2. Materials and methods
2.1. Bacterial strains and culture conditions
P. fluorescens L1A, L2A, L1B, L2B, L1C, I3B, I2B, Pseudomonas simiae I2A,Pseudomonas putida I1B, I2C, Pseudomonas viridiflava I1A, Pseudomonas jessenii I3A, I1C, P. chicorii I3C, Pseudomonas koreensis I4C strains, isolated from refrigerated ready-to-eat (RTE) curly endive (Chicorium endivia L. var. crispum Lam.) and head lettuce (Lactuca sativa L. var. capitata L.) trocadero type and identified as recently reported ( Baruzzi et al., submitted for publication), as well as Pseudomonas aeruginosaDSM939 were stored in the Institute of Sciences of Food Productions bacterial collection.P. fluorescens NCPPB 1964t the type strain of this species and Pseudomonas marginalisNCPPB 667, isolated from catalogna chicory (Cichorium intybus L.), come from the National Collection of Plant Pathogenic Bacteria and Pseudomonas syringae PS1 from Romain lettuce (L. sativa L. var. longifolia) were included in the microbial collection of the Department of Soil, Plant and Food Sciences (Bari, Italy). Strains were usually grown in 10 ml of mPlate Count Broth (mPCB, Becton Dickinson Italia, Milan, Italy), incubated for 24 h at 30 °C in mild stirring (90 rpm) conditions. These cultures were maintained on Plate Count Agar plates (PCA, Biolife, Milan, Italy) until their use in antimicrobial assay.
2.2. Production of NEW and measurement of chlorine concentration
Electrolyzed water was produced using the Eva System apparatus provided with Dimensionally Stable Anodes electrodes (De Nora Next, Milan, Italy) with NaCl and NaHCO3 as electrolyte at the concentration of 1 g/L or KCl solution (15 g/L) and from tap water without any inorganic salt added. Electrolyzed water was collected after 30, 60 and 120 min of electrolysis. Amperage between electrodes was fixed at 4A. For all experiments water was circulated through the electrolytic cell with a pump delivering a volumetric flow rate of 300 L/h/cell.
The free chlorine concentration (mg/l) was determined by N, N-diethyl-p phenylenediamine (DPD1) colorimetric method, using a digital chlorine kit (SWAN Chematest 20, Analytic Instrument, Switzerland). The measurement of pH and ORP was determined by a pH meter (Model pH50 Lab pH Meter XS-Instrument, Concordia, Italy).
In order to draw the curve of free chlorine concentration versus time, leaves of red chicory (Chicorium intybus L.), head lettuce trocadero type, iceberg lettuce and chard (Beta vulgaris L. var. cicla L.) were roughly cut and mixed together. A sample of this vegetable mixture (25 g) was dipped in 2 L of NEW (obtained by using KCl as electrolyte) diluted with autoclaved tap water to 300 ± 5 mg/L of free chlorine, measuring residual chlorine concentration, after 5, 30, 60, 90, 120 and 180 min, as described above.
2. วัสดุและวิธีการ2.1. แบคทีเรียสายพันธุ์และสภาพวัฒนธรรมP. fluorescens L1A, L2A, L1B, L2B, L1C, I3B, I2B, simiae ลี I2A, Pseudomonas putida I1B, I2C, Pseudomonas viridiflava I1A, Pseudomonas jessenii I3A, I1C, P. chicorii I3C, Pseudomonas koreensis สายพันธุ์ I4C แยกต่างหากจากตู้เย็นและพร้อมทาน (RTE) หยิก endive (Chicorium endivia L. เพียง crispum Lam.) และผักกาดหัว (Lactuca ซา L. เพียง capitata L.) ชนิดเอลลิงตัน และระบุเป็นรายงานล่าสุด (Baruzzi et al ส่งตีพิมพ์), เป็นลี aeruginosaDSM939 ถูกเก็บไว้ในสถาบันวิทยาศาสตร์ของการผลิตอาหารแบคทีเรียคอลเลกชัน P. fluorescens NCPPB 1964t ชนิดสายพันธุ์ของสายพันธุ์นี้และ Pseudomonas marginalisNCPPB 667 แยกต่างหากจาก chicory catalogna (Cichorium intybus L.), มาจาก syringae แห่งชาติคอลเลกชันของพืช Pathogenic แบคทีเรียและ Pseudomonas ที่ PS1 จากผักกาดหอมอย่างไร Romain (L. L. ซาเพียง longifolia) รวมอยู่ในการรวบรวมจุลินทรีย์กรมดิน พืช และ วิทยาศาสตร์การอาหาร (บารี อิตาลี) สายพันธุ์มักจะปลูกใน ml 10 ของ mPlate นับซุป (mPCB, Becton สันเลีย มิลาน อิตาลี), incubated ใน 24 ชมที่ 30 ° C ในอ่อนกวน (90 rpm) เงื่อนไข วัฒนธรรมเหล่านี้ถูกรักษาไว้บนแผ่นจานจำนวน Agar (PCA, Biolife มิลาน อิตาลี) จนถึงการใช้ในวิเคราะห์จุลินทรีย์2.2 การผลิตใหม่และการวัดความเข้มข้นของคลอรีนน้ำ electrolyzed ได้ผลิตด้วยเครื่องระบบ Eva ที่มีมิติมีเสถียรภาพ Anodes หุงต (โนราเดถัดไป มิลาน อิตาลี) NaCl และ NaHCO3 เป็นอิเล็กโทรที่ความเข้มข้น ของ 1 g/L หรือโซลูชัน KCl (15 g/L) และ จากน้ำประปาไม่ มีเกลืออนินทรีย์ใด ๆ เพิ่ม น้ำ electrolyzed รวบรวมจาก 30, 60 และ 120 นาทีของ electrolysis จำนวนแอมระหว่างหุงตถูกคงที่ 4A สำหรับการทดลองทั้งหมดที่น้ำถูกหมุนเวียนไปผ่านเซลล์ electrolytic ด้วยเครื่องสูบน้ำส่งอัตราไหล volumetric 300 L/h/เซลล์เข้มข้นของคลอรีนอิสระ (mg/l) ถูกกำหนด โดย N, N-diethyl-p phenylenediamine (DPD1) เหมือนวิธี ใช้ชุดดิจิตอลคลอรีน (หงส์ Chematest 20 เครื่องคู่ สวิตเซอร์แลนด์) วัดค่า pH และ ORP ที่ถูกกำหนด โดยเครื่องวัด pH (รุ่น pH50 Lab pH มิเตอร์ XS-อุปกรณ์ คอนคอร์เดีย อิตาลี)การวาดเส้นโค้งของความเข้มข้นของคลอรีนอิสระกับเวลา ใบ chicory สีแดง (Chicorium intybus L.), ชนิดเอลลิงตันผักกาดหัว ผักกาดหอมภูเขาน้ำแข็ง และ chard (Beta vulgaris L. เพียง cicla L.) ประมาณตัด และผสมกัน ตัวอย่างนี้ส่วนผสมผัก (25 กรัม) ถูกจุ่มลงในของใหม่ (ได้ โดยใช้ KCl เป็นอิเล็กโทร) 2 ลิตรผสมกับน้ำประปา autoclaved 300 ± 5 mg/L ของคลอรีนอิสระ วัดความเข้มข้นของคลอรีนที่ตกค้าง หลัง 5, 30, 60, 90, 120 และ 180 นาที ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น
การแปล กรุณารอสักครู่..

2. วัสดุและวิธีการ
2.1
สายพันธุ์แบคทีเรียและวัฒนธรรมเงื่อนไขพี fluorescens L1A, L2A, L1B, L2B, L1C, I3B, I2B, Pseudomonas simiae I2A, Pseudomonas putida I1B, I2C, Pseudomonas viridiflava I1A, Pseudomonas jessenii I3A, I1C พี chicorii I3C, Pseudomonas koreensis I4C สายพันธุ์ที่แยกได้จากตู้เย็น ready- รับประทาน (RTE) หยิกพืชชนิดหนึ่ง (Chicorium endivia ลิตร var. crispum ลำ.) และผักกาดหอมหัว (Lactuca sativa L. var. capitata L. ) ประเภท Trocadero และระบุว่าเป็นรายงานเมื่อเร็ว ๆ (Baruzzi et al., ส่งสำหรับการตีพิมพ์) เช่นเดียวกับ Pseudomonas aeruginosaDSM939 ถูกเก็บไว้ในสถาบันวิทยาศาสตร์ของโปรดักชั่นอาหารแบคทีเรีย collection.P fluorescens NCPPB 1964t สายพันธุ์ชนิดของสายพันธุ์นี้และ Pseudomonas marginalisNCPPB 667 ที่แยกได้จากสีน้ำเงิน Catalogna (Cichorium intybus L. ), มาจากคอลเลกชันแห่งชาติของพืชและแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรค Pseudomonas syringae PS1 จากผักกาดหอมโรเมน (แอล sativa L. var. longifolia ) ถูกรวมอยู่ในคอลเลกชันของจุลินทรีย์ของกรมดิน, พืชศาสตร์และอาหาร (บารี, อิตาลี) สายพันธุ์ที่มักจะเป็นคนที่ปลูกใน 10 มิลลิลิตร mPlate นับน้ำซุป (mPCB, Becton ดิกคินสันอิตาเลีย, มิลาน, อิตาลี), บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสในกวนอ่อน (90 รอบต่อนาที) เงื่อนไข วัฒนธรรมเหล่านี้ได้รับการดูแลในการนับจานแผ่นวุ้น (PCA, BioLife, มิลาน, อิตาลี) จนใช้ในการทดสอบยาต้านจุลชีพ.
2.2 การผลิตใหม่และการวัดความเข้มข้นของคลอรีนน้ำอิเล็กโทรไลได้รับการผลิตโดยใช้อุปกรณ์ระบบอีวาให้กับมิติเสถียรขั้ว Anodes (เดอร่าถัดไป, มิลาน, อิตาลี) กับโซเดียมคลอไรด์และ NaHCO3 เป็นอิเล็กโทรไลที่ความเข้มข้น 1 กรัม / ลิตรหรือสารละลายโพแทสเซียมคลอไรด์ (ที่ 15 กรัม / ลิตร) และจากน้ำประปาไม่มีเกลืออนินทรีใด ๆ เพิ่ม
โดยน้ำที่ถูกเก็บรวบรวมหลังจากที่ 30, 60 และ 120 นาทีของกระแสไฟฟ้า แอมแปร์ระหว่างขั้วไฟฟ้าคงที่ 4A สำหรับน้ำการทดลองถูกแพร่สะพัดไปทั่วเซลล์ไฟฟ้ากับปั๊มส่งมอบอัตราการไหลปริมาตร 300 ลิตร / ชั่วโมง / มือถือ.
ความเข้มข้นของคลอรีนอิสระ (mg / l) ถูกกำหนดโดย N, N-diethyl-P Phenylenediamine (DPD1) สี วิธีการใช้ชุดคลอรีนแบบดิจิตอล (SWAN Chematest 20 เครื่องมือวิเคราะห์วิตเซอร์แลนด์) การวัดค่า pH และ ORP ที่ถูกกำหนดโดยค่า pH เมตร (รุ่น pH50 แล็บค่า pH Meter XS-ตราสารคอนคอร์เดียอิตาลี).
เพื่อที่จะวาดเส้นโค้งของความเข้มข้นของคลอรีนอิสระเมื่อเทียบกับเวลาที่ใบของสีน้ำเงินสีแดง (Chicorium intybus L. ) หัวผักกาดหอมชนิด Trocadero, ผักกาดแก้วและชาร์ท (Beta vulgaris L. var. cicla L. ) ถูกตัดประมาณและผสมเข้าด้วยกัน ตัวอย่างของการผสมผักนี้ (25 กรัม) ถูกจุ่มลงใน 2 ลิตรใหม่ (ที่ได้รับโดยใช้ KCl เป็นอิเล็กโทรไล) เจือจางกับน้ำประปาอิฐ 300 ± 5 มิลลิกรัม / ลิตรของคลอรีนอิสระวัดความเข้มข้นของคลอรีนที่เหลือหลังจาก 5, 30 , 60, 90, 120 และ 180 นาทีตามที่อธิบายไว้ข้างต้น
การแปล กรุณารอสักครู่..

