Genomic DNA was extracted from 5 ml

Genomic DNA was extracted from 5 ml whole blood by protein
salting out and nucleic acid precipitation (15). For patients who
were deceased at the time of the study (patients III.3 and III.9)
genomic DNA was obtained from the normal tissue portions
of formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tumor blocks using
the RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE (Life
Technologies, Grand Island, NY). Exons 1–17 of the BAP1
gene (NCBI Reference Sequence: NM_004656.3) were amplified
employing a PCR protocol adapted from Wiesner et al.
(9); Sanger sequencing of amplified fragments in forward and
reverse directions was performed by Genewiz (La Jolla, California).
Electropherogram results were analyzed and mutations
identified using Mutation Surveyor 2.61.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดีเอ็นเอการถูกแยกจากเลือด 5 ml โดยโปรตีนหมักเกลือออกและฝนกรดนิวคลีอิก (15) สำหรับผู้ป่วยที่ได้เสียชีวิตแล้วในเวลาของการศึกษา (ผู้ป่วย III.3 และ III.9)การดีเอ็นเอมาจากส่วนเนื้อเยื่อปกติของบล็อกเนื้องอก คง formalin พาราฟินที่ฝังตัว (FFPE) ที่ใช้ชุดแยกกรดนิวคลีอิกรวม RecoverAll สำหรับ FFPE (ชีวิตเทคโนโลยี เกาะแกรนด์ NY) Exons ที่ 1-17 ของ BAP1ยีน (NCBI ลำดับการอ้างอิง: NM_004656.3) ได้ขยายใช้โพรโทคอ PCR ที่ดัดแปลงจากอัล et Wiesner(9); Sanger ของส่วนขยายในการจัดลำดับ และย้อนกลับเส้นทางที่ดำเนินการ โดย Genewiz (La Jolla แคลิฟอร์เนีย)ได้วิเคราะห์ผล Electropherogram และกลายพันธุ์ระบุการใช้ผ่าสำรวจ 2.61

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จีโนมดีเอ็นเอที่สกัดจาก 5 มล. เลือดทั้งโปรตีน
เกลือออกและกรดนิวคลีอิกเร่งรัด (15) สำหรับผู้ป่วยที่
ถูกผู้ตายในช่วงเวลาของการศึกษา (ผู้ป่วย III.3 และ III.9) เดอะ
ดีเอ็นเอที่ได้รับจากส่วนเนื้อเยื่อปกติ
ของฟอร์มาลินคงพาราฟินฝังตัว (FFPE) บล็อกเนื้องอกโดยใช้
แยก RecoverAll รวมนิวคลีอิกกรด ชุดสำหรับ FFPE (ชีวิต
Technologies, แกรนด์ไอส์แลนด์นิวยอร์ก) Exons 1-17 ของ BAP1
ยีน (NCBI อ้างอิงลำดับ: NM_004656.3) ถูกขยาย
จ้างโปรโตคอล PCR ดัดแปลงมาจาก Wiesner et al.
(9); ลำดับแซงเจอร์ชิ้นส่วนขยายในไปข้างหน้าและ
ทิศทางการดำเนินการโดย Genewiz (La Jolla, แคลิฟอร์เนีย). ย้อนกลับ
ผลการ electropherogram ถูกนำมาวิเคราะห์และการกลายพันธุ์ที่
ระบุการใช้การกลายพันธุ์ Surveyor 2.61

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สกัดดีเอ็นเอจากเลือด โดยโปรตีนทั้ง 5 มล.เกลือออกกรดนิวคลีอิก และตกตะกอน ( 15 ) สำหรับผู้ป่วยที่จำนวนผู้เสียชีวิตในช่วงเวลาของการศึกษา ( ผู้ป่วยและ iii.3 iii.9 )ดีเอ็นเอได้จากส่วนเนื้อเยื่อปกติฟอร์มาลินถาวร พาราฟินฝังตัว ( ffpe ) เนื้องอกบล็อกโดยใช้การ recoverall รวมแยกกรดนิวคลีอิกชุด ffpe ( ชีวิตเทคโนโลยี , เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก ) 1 - 17 ของ bap1 โคยีน ( ncbi อ้างอิงลำดับ : nm_004656.3 ) อัตราการใช้ PCR ( ดัดแปลงจาก วิสเนอร์ et al .( 9 ) ; แซงเกอร์ การหาลำดับเบสของชิ้นส่วนของในข้างหน้าเส้นทางกลับกระทำโดย genewiz ( La Jolla , แคลิฟอร์เนีย )ผลเล็กโทรฟีโรแกรมวิเคราะห์และการกลายพันธุ์ระบุใช้การกลายพันธุ์เนจ 2.61 .