The biopsies were rinsed in ice-col

The biopsies were rinsed in ice-cold saline, blotted to remove excess
saline, weighed, minced, and suspended in 2 vol (vol/wt) of the homogenization
buffer: 50 mM KCl, 200 mM sucrose and 20 mM Tris* HC1,
pH 7.8 (8). After addition of 1 mM of the insecticide 2,6-dichlororinyl
dimethyl phosphate (VAPONA), the suspension was dispersed by using
a polytron for 10 s at a low setting. The slurry was then homogenized
in a Potter-Elvehjem homogenizer with a tight-fitting pestle. The homogenate
was centrifuged twice at 10,000 g for 10 min. The postmitochondrial
supernatant was centrifuged 60 min at 100,000 g. The microsomal
pellets were surface washed with SI buffer (25 mM sucrose and
25 mM imidazole, pH 7.2 [SI]) and stored frozen in liquid N2. The
supernatant (liver cytosol) was stored frozen at -20°C. Rat liver microsomes
and cytosol were prepared as described by Suttie et al. (9).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประสาทการตรวจชิ้นเนื้อจะถูก rinsed ในฉ่ำน้ำเกลือ blotted ลบเกินน้ำเกลือ ชั่งน้ำหนัก สับ และหยุดชั่วคราวใน vol 2 (vol/wt) ของ homogenization ที่บัฟเฟอร์: 50 mM KCl ซูโครส 200 มม.และ 20 มม.ตรี * HC1pH 7.8 (8) หลังจากนี้ 1 มม.ของยาฆ่าแมลง 2,6-dichlororinyldimethyl ฟอสเฟต (VAPONA), การระงับได้กระจายโดยฝากระจกโค้ง 10 s ที่เป็นตัวการ สารละลายถูกแล้ว homogenized เป็นกลุ่มใน homogenizer พอตเตอร์ Elvehjem กับ pestle กระชับแน่น Homogenateถูก centrifuged สองที่ g 10000 สำหรับ 10 นาที ที่ postmitochondrialsupernatant ถูก centrifuged 60 นาทีที่ 100000 g ที่ microsomalขี้พื้นผิวที่ล้าง ด้วยบัฟเฟอร์ SI (ซูโครส 25 มม. และอิมิดาโซลมม. 25, pH 7.2 [SI]) และเก็บแช่แข็งในเหลว N2 ที่supernatant (ตับไซโตซอล) ถูกเก็บแช่แข็งที่-20 องศาเซลเซียส ตับหนู microsomesและไซโตซอลถูกจัดเตรียมตามที่อธิบายไว้โดย Suttie et al. (9)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขริบถูกล้างด้วยน้ำเกลือเย็น, เปื้อนเพื่อลบส่วนเกิน
น้ำเกลือชั่งน้ำหนักสับและแขวนลอยใน 2 ฉบับ (ปริมาตร / น้ำหนัก) ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของ
บัฟเฟอร์: 50 มิลลิ KCl, 200 มิลลิซูโครสและ 20 มิลลิ Tris * HC1,
พีเอช 7.8 (8) หลังจากที่เพิ่มขึ้นของ 1 มิลลิของยาฆ่าแมลง 2,6-dichlororinyl
ฟอสเฟต dimethyl (VAPONA) ระงับกำลังแพร่ระบาดโดยใช้
Polytron นเวลา 10 วินาทีในการตั้งค่าที่ต่ำ ผสมทำให้เป็นเนื้อเดียวกันแล้ว
ในพอตเตอร์โฮโมจีไน Elvehjem กับสากแน่นกระชับ homogenate
ถูกปั่นเป็นครั้งที่สอง 10,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาที postmitochondrial
ใสถูกปั่น 60 นาทีที่ 100,000 กรัม ไมโคร
เม็ดถูกผิวล้างด้วยบัฟเฟอร์ SI (ซูโครส 25 มิลลิเมตรและ
25 มิลลิเมตร imidazole ค่า pH 7.2 [ศรี]) และจัดเก็บแช่แข็งในของเหลว N2
ใส (ตับเซลล์) ได้รับการจัดเก็บแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส ไมโครตับหนู
และเซลล์ได้จัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้โดย Suttie และคณะ (9)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่เซลล์ถูกล้างในน้ำเกลือ น้ำแข็งเย็น ลบเพื่อลบส่วนเกิน
น้ำเกลือ , ชั่งน้ำหนัก , สับ , และระงับ 2 Vol ( ปริมาตร / น้ำหนัก ) ของการ
บัฟเฟอร์ : . 50 มม. 200 มม. ซูโครสและสกัดโดย * 20 มม.
pH 7.8 ( 8 ) หลังจากเพิ่ม 1 มม. ของยาฆ่าแมลง 2,6-dichlororinyl
ไดเมททิลฟอสเฟต ( วาโพนา ) ถูกระงับการกระจายโดยใช้การ polytron 10 S ที่การตั้งค่าต่ำความเข้มข้นเป็นโฮโม
ในพอตเตอร์ Homogenizer elvehjem ด้วยแน่นกระชับสาก โดยแยกเป็นระดับสองหมื่น G
ที่ 10 นาทีนำ postmitochondrial
คือระดับ 60 นาทีที่ 100000 กรัม เม็ดกลม มีผิวล้างตับ
ศรีบัฟเฟอร์ ( 25 มม. และ 25 มม.
อิมิดาโซลซูโครส , pH 7.2 [ Si ] ) และเก็บแช่แข็งในไนโตรเจนเหลว
นำตับ ( PDF ) ถูกแช่แข็งที่อุณหภูมิ - 20 องศา ตับหนู และเตรียมไมโครโซม
ออกไปตามที่อธิบายไว้โดย suttie et al . ( 9 )