้ากับ Trypan ถูกใช้ในการตรวจสอบความมีชีวิตของเซลล์ก่อนการทดสอบดาวหางเป็น performed.27

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แก้ไขรุ่นของโพรโทคอลที่อธิบายโดยอัล et al.13 ด่างได้ด้วยการดื่มน้ำ . เซลล์ตับมนุษย์เซลล์มะเร็งตับ ) ได้จาก ศ. ดร. knasmueller , สถาบันการวิจัยโรคมะเร็งของมหาวิทยาลัยเวียนนาเซลล์เติบโตในวัฒนธรรมที่ 37 ° C ในชั้น humifiedatmosphereof 5% CO2 ในดัลเบโค่ก็ modifiedeagle'smedium ( dmem ) เสริมด้วย 10% เซรั่ม foetal น่อง ( FCS ) และสารปฏิชีวนะ ( 0.1% Gentamycin ) ในแผ่นสำหรับ 7 วัน ( ความหนาแน่นเซลล์ : 106 - 108 เซลล์ / มิลลิลิตร ) ขนาดเปลี่ยนทุก 2 วัน เซลล์เก่าเจ็ดวันเปิดรับตัวอย่างน้ำควบคุมบวกและลบ ( 500 μ M ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ) นาน 20 นาที และหลังจากนั้นเซลล์แขวนลอยถูกเตรียม 0.25% ตามลำดับเอนไซม์โซลูชั่นผ่านเข็มฉีดหลายๆ ครั้ง เพื่อให้ช่วงล่างเซลล์เดียวและ finallyresuspendedindmem medium เสริมด้วย 10% FCS )ย้อมไปทดสอบกับไตรแพนสีฟ้าถูกใช้เพื่อตรวจสอบความมีชีวิตของเซลล์ ก่อน performed.27 ดาวหางวิเคราะห์คือ