Total RNA was extracted according t

Total RNA was extracted according to the method of Chomczynski and Sacchi using Trizol Reagent (Invitrogen Co., Carlsbad,
CA, USA)[20]. The extracted RNA was then treated with RNasefree DNase I (TaKaRa, Shuzo, Kyoto, Japan). RNA concentrations
were estimated by Nanodrop spectrophotometry at 260 nm and
their purities were checked by determining the absorption ratios
at 260/280 nm. The quality of extracted RNA was assessed by
electrophoresis at 1% agarose-gel containing Ethidium Bromide.
First-strand cDNA was synthesized from 100 ng of total RNA using
an oligo (dT) primer, random hexamers and a commercially available kit (AccuPower
®
RocketScriptTM
RT PreMix) according to
manufacturer’s instructions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกตามวิธีการของ Chomczynski และ Sacchi ใช้ Trizol รีเอเจนต์ (Invitrogen Co. ลสแบCA, USA) [20] อาร์เอ็นเอที่แยกได้แล้วรับ RNasefree DNase ฉัน (TaKaRa, Shuzo เกียวโต ญี่ปุ่น) ความเข้มข้นของอาร์เอ็นเอประเมิน โดย Nanodrop spectrophotometry ที่ 260 nm และpurities ผู้ถูกตรวจสอบ โดยกำหนดอัตราการดูดซึมที่ 260/280 nm มีประเมินคุณภาพของอาร์เอ็นเอที่แยกโดยelectrophoresis ในโบรไมด์ Ethidium มี 1% agarose เจลมีสังเคราะห์ cDNA สแตรนด์แรก 100 ng ใช้อาร์เอ็นเอทั้งหมดการรองพื้น oligo (dT) hexamers สุ่ม และชุดใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ (AccuPower®RocketScriptTMRT PreMix) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รวม RNA ถูกสกัดตามวิธีการของ Chomczynski และ Sacchi ใช้ Trizol Reagent (Invitrogen Co. , คาร์ลส,
CA, USA) [20] อาร์เอ็นเอที่สกัดได้รับการรักษาแล้วด้วย RNasefree DNase ฉัน (Takara, Shuzo เกียวโตญี่ปุ่น) ความเข้มข้นของอาร์เอ็นเอได้รับการประเมินโดย spectrophotometry Nanodrop ที่ 260 นาโนเมตรและ purities ของพวกเขาถูกตรวจสอบโดยการกำหนดอัตราส่วนการดูดซึมที่260/280 นาโนเมตร คุณภาพของ RNA ที่สกัดที่ได้รับการประเมินโดยอิเลคที่1% agarose เจลที่มี Ethidium Bromide. cDNA แรกเส้นใยสังเคราะห์จาก 100 นาโนกรัมของอาร์เอ็นเอรวมใช้Oligo (การ dT) ไพรเมอร์, hexamers สุ่มและชุดใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ (AccuPower ® RocketScriptTM RT พรีมิกซ์) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดตามวิธีการและการกระทำ chomczynski sacchi trizol ( Invitrogen Co . , ฮุสตัน
CA , USA ) [ 20 ] สกัด RNA ก็ถือว่า rnasefree ตรวจหา ADNase ( ทาคาระชูโซะ , , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) RNA โดยวิธีประมาณ 10
nanodrop ที่ 260 นาโนเมตร และความบริสุทธิ์ของพวกเขาถูกตรวจสอบโดย

กำหนดอัตราส่วนการดูดซึมที่ 260 / 280 nm .คุณภาพสกัด RNA ถูกประเมิน โดยวิธีที่ 1
% เจลที่มีทิเดียมโบรไมด์ .
ก่อนเกลียวดีเอ็นเอสังเคราะห์จาก 100 ng ของอาร์เอ็นเอทั้งหมดใช้
เป็นโอลิโก ( DT ) ไพรเมอร์ hexamers สุ่มและชุดพร้อมใช้งานในเชิงพาณิชย์ ( accupower


® rocketscripttm RT ใช้

) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต