Sterile explants were placed on aga

Sterile explants were placed on agar-solidified MT medium (Murashige and Tucker, 1969) supplemented with 2.2 mg/L N6-benzyladenine, 1 mg/L indole-3- butyric acid and 3% sucrose. The pH was adjusted to 5.8 prior to autoclaving at 121ºC for 15 min. All explants were maintained at a temperature 24±2ºC under 16 h photopriod with light intensity of 3,000 lux.Plantlets were subcultured to fresh medium at intervals
of 4 to 8 weeks for 10 months dividing the shoots into 1-cm-long segments.
WBDL phytoplasma was detected using polymerase chain reaction (PCR). Total DNA was extracted from
leaves using cetyl trimethyl ammonium bromide
(CTAB) extraction method (Zhang et al., 1998). Two
primer pairs P3/P7 and P1/P7 were used to amplify
part of the 16S rRNA gene, the 16S–23S spacer region,
and a portion of the 5-end region of the 23S
rRNA gene from phytoplasmas.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Explants หมันวางอยู่บนอาหารแข็ง MT (Murashige และ Tucker, 1969) เสริม ด้วย 2.2 mg/L N6-benzyladenine, 1 mg/L อินโดล-3 - ซูโครสกรดบิวทีริกและ 3% ค่า pH เปลี่ยนไป 5.8 ก่อน autoclaving ที่ 121ºC 15 นาที ทั้งหมด explants ยังคงไว้ที่อุณหภูมิ 24±2ºC photopriod h 16 ภายใต้กับความเข้มแสงของ 3,000 ลักซ์ Plantlets ถูก subcultured สดปานกลางในช่วงเวลา4 ถึง 8 สัปดาห์ 10 เดือนหน่อการแบ่งเซ็กเมนต์ยาว 1 ซม.ตรวจพบ WBDL phytoplasma ใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากใบใช้ cetyl trimethyl แอมโมเนียโบรไมด์วิธีการสกัด (CTAB) (Zhang et al. 1998) สองใช้รองพื้นคู่ P3/P7 และ P1/P7 ขยายส่วนของยีน 16S rRNA ภูมิภาคแผ่นรอง 16S – 23Sและส่วนภูมิภาค 5 สิ้นสุดของการ 23Sยีนใน rRNA จาก phytoplasmas

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ชิ้นหมันถูกวางไว้บนวุ้นผลึกมอนแทนาปานกลาง (Murashige และ Tucker, 1969) เสริมด้วย 2.2 มิลลิกรัม / ลิตร N6-benzyladenine 1 มิลลิกรัม / ลิตร indole-3- butyric กรดและน้ำตาลซูโครส 3% ค่า pH ที่มีการปรับเป็น 5.8 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อที่121ºCนาน 15 นาที ชิ้นส่วนทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 24 ±2ºCอายุต่ำกว่า 16 ชั่วโมง photopriod กับความเข้มแสง 3,000 lux.Plantlets ถูกเลี้ยงกลางสดในช่วงเวลา
ของ 4-8 สัปดาห์ที่ผ่านมา 10 เดือนแบ่งหน่อออกเป็นกลุ่ม 1 ซม. ยาว.
WBDL phytoplasma ถูกตรวจพบโดยใช้วิธี Polymerase chain reaction (PCR) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจาก
ใบใช้ cetyl ไตรเมทิลแอมโมเนียมโบรไมด์
(CTAB) วิธีการสกัด (Zhang et al., 1998) สอง
ไพรเมอร์คู่ P3 / P7 และ P1 / P7 ถูกนำมาใช้เพื่อขยาย
ส่วนหนึ่งของยีน 16S rRNA ที่ 16S-23S spacer ภูมิภาค
และเป็นส่วนหนึ่งของภูมิภาค 5 จุดสิ้นสุดของ 23S
ยีน rRNA จากไฟโตพลาสมา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เติมสารฆ่าเชื้อไว้ให้วุ้นก้อนตันขนาดกลาง ( อาหารสูตร Murashige and Tucker , 1969 ) เสริมด้วย 2.2 mg / L n6 benzyladenine , 1 mg / l indole-3 กรด butyric และ ซูโครส 3 เปอร์เซ็นต์ . ที่ pH 5.8 ก่อนปรับอัตราส่วนโฟกัสที่ 121 องศาเซลเซียส นาน 15 นาที ºอาหารถูกเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 24 ± 2 º C ภายใต้ 16 H photopriod กับระดับความเข้มแสง 3 , 000 ลักซ์ ต้นเป็น subcultured กลางใหม่ เป็นระยะ ๆ4 ถึง 8 สัปดาห์สำหรับ 10 เดือน แบ่งเป็น 1-cm-long ยอดกลุ่มwbdl เชื้อไฟโตพลาสมาที่ถูกตรวจพบโดยใช้วิธีพีซีอาร์ ( PCR ) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากใบใช้ไตรซิทิลแอมโมเนียมโบรไมด์( ctab ) วิธีการสกัด ( Zhang et al . , 1998 ) สองไพรเมอร์คู่ P3 / p7 P1 / p7 และถูกใช้ในการขยายส่วนของ 16S rRNA ยีน 16S - 23s spacer , ภูมิภาคและส่วนของ 5-end ภูมิภาคของ 23srRNA ยีนจาก phytoplasmas .