One hundred and twenty-one rice-spe

One hundred and twenty-one rice-specific simple
sequence length polymorphism (SSLP) primer pairs were obtained
from Research Genetics Inc. (Huntsville, AL, USA) and SSLP
analysis was performed following a standard protocol (Chen et al.
1997). The forward primers for all the primer pairs were radiolabelled
using c-33P-ATP and T4 polynucleotide kinase. The polymerase
chain reaction (PCR) was carried out on a thermal cycler
Perkin-Elmer 2400 System (Perkin-Elmer, Wellesley, MA, USA) in
0.2 ml microcentrifuge tubes. The PCR profile consisted of: 94C for
5 min for initial denaturation, followed by 25 amplification cycles
comprising steps of 94C for 30 s, 57C for 30 s, 72C for 1 min
and followed by a final elongation at 72C for 5 min. Acrylamide
gel (6%) was used for running 5 ll of the amplification products
and the gel was placed in a fixer solution containing 5% acetic acid
and 10% methanol for 30 min followed by drying and exposure to
X-ray films (Kodak India Ltd, Mumbai, India). The autoradiograms
were developed and the data on polymorphism recorded. In the
initial phase, five plants from each of the resistant and susceptible
pools, were used for bulked segregant analysis (BSA). Then, 100 F2
plants derived from the CO39/Tadukan cross were used for
segregation analysis to find the co-segregating markers

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ง่ายเฉพาะข้าวหนึ่งร้อย และน้อยลำดับความยาวโพลีมอร์ฟิซึม (SSLP) รองพื้นคู่ได้รับจากการวิจัยพันธุศาสตร์ Inc. (ฮันต์สวิลล์ AL สหรัฐอเมริกา) และ SSLPทำการวิเคราะห์ต่อโพรโทคอลมาตรฐาน (Chen et alปี 1997) . ไพรเมอร์ไปข้างหน้าสำหรับคู่รองพื้นทั้งหมดถูก radiolabelledใช้ c-P 33-ATP และ T4 polynucleotide kinase การพอลิเมอเรสปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ถูกดำเนินการบน cycler ร้อนระบบเพอร์เอลเมอ 2400 (เอลเมอเพอร์ เวลเลสเลย์ MA, USA) ใน0.2 ml microcentrifuge หลอด ประกอบด้วยโพรไฟล์ PCR: C 94 สำหรับ5 นาทีสำหรับ denaturation เริ่มต้น ตามวงจรขยาย 25ประกอบด้วยขั้นตอน C 94 สำหรับ 30 s, C 57 สำหรับ 30 s, C 72 ใน 1 นาทีและไปมาแล้ว โดย elongation ขั้นสุดท้ายที่ 72 C สำหรับ 5 นาทีอะคริลาไมด์เจล (6%) ใช้สำหรับการรัน 5 จะขยายผลิตภัณฑ์และเจมีอยู่ในผู้ให้บริการโซลูชันที่ประกอบด้วยกรดอะซิติก 5%และเมทานอล 10% ใน 30 นาทีตาม ด้วยการอบแห้งและการสัมผัสเอ็กซ์เรย์ฟิล์ม (โกดักอินเดีย Ltd มุมไบ อินเดีย) Autoradiogramsได้รับการพัฒนา และบันทึกข้อมูลบนโพลิมอร์ฟิซึม ในระยะเริ่มต้น พืชห้าจากทน และไวต่อสระว่ายน้ำ ถูกใช้สำหรับวิเคราะห์ bulked segregant (บีเอสเอ) แล้ว 100 F2พืชได้มาจากการ CO39 / Tadukan ข้ามใช้สำหรับวิเคราะห์แบ่งแยกหาเครื่องหมายร่วม segregating

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หนึ่งร้อยยี่สิบเอ็ดข้าวเฉพาะที่เรียบง่ายแตกต่างระยะเวลาในลำดับ (SSLP) คู่ไพรเมอร์ที่ได้รับจากการวิจัยพันธุศาสตร์อิงค์(Huntsville, AL, สหรัฐอเมริกา) และ SSLP วิเคราะห์ได้ดำเนินการดังต่อไปนี้โปรโตคอลมาตรฐาน (Chen et al. 1997) ไพรเมอร์ไปข้างหน้าสำหรับทุกคู่ไพรเมอร์ได้รับการ radiolabelled ใช้ C-33p-เอทีพีและไคเนส Polynucleotide T4 โพลิเมอร์ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ได้ดำเนินการในการระบายความร้อน Cycler เพอร์กินเอลเมอ 2400 ระบบ (เพอร์กินเอลเมอเลสลีย์, MA, USA) ใน0.2 มล. หลอดไมโคร รายละเอียด PCR ประกอบด้วย: 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา5 นาทีสำหรับ denaturation เริ่มต้นตามด้วย 25 รอบการขยายประกอบด้วยขั้นตอนจาก 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที 57 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที? และตามด้วยการยืดตัวสุดท้าย ที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ริลาไมด์เจล (6%) ถูกนำมาใช้สำหรับการทำงาน 5 LL ของผลิตภัณฑ์ขยายและเจลถูกวางไว้ในการแก้ปัญหาผู้ให้บริการที่มี5% กรดอะซิติกและเมทานอล10% เป็นเวลา 30 นาทีตามด้วยการอบแห้งและการสัมผัสกับฟิล์มเอ็กซ์เรย์(Kodak อินเดีย จำกัด มุมไบประเทศอินเดีย) autoradiograms ได้รับการพัฒนาและข้อมูลที่บันทึกไว้ในความแตกต่าง ในระยะเริ่มต้นห้าพืชจากแต่ละทนและความเสี่ยงที่สระว่ายน้ำถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์segregant มีเนื้อมีหนัง (BSA) จากนั้น 100 F2 พืชที่ได้มาจาก? CO39? /? Tadukan? ข้ามถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์แยกหาเครื่องหมายร่วมแยก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หนึ่งร้อยยี่สิบเอ็ดข้าวเฉพาะง่าย
ลำดับ length polymorphism ( sslp ) ไพรเมอร์คู่ได้
จากการวิจัยพันธุศาสตร์อิงค์ ( ฮันต์สวิลล์อัล , USA ) และการวิเคราะห์ sslp
มีการปฏิบัติตามมาตรฐาน ( Chen et al .
1997 ) ไพรเมอร์รองพื้นไปทุกคู่มี radiolabelled
ใช้ c-33p-atp T4 พอลินิวคลีโอไทด์และผ่านขบวนการ การใช้
ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) พบว่าในรอบ
เพอร์กินเอลเมอร์ 2400 ระบบความร้อน ( เพอร์กินเอลเมอร์โตรอนโต , แม่ , USA )
0.2 ml หลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ . pcr โปรไฟล์ประกอบด้วย : 94  C
5 นาทีสำหรับการเริ่มต้น ( ตาม 25 ( รอบ
ประกอบด้วยขั้นตอนของ 94  C 30 , 57  เป็นเวลา 30 วินาที , 1 นาที 72  C
และตามด้วยการยืดตัวสุดท้ายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที
 อะคริลาไมด์เจล ( 6 % ) ใช้วิ่ง 5 จะได้ของผลิตภัณฑ์ (
และเจลอยู่ในผู้ให้บริการโซลูชั่นที่ประกอบด้วย 5% กรดอะซิติก
และเมทานอล 10% เป็นเวลา 30 นาที ตามด้วยการอบแห้ง และการเปิดรับ
ฟิล์มเอ็กซ์เรย์ ( Kodak อินเดีย จำกัด , มุมไบ , อินเดีย ) การ autoradiograms
ถูกพัฒนาและข้อมูลในรูปแบบการบันทึก ใน
ขั้นตอนการเริ่มต้น ห้าต้น จากแต่ละป้องกันไว
สระสถิติที่ใช้วิเคราะห์ segregant ยก ( BSA ) แล้ว 100 F2
พืชที่ได้มาจาก  co39  /  tadukan  ข้ามถูกใช้เพื่อแยกวิเคราะห์หา
ร่วมแยกเครื่องหมาย