CYP2A13, a human P450 enzyme prefer

CYP2A13, a human P450 enzyme preferentially expressed in the respiratory tract, is highly efficient in the metabolic activation of tobacco-specific nitrosamines. The aim of this study was to test the hypothesis that inflammation suppresses CYP2A13 expression in the lung, thus explaining the large interindividual differences in CYP2A13 levels previously found in human lung biopsy samples. We first demonstrated that the bacterial endotoxin lipopolysaccharide (LPS) and the proinflammatory cytokine IL-6 can suppress CYP2A13 messenger RNA (mRNA) expression in the NCI-H441 human lung cell line. We then report that an ip injection of LPS (1mg/kg), which induces systemic and lung inflammation, caused substantial reductions in CYP2A13 mRNA (~50%) and protein levels (~80%) in the lungs of a newly generated CYP2A13-humanized mouse model. We further identified two critical CYP2A13 promoter regions, one (major) between -484 and -1008bp and the other (minor) between -134 and -216bp, for the response to LPS, through reporter gene assays in H441 cells. The potential involvement of the nuclear factor NF-κB in LPS-induced CYP2A13 downregulation was suggested by identification of putative NF-κB binding sites within the LPS response regions and effects of an NF-κB inhibitor (pyrrolidine dithiocarbamate) on CYP2A13 expression in H441 cells. Results from gel shift assays further confirmed binding of NF-κB-like nuclear proteins of H441 cells to the major LPS response region of the CYP2A13 promoter. Thus, our findings strongly support the hypothesis that CYP2A13 levels in human lung can be suppressed by inflammation associated with disease status in tissue donors, causing underestimation of CYP2A13 levels in healthy lung.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

CYP2A13 เอนไซม์ P450 มนุษย์ที่แสดงโน้ตในทางเดินหายใจ มีประสิทธิภาพสูงในการเรียกใช้เฉพาะยาสูบ nitrosamines เผาผลาญได้ จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ ทดสอบสมมติฐานที่ว่า อักเสบไม่ใส่นิพจน์ CYP2A13 ปอด อธิบายความแตกต่าง interindividual ขนาดใหญ่ในระดับ CYP2A13 ที่พบก่อนหน้านี้ ในตัวอย่างตรวจชิ้นเนื้อปอดมนุษย์ดังนั้น เราต้องแสดงว่า lipopolysaccharide endotoxin ของแบคทีเรีย (LPS) และอย่างไร cytokine proinflammatory IL-6 สามารถระงับ CYP2A13 เอ็มอาร์เอ็นเอ (mRNA) นิพจน์ในรายการเซลล์ปอดมนุษย์ NCI-H441 เรานั้นรายงานว่า ฉีด ip LPS (1mg/kg), ซึ่งก่อให้เกิดระบบและปอดอักเสบ เกิดลดพบ mRNA CYP2A13 (~ 50%) และระดับโปรตีน (~ 80%) ในปอดแบบเมาส์ CYP2A13 humanized สร้างขึ้นใหม่ เราเพิ่มเติมระบุสองสำคัญ CYP2A13 โปรโมเตอร์ภูมิภาค หนึ่ง (ใหญ่) ระหว่าง-484 - 1008bp และอื่น ๆ (ผู้เยาว์) ระหว่าง-134 - 216bp สำหรับการตอบสนองต่อ LPS ผ่านโปรแกรมรายงาน assays ยีนในเซลล์ H441 มีส่วนร่วมเป็นปัจจัยนิวเคลียร์ NF κB ใน downregulation เกิด LPS CYP2A13 เขาแนะนำรหัสของ putative NF κB รวมไซต์ภายในภูมิภาคตอบรับ LPS และผลของสารยับยั้ง NF κB (pyrrolidine dithiocarbamate) CYP2A13 นิพจน์ในเซลล์ H441 ผลจากเจกะ assays เพิ่มเติมยืนยันรวม NF κB เหมือนนิวเคลียร์โปรตีนของเซลล์หลัก LPS ตอบภูมิภาคของโปรโมเตอร์ CYP2A13 H441 ดังนั้น ผลการวิจัยของเราขอสนับสนุนสมมติฐานที่ว่า ระดับ CYP2A13 ในปอดมนุษย์สามารถปราบพยศ โดยเชื่อมโยงกับสถานะโรคใน underestimation ผู้บริจาค ทำให้เนื้อเยื่อของระดับ CYP2A13 ในสุขภาพปอดอักเสบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

