From October 2013 to March 2014, we

From October 2013 to March 2014, we collected 1,067 samples from 885 patients presenting with Zika fever symptoms for
ZIKV RNA detection: blood samples for 748, saliva samples for 319 and both samples collected at the same time for 182 patients. A standardized medical questionnaire form was available for most of the patients, numbers of days from the first reported symptom (days from symptoms onset) and main symptoms were recorded. Numbers of days post illness onset was the number of days after symptoms onset. Blood samples were collected from venous blood puncture and saliva samples with dry cotton swabs without transport media (N◦ 150C, Copan, Brescia, Italy). Molecular detection of ZIKV in saliva was performed after RNA extraction using the NucliSENS® easyMAG® System (BioMérieux) according to manufacturer’s recommendations. Briefly, 200l of serum was directly added to 2ml of lysis buffer; oral swabs were
first vortexed in 2ml of lysis buffer, both were eluted by 50l of elution buffer and 5l of extracted RNA was used for amplification on a CFX96 TouchTM real-time PCR detection system (Biorad) using two real-time primers/probe amplification sets specific for ZIKV [5,9]. Results were reported as positive when the 2 amplifications occurred. The 182 patients with both samples collected tested negative for DENV using a multiplex DENV RT-PCR protocol as previously described [10]. Statistical analyses were performed by using GraphPad Prism 6.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จาก 2013 ตุลาคมถึง 2014 มีนาคม เรารวบรวมตัวอย่าง 1,067 จาก 885 ผู้ป่วยที่ มีอาการไข้ปลูกสำหรับการนำเสนอการตรวจหาอาร์เอ็นเอ ZIKV: รวบรวมตัวอย่างเลือดตัวอย่างน้ำลาย 748, 319 และทั้งสองตัวอย่างในเวลาเดียวกันสำหรับผู้ป่วย 182 มีแบบฟอร์มสอบถามแพทย์ที่ได้มาตรฐานสำหรับส่วนมากของผู้ป่วย จำนวนวันจากรายงานอาการแรก (วันจากเริ่มมีอาการอาการ) และมีบันทึกอาการหลัก จำนวนวันหลังจากเริ่มมีอาการอาการตัวเลขของวันที่เริ่มมีอาการเจ็บป่วยลงได้ ตัวอย่างเลือดที่เก็บจากตัวอย่างเลือดดำเจาะและน้ำลายกับฝ้ายที่แห้งโดยไม่ต้องขนส่งสื่อ (N◦ 150C โกปาน เบรชชา อิตาลี) ทำการตรวจจับโมเลกุลของ ZIKV ในน้ำลายหลังจากสกัด RNA โดยใช้ NucliSENS® easyMAG ® ระบบ (BioMérieux) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต สั้น ๆ 200 ลิตรของซีรั่มตรงถูก lysis บัฟเฟอร์ 2 มิลลิลิตร ถูกปากสวับvortexed แรกใน 2 มล. lysis บัฟเฟอร์ ทั้งถูก eluted โดยของบัฟเฟอร์ชะ 50 ลิตร และ 5 ลิตรของ RNA แยกใช้สำหรับขยายบน TouchTM CFX96 เป็นระบบเรียลไทม์ PCR ตรวจหา (Biorad) โดยใช้ไพรเมอร์และโพรบวัดที่แบบเรียลไทม์สองขยายการตั้งค่าเฉพาะสำหรับ ZIKV [5,9] มีรายงานผลเป็นบวกเมื่อเกิด 2 amplifications ผู้ป่วย 182 ตัวอย่างทั้งสองรวบรวมทดสอบค่าลบสำหรับ DENV ใช้โพรโทคอ DENV RT-PCR มัลติเพล็กซ์ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] ดำเนินการวิเคราะห์ทางสถิติ โดยใช้ GraphPad ปริซึม 6

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตั้งแต่เดือนตุลาคม 2013 ถึงมีนาคม 2014 เรารวบรวม 1,067 ตัวอย่างจากผู้ป่วย 885 นำเสนอที่มีอาการไข้ Zika สำหรับ
ZIKV RNA การตรวจสอบ: ตัวอย่างเลือดสำหรับ 748 ตัวอย่างน้ำลายสำหรับ 319 และทั้งสองตัวอย่างที่เก็บรวบรวมได้ในเวลาเดียวกันสำหรับผู้ป่วย 182 รูปแบบแบบสอบถามทางการแพทย์ที่ได้มาตรฐานพร้อมใช้งานสำหรับผู้ป่วยส่วนใหญ่ตัวเลขของวันนับจากอาการรายงานแรก (วันนับจากวันที่เริ่มมีอาการอาการ) และอาการหลักที่ถูกบันทึกไว้ ตัวเลขของวันที่เริ่มมีอาการเจ็บป่วยที่โพสต์เป็นจำนวนวันหลังจากที่อาการเริ่มมีอาการ เก็บตัวอย่างเลือดจากการเจาะและน้ำลายเลือดดำกับตัวอย่าง swabs ผ้าแห้งโดยไม่ต้องสื่อการขนส่ง (N◦ 150C, Copan, เบรสชา, อิตาลี) การตรวจจับกับโมเลกุลของ ZIKV ในน้ำลายได้รับการดำเนินการหลังจากการสกัด RNA ใช้ระบบeasyMAG®NucliSENS® (BIOMERIEUX) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ? สั้น ๆ , 200 L ของซีรั่มที่ถูกเพิ่มโดยตรงกับ 2ml ของบัฟเฟอร์สลาย; swabs ในช่องปากเท่ากับ
การ vortex แรกใน 2ml ของบัฟเฟอร์สลายทั้งสองถูกชะลง 50? L ของบัฟเฟอร์ชะและ 5? L ของ RNA สกัดถูกนำมาใช้สำหรับการขยายในเวลาจริงระบบการตรวจ PCR CFX96 TouchTM (Biorad) โดยใช้ทั้งสองแบบ real-time ไพรเมอร์ / สอบสวนขยายชุดที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ ZIKV [5,9] ผลที่ได้รับรายงานเป็นบวกเมื่อ 2 เครื่องขยายเสียงที่เกิดขึ้น ผู้ป่วย 182 ห้องพร้อมด้วยตัวอย่างทั้งเก็บการทดสอบเชิงลบสำหรับ DENV ใช้ multiplex DENV RT-PCR โปรโตคอลตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] การวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยใช้ปริซึม GraphPad 6