Anthers’ responses to eight differe

Anthers’ responses to eight different induction media varied (Table 1). In general, baby primrose had a callus induction rate below 5%. The induction rate was also significantly affected by BAP and 2,4-D concentrations in the media, with Duncan's multiple-range test (P < 0.05) indicating that supplementation with 1.0 mg/l BAP and 0.5 mg/l 2,4-D (I1) induced callus at a mean rate at least double (2.4 ± 1.04%) that seen in the other seven media. The BAP concentration also influenced the type of callus induced. The lower concentration of BAP generally induced green, granular and compact calli, while the higher concentration produced a much larger number of soft, watery, and friable calli.

3.3. Shoot differentiation

After 30 days of culture on nine types of shoot induction media, calli showed various responses depending on the doses of the two PGRs in the media (Table 2). In particular, adventitious buds were observed only on shoot induction medium with 0.2 mg/l BAP and 0.01 mg/l NAA (D2). A total of 32 calli of 58 differentiated to produce adventitious buds, with a shoot regeneration rate of 55.2%. The buds grew and produced leaves within one month of transfer from the callus induction medium, originating from green calli that differentiated into shoots via vigorous budding and elongation ( Fig. 2F). On the same medium, yellowish-white calli differentiated into shoots or roots with clear hyperhydricity symptoms ( Fig. 2G), while reddish-yellow calli remained mostly undifferentiated, turning brown and dying one month later ( Fig. 2H). In contrast, calli grown on medium D6, D7, D8, produced no shoots. Instead, roots were often found ( Fig. 2I), although these calli turned brown and died one month later ( Fig. 2J). Calli grown on media D1, D3, D4, D5 and D9, turned brown and died over a longer time period than other calli.

3.4. Rooting of the regenerated plants and transplantation

Regenerated shoots were excised and transferred for rooting on four different media. After one week of culture, roots were observed on plantlets in all media. However, the pattern of the roots, rooting rate, and survival rate differed on each medium (Table 3). On PGR free MS medium (R1), the rooting rate was highest (98.0%) and the roots were long and extensive (Fig. 2K), making them suitable for transplanting two weeks later. Among the plantlets transferred from R1, 98.0% survived hardening off and grew well. With increases in IBA concentration, rooting rates declined, and roots became shorter and thicker. At the highest rate of IBA supplementation (0.2 mg/l IBA, in R4), most roots were shorter than 1 cm (Fig. 2K), and the rooting rate was 86.0%. Moreover, the transplantation survival rate for these plantlets was 62.0%, significantly lower than those grown on R1. The strong, thick root tips from plantlets grown on R4 were suitable for cytological analyses. Overall, the most appropriate rooting medium of P. forbesii anther culture was MS medium without any PGR supplements.

3.5. Determination of ploidy level in regenerated primrose

3.5.1. Morphological observation

Phenotypes of regenerated plants were observed visually, and many differences in plant size, leaf color, epidermal hairs, and roots were found among the plants (Fig. 3A–F). Plants identified as haploid through flow cytometry and cytological analysis appeared very weak, with thin leaves, small size, and poor growth. In contrast, polyploid plants showed clear, vigorous growth.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตอบเหมือนแปดสื่อเหนี่ยวนำที่แตกต่างกันแตกต่างกัน (ตารางที่ 1) ทั่วไป primrose ทารกมีอัตราการเหนี่ยวนำให้ต่ำกว่า 5% อัตราการเหนี่ยวนำได้จะได้รับผลกระทบโดย BAP ความเข้มข้น 2, 4-D สื่อ ด้วยการทดสอบหลายช่วงของดันแคน (P < 0.05) แสดงว่า แห้งเสริมกับ 1.0 mg/l BAP 0.5 mg/l 2, 4-D (I1) ทำให้เกิดแคลลัสในอัตราเฉลี่ยน้อยคู่ (2.4 ± 1.04%) ที่เห็นในสื่ออื่น ๆ 7 BAP ความเข้มข้นยังมีอิทธิพลต่อชนิดของแคลลัสที่เกิดจาก ความเข้มข้นต่ำของ BAP เกิด calli เขียว granular และกระทัดรัด โดยทั่วไปในขณะที่ความเข้มข้นสูงผลิตมากขนาดใหญ่จำนวน calli อ่อน น้ำ และ friable3.3 การยิงสร้างความแตกต่างAfter 30 days of culture on nine types of shoot induction media, calli showed various responses depending on the doses of the two PGRs in the media (Table 2). In particular, adventitious buds were observed only on shoot induction medium with 0.2 mg/l BAP and 0.01 mg/l NAA (D2). A total of 32 calli of 58 differentiated to produce adventitious buds, with a shoot regeneration rate of 55.2%. The buds grew and produced leaves within one month of transfer from the callus induction medium, originating from green calli that differentiated into shoots via vigorous budding and elongation ( Fig. 2F). On the same medium, yellowish-white calli differentiated into shoots or roots with clear hyperhydricity symptoms ( Fig. 2G), while reddish-yellow calli remained mostly undifferentiated, turning brown and dying one month later ( Fig. 2H). In contrast, calli grown on medium D6, D7, D8, produced no shoots. Instead, roots were often found ( Fig. 2I), although these calli turned brown and died one month later ( Fig. 2J). Calli grown on media D1, D3, D4, D5 and D9, turned brown and died over a longer time period than other calli.3.4. Rooting of the regenerated plants and transplantationRegenerated shoots were excised and transferred for rooting on four different media. After one week of culture, roots were observed on plantlets in all media. However, the pattern of the roots, rooting rate, and survival rate differed on each medium (Table 3). On PGR free MS medium (R1), the rooting rate was highest (98.0%) and the roots were long and extensive (Fig. 2K), making them suitable for transplanting two weeks later. Among the plantlets transferred from R1, 98.0% survived hardening off and grew well. With increases in IBA concentration, rooting rates declined, and roots became shorter and thicker. At the highest rate of IBA supplementation (0.2 mg/l IBA, in R4), most roots were shorter than 1 cm (Fig. 2K), and the rooting rate was 86.0%. Moreover, the transplantation survival rate for these plantlets was 62.0%, significantly lower than those grown on R1. The strong, thick root tips from plantlets grown on R4 were suitable for cytological analyses. Overall, the most appropriate rooting medium of P. forbesii anther culture was MS medium without any PGR supplements.
3.5. Determination of ploidy level in regenerated primrose

3.5.1. Morphological observation

Phenotypes of regenerated plants were observed visually, and many differences in plant size, leaf color, epidermal hairs, and roots were found among the plants (Fig. 3A–F). Plants identified as haploid through flow cytometry and cytological analysis appeared very weak, with thin leaves, small size, and poor growth. In contrast, polyploid plants showed clear, vigorous growth.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตอบสนองของอับเรณู 'แปดสื่อเหนี่ยวนำที่แตกต่างกันที่แตกต่างกัน (ตารางที่ 1) โดยทั่วไปสีเหลืองอ่อนทารกมีอัตราการเหนี่ยวนำแคลลัสต่ำกว่า 5% อัตราการเหนี่ยวนำก็ยังได้รับผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญโดย BAP และความเข้มข้นของ 2,4-D ในสื่อที่มีดันแคนทดสอบหลายช่วง (P <0.05) แสดงให้เห็นว่ามีการเสริม 1.0 mg / l BAP และ 0.5 mg / l 2,4-D (I1) การชักนำให้เกิดแคลลัสในอัตราเฉลี่ยอย่างน้อยสองครั้ง (2.4 ± 1.04%) ที่เห็นในสื่ออื่น ๆ ที่เจ็ด ความเข้มข้นของ BAP ยังได้รับอิทธิพลชนิดของแคลลัสเกิด ความเข้มข้นที่ต่ำกว่าของ BAP เหนี่ยวนำให้เกิดเม็ดสีเขียวทั่วไปและแคลลัสที่มีขนาดกะทัดรัดในขณะที่ความเข้มข้นสูงผลิตเป็นจำนวนมากมีขนาดใหญ่นุ่มน้ำและเปราะแคลลัส. 3.3 ยิงแตกต่างหลังจาก 30 วันของวัฒนธรรมในเก้าชนิดของการถ่ายสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสแสดงให้เห็นว่าการตอบสนองต่างๆขึ้นอยู่กับปริมาณของทั้งสอง PGRs ในสื่อ (ตารางที่ 2) โดยเฉพาะอย่างยิ่งตาบังเอิญพบเฉพาะบนสื่อเหนี่ยวนำยิงกับ 0.2 mg / l BAP และ 0.01 มิลลิกรัม / ลิตร NAA (D2) รวม 32 แคลลัสจาก 58 ความแตกต่างในการผลิตตาบังเอิญมีอัตราการงอกใหม่ของการถ่ายภาพ 55.2% ตาเติบโตและผลิตใบภายในหนึ่งเดือนของการถ่ายโอนจากสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสที่เกิดจากแคลลัสสีเขียวที่แตกต่างออกเป็นใบผ่านทางรุ่นแข็งแรงและการยืดตัว (รูป. 2F) ในสื่อเดียวกันแคลลัสสีเหลืองสีขาวแตกต่างออกเป็นหน่อหรือรากที่มีอาการ hyperhydricity ชัดเจน (รูป. 2G) ในขณะที่แคลลัสสีแดงสีเหลืองยังคงแตกต่างส่วนใหญ่เปลี่ยนเป็นสีน้ำตาลและตายหนึ่งเดือนต่อมา (รูป. 2H) ในทางตรงกันข้ามแคลลัสที่ปลูกใน D6 กลาง D7, D8 ผลิตหน่อไม่มี แต่รากมักจะพบว่ามี (รูป. 2I) แม้ว่าแคลลัสเหล่านี้กลายเป็นสีน้ำตาลและเสียชีวิตหนึ่งเดือนต่อมา (รูป. 2J) แคลลัสที่ปลูกในสื่อ D1, D3, D4, D5 และ D9 หันสีน้ำตาลและเสียชีวิตในช่วงเวลาที่นานกว่าที่อื่น ๆ แคลลัส. 3.4 รากของพืชอาศัยและปลูกหน่อสร้างใหม่ที่ถูกตัดและโอนสำหรับการขจัดสี่สื่อที่แตกต่างกัน หลังจากหนึ่งสัปดาห์ของวัฒนธรรมรากพบบนต้นในทุกสื่อ อย่างไรก็ตามรูปแบบของรากอัตราการขจัดและอัตราการรอดตายที่แตกต่างกันในแต่ละสื่อ (ตารางที่ 3) ใน PGR สูตร MS ฟรี (R1) อัตราการออกรากได้มากที่สุด (98.0%) และรากยาวและครอบคลุม (รูป. 2K) ทำให้พวกเขาเหมาะสำหรับปลูกสองสัปดาห์ต่อมา ท่ามกลางต้นกล้าที่ได้รับโอนจาก R1, 98.0% แข็งรอดชีวิตออกและขยายตัวดี ด้วยการเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของ IBA อัตราลดลงรากและรากกลายเป็นสั้นและหนา ในอัตราที่สูงที่สุดของการเสริม IBA (0.2 mg / l IBA ใน R4), รากมากที่สุดคือสั้นกว่า 1 ซม. (รูป. 2K) และอัตราการทำลายเป็น 86.0% นอกจากนี้ยังมีอัตราการรอดตายสำหรับการปลูกต้นกล้าเหล่านี้เป็น 62.0% อย่างมีนัยสำคัญต่ำกว่าที่ปลูกใน R1 แข็งแรงและเคล็ดลับหนารากจากต้นกล้าที่ปลูกใน R4 มีความเหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์เซลล์วิทยา โดยรวมแล้วการขจัดสื่อที่เหมาะสมที่สุดของพี forbesii วัฒนธรรมดอกไม้เป็นสูตร MS โดยไม่ต้องมีอาหารเสริม PGR. 3.5 การกำหนดระดับ ploidy ในสีเหลืองอ่อนอาศัย3.5.1 สังเกตทางสัณฐานวิทยาฟีโนไทป์ของพืชอาศัยถูกตั้งข้อสังเกตสายตาและความแตกต่างมากมายในโรงงานขนาด, สีใบขนผิวหนังและรากถูกพบในพืช (รูป. 3A-F) ระบุว่าเป็นพืชเดี่ยวผ่านโฟและการวิเคราะห์เซลล์วิทยาปรากฏอ่อนแอมากที่มีใบบาง ๆ ขนาดเล็กและการเจริญเติบโตที่น่าสงสาร ในทางตรงกันข้ามพืช polyploid แสดงให้เห็นชัดเจนเจริญเติบโตแข็งแรง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เรณู ' การตอบสนองต่อสื่อแตกต่างกันที่แตกต่างกัน ( ตารางที่ 8 การ 1 ) โดยทั่วไปทารก พริมโรส มีแคลลัสให้เกิดอัตราต่ำกว่า 5 % การเท่ากันก็มีผลอย่างมาก และ 2 , 4-D BAP ความเข้มข้นในสื่อกับ Duncan ' s Multiple Range Test ( P < 0.05 ) แสดงว่าลง 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร BAP 0.5 มก. / ล. 24-D ( i0 ) ชักนำให้เกิดแคลลัสในหมายถึงคะแนนอย่างน้อยสองครั้ง ( 2.4 ± 1.04 % ) ที่เห็นในสื่ออื่น ๆ 7 . และ BAP ความเข้มข้นยังมีผลต่อชนิดของนำแคลลัส . การลดความเข้มข้นของ BAP มักเกิดแคลลัสสีเขียว , เม็ดและขนาดเล็กในขณะที่ความเข้มข้นผลิตจํานวนมาก นุ่ม ชุ่ม และเปราะสูตร

3 . ยิงความแตกต่าง

หลังจาก 30 วันของวัฒนธรรมในเก้าประเภทของการชักนำแคลลัส พบการยิง สื่อต่าง ๆ ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับขนาดของทั้งสองในสื่อ ( ตารางที่ 2 ) โดยเฉพาะตา พบว่ามีเพียงการ adventitious ยิงกลาง 0.2 มิลลิกรัมต่อลิตร NAA และ BAP 0.01 mg / l ( D2 ) จำนวน 32 เปอร์เซ็นต์ของ 58 ที่แตกต่างเพื่อผลิตปากดีตาด้วยการยิงในอัตรา 200 บาทตาโต และผลิตใบภายในหนึ่งเดือนของการถ่ายโอนจาก callus induction medium , ที่มาจากแคลลัสสีเขียวที่แตกต่างออกเป็นยิงผ่านแข็งแรงรุ่นและการยืดตัว ( รูปห้อง 2F ) ในตัวกลางเดียวกัน สีขาวแกมเหลือง แคลลัสแตกต่างออกเป็นหน่อหรือรากกับอาการ hyperhydricity ชัดเจน ( ภาพที่ 2 กรัม ) ในขณะที่เนื้อเยื่อสีเหลืองสีแดงยังคงเป็น undifferentiatedการเปลี่ยน น้ำตาล และ ตาย หนึ่งเดือนต่อมา ( รูปที่ 2H ) ในทางตรงกันข้าม , แคลลัสที่ปลูกบนแอร์เอเชียเอ็กซ์ d8 D6 , กลาง , ที่ไม่ยิง แทน รากมักจะพบ ( รูปที่ 2i ) แม้ว่าเหล่านี้สูตรเปลี่ยนเป็นสีน้ำตาลและเสียชีวิต หนึ่งเดือนต่อมา ( รูปที่ 2j ) แคลลัสพัฒนาสื่อ D1 D3 , D4 , D5 , D9 และ กลายเป็นสีน้ำตาลและเสียชีวิตไปนานกว่าระยะเวลากว่าสูตรอื่น ๆ .

3.4 .รากของต้นข้าว และปลูก

ได้ยอดตัดและย้ายเพื่อขจัดสี่สื่อต่าง ๆ หลังจากหนึ่งสัปดาห์วัฒนธรรมรากพบบนต้นในสื่อทั้งหมด อย่างไรก็ตาม รูปแบบของราก ราก อัตรา และอัตราการรอดตายแตกต่างในแต่ละสื่อ ( ตารางที่ 3 ) ใน pgr ฟรี MS ( R1 ) , ที่มีคะแนนสูงสุด ( 980 % ) และมีรากยาว และกว้างขวาง ( ภาพที่ 2 ) ทำให้พวกเขาเหมาะสำหรับปลูกสองสัปดาห์ต่อมา ท่ามกลางยอดโอนจาก R1 , 98.0 % รอดแข็งและเติบโตได้ดี ด้วยการเพิ่มใน IBA ความเข้มข้นที่มีอัตราลดลง และรากก็สั้น และหนาขึ้น ในอัตราสูงสุดของ IBA ( IBA ) 0.2 มก. / ล. , R4 ) , รากมากที่สุด คือ น้อยกว่า 1 ซม. ( ฟิค2K ) และอัตราการขจัด 86.0 % นอกจากนี้ อัตราการปลูกให้ต้นเหล่านี้คือ 1 ซึ่งน้อยกว่าผู้ป่วยที่ปลูกบน R1 . แข็งแรง , หนารากจากต้นที่ปลูกบน R4 มีเคล็ดลับที่เหมาะสำหรับการวิเคราะห์สามารถ . โดยรวมแล้ว เหมาะสมที่สุด เชียร์กลางของวัฒนธรรม ( หน้า forbesii เป็น MS ที่ไม่มี pgr อาหารเสริม

3 .การกำหนดระดับในการสร้างใหม่พริมโรส

ที่สำคัญ . ลักษณะสังเกต

ฟีโนไทป์ของต้นข้าวได้มองเห็นและหลายขนาดต่างกัน พืชใบสีเส้นผมตรง และราก พบในพืช ( รูปที่ 3A ( F ) พืชที่ระบุว่าเป็นแฮพลอยด์ และการวิเคราะห์สามารถไหลผ่าน ( ปรากฏอ่อนแอมาก กับใบ บางขนาดเล็กและการเจริญเติบโตไม่ดี ในทางตรงกันข้าม , พืชในสพบการเจริญเติบโตแข็งแรงชัดเจน .