CYP2A13, เอนไซม์ P450 มนุษย์แสดงตัวในทางเดินหายใจที่มีประสิทธิภาพสูงในการเปิดใช้งานการเผาผลาญของไนโตรซายาสูบที่เฉพาะเจาะจง จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อทดสอบสมมติฐานว่าการอักเสบยับยั้งการแสดงออก CYP2A13 ในปอดจึงอธิบายความแตกต่าง interindividual ขนาดใหญ่ใน CYP2A13 ระดับก่อนหน้านี้พบในตัวอย่างเนื้อเยื่อปอดของมนุษย์ ครั้งแรกที่เราแสดงให้เห็นว่าสารพิษของเชื้อแบคทีเรีย lipopolysaccharide (LPS) และไซโตไคน์ proinflammatory IL-6 สามารถระงับสาร rna CYP2A13 (mRNA) การแสดงออกใน NCI-H441 ปอดของมนุษย์สายพันธุ์ของเซลล์ จากนั้นเราจะแจ้งให้ทราบว่าการฉีดไอพีของ LPS (1 มก / กก.) ซึ่งก่อให้เกิดการอักเสบของระบบและปอดที่เกิดจากการลดลงอย่างมากใน CYP2A13 mRNA (~ 50%) และระดับโปรตีน (~ 80%) ในปอดของที่สร้างขึ้นใหม่ CYP2A13- รูปแบบเมาส์ humanized เราระบุอีกสองภูมิภาคก่อการ CYP2A13 สำคัญหนึ่ง (หลัก) ระหว่าง -484 และ -1008bp และอื่น ๆ (น้อย) ระหว่าง -134 และ -216bp สำหรับการตอบสนองต่อ LPS ผ่านการตรวจยีนในเซลล์นักข่าว H441 การมีส่วนร่วมที่มีศักยภาพของปัจจัยนิวเคลียร์ NF-κBใน downregulation CYP2A13 LPS ที่เกิดขึ้นได้รับการแนะนำโดยระบุสมมุติ NF-κBเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันในการตอบสนอง LPS ภูมิภาคและผลกระทบของสารยับยั้ง NF-κB (pyrrolidine dithiocarbamate) ในการแสดงออกในเซลล์ CYP2A13 H441 . ผลลัพธ์ที่ได้จากการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงเจลต่อไปยืนยันผูกพันของ NF-κBเหมือนโปรตีนนิวเคลียร์ของเซลล์ H441 เพื่อตอบสนอง LPS ภูมิภาคท​​ี่สำคัญของการก่อการ CYP2A13 ดังนั้นผลการวิจัยของเราขอสนับสนุนสมมติฐานที่ว่าระดับ CYP2A13 ในปอดของมนุษย์สามารถเก็บกดจากการอักเสบที่เกี่ยวข้องกับสถานะของโรคในผู้บริจาคเนื้อเยื่อทำให้เบาของระดับ CYP2A13 ในปอดที่มีสุขภาพดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

cyp2a13 มนุษย์พีเอนไซม์ preferentially แสดงออกทางระบบทางเดินหายใจ มีประสิทธิภาพสูงในการกระตุ้นการเผาผลาญของไนโตรซามีนเฉพาะยาสูบ จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ เพื่อทดสอบสมมติฐานว่า การอักเสบยับยั้งการแสดงออก cyp2a13 ในปอดจึงอธิบายถึงความแตกต่าง interindividual ขนาดใหญ่ในระดับ cyp2a13 ก่อนหน้านี้พบในตัวอย่างชิ้นเนื้อปอดมนุษย์ครั้งแรกที่เราพบว่าสีดำเข้มชีวพิษภายในตัวแบคทีเรีย ( หล่อลื่น ) และสร้างไซโตไคน์ proinflammatory สามารถระงับ cyp2a13 เอ็มอาร์เอ็นเอ ( mRNA ) การแสดงออกใน nci-h441 เซลล์ปอดมนุษย์เส้น เราก็รายงานว่า ไอพี ฉีดสเปรย์ ( 1mg / kg ) ซึ่งก่อให้เกิดระบบและปอดอักเสบทำให้ลดลงอย่างมากใน cyp2a13 mRNA ( ~ 50 % ) และระดับโปรตีน ( ~ 80 % ) ในปอดของมนุษย์สร้างขึ้นใหม่ cyp2a13 รูปแบบเมาส์ เรายังระบุการวิจารณ์ cyp2a13 สองภูมิภาคหนึ่ง ( เอก ) ระหว่าง - แล้ว - 1008bp และอื่น ๆ ( น้อย ) ระหว่าง - และ - 216bp สำหรับการหล่อลื่น ผ่านผู้สื่อข่าวพบ h441 ยีนในเซลล์การมีส่วนร่วมของศักยภาพของนิวเคลียร์ NF - κ B สเปรย์ปัจจัยชักนำ cyp2a13 downregulation เป็นข้อเสนอแนะโดยรหัสของกรดอะมิโน NF - κ B ผูกเว็บไซต์ภายในหล่อลื่นตอบสนองภูมิภาคและผลของ NF - κ B inhibitor ( ไพโรพังครืน ) cyp2a13 h441 การแสดงออกในเซลล์ผลตรวจยืนยันเพิ่มเติมผูกกะเจลของ NF - κ b-like นิวเคลียร์โปรตีนของเซลล์ h441 ใหญ่หล่อลื่นตอบสนองเขตของ cyp2a13 โปรโมเตอร์ ดังนั้นการค้นพบของเราขอสนับสนุนสมมติฐานที่ระดับ cyp2a13 ในปอดของมนุษย์สามารถยับยั้งการอักเสบที่เกี่ยวข้องกับภาวะโรคในผู้บริจาคเนื้อเยื่อ ทำให้เกิดการการประเมินค่าต่ำไประดับ cyp2a13
ในปอดแข็งแรง