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สายพันธุ์แบคทีเรีย P . fluorescens สภาพการเลี้ยง
l1a l2a l1b l2b , , , , i3b l1c , , i2b , Pseudomonas simiae i2a , Pseudomonas enrichment i1b i2c , Pseudomonas , viridiflava i1a , Pseudomonas jessenii i3a i1c , หน้า , chicorii i3c , Pseudomonas koreensis i4c สายพันธุ์ที่แยกได้จากแช่เย็นพร้อมรับประทาน ( RTE ) หยิกเต่าลายตีนเป็ด ( chicorium endivia L . var . crispum Lam) และหัวผักกาด ( ประสิทธิภาพ sativa L . var . capitata L . ) โทรคาเดโร ชนิดและระบุรายงานเมื่อเร็ว ๆนี้ ( baruzzi et al . , และสิ่งพิมพ์ รวมทั้งส่วนของ aeruginosadsm939 ที่ถูกเก็บไว้ในสถาบันวิทยาศาสตร์ของการผลิตอาหารของแบคทีเรีย P . fluorescens คอลเลกชัน ncppb 1964t ชนิดสายพันธุ์ของชนิดนี้และ Pseudomonas marginalisncppb 667 ,ที่แยกได้จาก catalogna chicory ( cichorium intybus L . ) มาจากคอลเลกชันแห่งชาติของโรคพืชและแบคทีเรีย Pseudomonas syringae PS1 จากโรมัน ผักกาดหอม ( L . sativa L . var . longifolia ) ถูกรวมอยู่ในคอลเลกชันของจุลินทรีย์ในดิน พืช และ วิทยาศาสตร์ ( บารี , อิตาลี ) สายพันธุ์มักจะปลูกใน 10 ml ของน้ำนับ mplate ( mpcb เบคตอนดิกคินสัน , เลียมิลาน , อิตาลี ) , บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศา C ในอ่อนกวน ( 90 รอบต่อนาที ) เงื่อนไข วัฒนธรรมเหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้บนจานนับแผ่นวุ้น ( PCA biolife , มิลาน , อิตาลี ) จนใช้ในการทดสอบยาต้านจุลชีพ .
2.2 . การผลิตใหม่และการวัด
ความเข้มข้นของคลอรีนเครื่องแยกสารประกอบของน้ำที่ผลิตโดยใช้ระบบ EVA เครื่องมือให้กับมิติมั่นคงไม่ขั้วไฟฟ้า ( เดอ นอร่า ถัดไป , มิลาน , อิตาลี ) กับโซเดียมคลอไรด์และโซเดียมไบคาร์บอเนตเป็นอิเล็กโทรไลต์ความเข้มข้น 1 กรัม / ลิตรหรือปริมาณสารละลาย ( 15 กรัม / ลิตร ) และจากน้ำประปาไม่มีเกลืออนินทรีย์เพิ่ม เครื่องแยกสารประกอบน้ำเก็บหลังจาก 30 , 60 และ 120 นาทีของกระแสไฟฟ้าแอมแปร์ระหว่างขั้วไฟฟ้าหรือที่ 4A ในทุกการทดลอง น้ำหมุนเวียนผ่านเซลล์ไฟฟ้าที่มีอัตราการไหลเชิงปริมาตรของปั๊มส่ง 300 L / H / เซลล์
ความเข้มข้นคลอรีนอิสระ ( มก. / ล. ) ถูกกำหนดโดย N n-diethyl-p ฟีนิลีนไดอะมีน ( dpd1 ) พระชานุ ใช้ชุดคลอรีนดิจิตอล ( หงส์ chematest 20 , เครื่องมือวิเคราะห์ , สวิตเซอร์แลนด์ )
การแปล กรุณารอสักครู่..
