The present study describes a simpl

The present study describes a simple and efficient method utilizing high performance liquid chromatography
(HPLC) coupled to fluorescence detection for the determination of kinetic parameters of glutamate
uptake in nervous tissue. Retinal tissue obtained from 7-day-old chicks was incubated with known concentrations
of glutamate (50–2000 M) for 10 min, and the levels of the o-phtaldehyde (OPA)-derivatized
neurotransmitter in the incubation medium were measured. By assessing the difference between initial
and final concentrations of glutamate in the medium, a saturable uptake mechanism was characterized
(Km = 8.2 and Vmax = 9.8 nmol/mg protein/min). This measure was largely sodium- and temperaturedependent,
strongly supporting that the mechanism for concentration decrements is indeed uptake by
high-affinity transporters. Added to this, our results also demonstrated that zinc chloride (an inhibitor
of glutamate/aspartate transporters) evoked a concentration-dependent decrease in glutamate uptake,
demonstrating the specificity of our methodology. Overall, the present work characterizes an alternative
methodology to evaluate glutamate uptake in nervous tissue using HPLC. This approach could be an
important tool for studies associated to the characterization of minute alterations in glutamate transport
related with central nervous system injury.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การศึกษาครั้งนี้จะอธิบายถึงวิธีการที่ง่ายและมีประสิทธิภาพการใช้ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography
(HPLC) คู่กับการตรวจสอบการเรืองแสงสำหรับการกำหนดค่าพารามิเตอร์การเคลื่อนไหวของกลูตาเมต
ในการดูดซึมของเนื้อเยื่อประสาท เนื้อเยื่อจอประสาทตาได้รับจากลูกไก่ 7 วันเก่า ๆ ได้ถูกบ่มที่มีความเข้มข้นเป็นที่รู้จักกัน
ของกลูตาเมต (50-2000? M) เป็นเวลา 10 นาทีและระดับของ o-phtaldehyde (OPA) -derivatized
สารสื่อประสาทในสื่อบ่มวัด โดยการประเมินความแตกต่างระหว่างการเริ่มต้น
ความเข้มข้นและครั้งสุดท้ายของกลูตาเมตในสื่อเป็นกลไกการดูดซึม saturable ก็มีลักษณะ
(กม = 8.2 และ Vmax = 9.8 nmol / มิลลิกรัมโปรตีน / นาที) วัดนี้เป็นส่วนใหญ่และ sodium- temperaturedependent,
ขอสนับสนุนว่ากลไกสำหรับการลดลงความเข้มข้นเป็นจริงโดยการดูดซึม
ขนส่งสูงความสัมพันธ์ นอกจากนี้ผลของเราแสดงให้เห็นว่าสังกะสีคลอไรด์ (ยับยั้งการ
ขนส่งของกลูตาเมต / aspartate) ปรากฏลดลงขึ้นอยู่กับความเข้มข้นในการดูดซึมกลูตาเมต,
แสดงให้เห็นถึงความจำเพาะของวิธีการของเรา โดยรวมแล้วการทำงานในปัจจุบันลักษณะทางเลือก
วิธีการในการประเมินการดูดซึมกลูตาเมตในเนื้อเยื่อของประสาทโดยใช้วิธี HPLC วิธีการนี้จะเป็น
เครื่องมือที่สำคัญสำหรับการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับลักษณะของการเปลี่ยนแปลงนาทีในการขนส่งกลูตาเมต
ที่มีการบาดเจ็บที่เกี่ยวข้องกับระบบประสาทส่วนกลาง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษานี้อธิบายวิธีที่ง่ายและมีประสิทธิภาพการใช้ liquid chromatography ( HPLC )
สมรรถนะสูงควบคู่กับการตรวจสอบการหาค่าพารามิเตอร์จลน์ผงชูรส
การดูดซึมในประสาทเนื้อเยื่อ เนื้อเยื่อที่ได้จากจอประสาทตา ลูกไก่ 7-day-old ถูกบ่มที่ทราบความเข้มข้น
ของกลูตาเมต ( 50 - 2000  ) 10 นาทีและระดับของ o-phtaldehyde ( OPA ) - derivatized
สารสื่อประสาทในการบ่มขนาดกลางถูกวัด โดยประเมินความแตกต่างระหว่างเริ่มต้นและสุดท้ายของกลูตาเมทความเข้มข้น
ในอาหาร กลไกการดูดซึม saturable มีลักษณะ
( km = 8.2 และ Vmax = 9.8 nmol / mg protein / min ) วัดนี้ส่วนใหญ่ โซเดียม และ temperaturedependent
,ขอสนับสนุนว่า กลไกของการ decrements แน่นอน
ขนส่ง affinity สูง นอกจากนี้ เรายังพบว่าผลของสังกะสีคลอไรด์ ( ยับยั้ง
ของผงชูรส / aspartate ขนย้าย ) ที่เกิดขึ้นในการลดความเข้มข้นของผงชูรส , แสดงเฉพาะ
วิธีการของเรา โดยรวมแล้ว งานปัจจุบันในลักษณะทางเลือก
วิธีการประเมินการใช้ผงชูรสในเนื้อเยื่อประสาทโดยใช้ HPLC . วิธีการนี้สามารถเป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษา
ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงในนาทีผงชูรสการขนส่ง
ที่เกี่ยวข้องกับการบาดเจ็บระบบประสาทส่วนกลาง