2.8.1. Endocellulase productionCarb

2.8.1. Endocellulase production
Carboxymethyl cellulose (CMC) was used as substrate to determine
endocellulase activity. Samples were incubated with 2.0% (w/
V) CMC in 50 mM acetate buffer pH 5.0 at 50 C for 60 min.
Reducing sugars released during the reaction were determined as
described in Section 2.7.2. Glucose was used as standard. One unit
(U mL
1) of endocellulase activity was defined as the amount of
enzyme required to produce 1 mmol of glucose in 1 min at 50 C.
Specific endocellulase activity (U mg
1) was expressed as 1 U per
1 mg of protein present in the FE.
Proteins in the FE were separated by isoelectric focusing (IEF)
using the Multiphor II electrophoresis system (Pharmacia-LKB
Biotechnology) according to the manufacturer's instructions.
Focusing was carried out on a 6% polyacrylamide gel with
ampholytes in the 3e10 pH range. Endocellulase isoforms were
detected in acrylamide (AA) (7.5%) gel with copolymerized 1% CMC,
previously printed from IEF gel for 55 min. The cellulase zymogram was further prepared as previously described by Pavlovi
c et al.
(2012

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8.1 การ Endocellulase ผลิตมีใช้เป็นพื้นผิว Carboxymethyl เซลลูโลส (CMC) เพื่อกำหนดendocellulase กิจกรรมการ ตัวอย่างที่ incubated กับ 2.0% (พร้อมV) CMC ใน pH บัฟเฟอร์ acetate 50 มม. 5.0 ที่ 50 C สำหรับ 60 นาทีมีกำหนดออกในปฏิกิริยาระหว่างน้ำตาลลดลงอธิบายไว้ในส่วน 2.7.2 กลูโคสถูกใช้เป็นมาตรฐาน หนึ่งหน่วย(U mL 1) ของ endocellulase กิจกรรมถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1 mmol น้ำตาลกลูโคสใน 1 นาทีที่ 50 ซีEndocellulase เฉพาะกิจกรรม (ยูเอ็มจี 1) ถูกแสดงเป็น 1 U ต่อโปรตีนใน FE 1 มก.โปรตีนใน FE ถูกคั่น ด้วย isoelectric เน้น (IEF)ใช้ระบบ electrophoresis Multiphor II (Pharmacia LKBเทคโนโลยีชีวภาพ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตเน้นถูกดำเนินการบนเจ polyacrylamide 6% กับampholytes ในช่วง pH 3e10 มี Endocellulase isoformsพบอะคริลาไมด์ (AA) (7.5%) เจ copolymerized 1% CMCก่อนหน้านี้ พิมพ์ IEF เจลสำหรับ 55 นาที Cellulase zymogram อีกถูกเตรียมไว้ก่อนหน้านี้เป็น อธิบาย โดย Pavlovi c et al(2012

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.8.1 การผลิต Endocellulase
เซลลูโลส Carboxymethyl (CMC)
ถูกใช้เป็นสารตั้งต้นในการกำหนดกิจกรรมendocellulase ตัวอย่างถูกบ่มกับ 2.0% (w /
v) CMC ในค่า pH บัฟเฟอร์อะซิเตต 50 มิลลิ 5.0 ที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที.
ลดน้ำตาลปล่อยตัวในช่วงเกิดปฏิกิริยาได้รับการพิจารณาเป็นที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.7.2
กลูโคสถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐาน หนึ่งหน่วย
(U มิลลิลิตร 1) ของกิจกรรม endocellulase
ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต1 มิลลิโมลของกลูโคสใน 1 นาทีที่ 50 องศาเซลเซียส.
เฉพาะกิจกรรม endocellulase (U mg? 1) ถูกแสดงเป็น 1 ยูต่อ
1 มิลลิกรัม ของโปรตีนที่อยู่ใน FE.
โปรตีนใน FE ถูกแยกจากกันโดย Isoelectric มุ่งเน้น (IEF)
โดยใช้ระบบอิเล็ก Multiphor ii (Pharmacia-LKB
เทคโนโลยีชีวภาพ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต.
มุ่งเน้นไปที่ได้รับการดำเนินการในเจลอะคริเลต 6% กับ
ampholytes ใน ช่วง pH 3e10 ไอโซฟอร์ม Endocellulase
ถูกตรวจพบในริลาไมด์(AA) (7.5%) เจลที่มี CMC copolymerized 1%,
พิมพ์ก่อนหน้านี้จาก IEF เจลสำหรับ 55 นาที zymogram เซลลูเลสได้เตรียมการต่อไปตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Pavlovi? ค et al.
(2012

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8.1 . การผลิตคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส ( CMC )
endocellulase ใช้เป็นวัตถุดิบเพื่อตรวจสอบกิจกรรม endocellulase
. จำนวนเชื้อที่ 2.0 % ( w /
V ) CMC ใน 50 มม. อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 5.0 เป็นเวลา 60 นาที 50 
ลดน้ำตาลออกในระหว่างปฏิกิริยาเป็นตามที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.7.2
. กลูโคสที่ใช้เป็นมาตรฐาน หนึ่งหน่วย
( U +
1 ) กิจกรรม endocellulase ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต
1 มิลลิโมลของกลูโคสใน 1 นาทีที่ 50  C .
( U ต่อกิจกรรมเฉพาะ endocellulase
1 ) แสดงเป็น 1 u /
1 มิลลิกรัมของโปรตีนที่มีอยู่ในเหล็ก
โปรตีนในเหล็กที่แยก โดย Isoelectric สำ ( IEF ) ด้วยระบบอิเล็ก multiphor
2 ( มุ่งมั่น lkb
เทคโนโลยีชีวภาพ ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต
เน้นถูกดำเนินการใน 6 % polyacrylamide gel กับ
น้ำหนักแรกเกิดน้อยกว่าปกติใน 3e10 pH ช่วง endocellulase ไอโซฟอร์มถูก
พบอะคริลาไมด์ ( AA ) ( 7.5% ) เจล copolymerized 1% CMC
ก่อนหน้านี้พิมพ์จากบทสรุปเจลสำหรับ 55 นาทีเอนไซม์ไอโซไซม์ที่เตรียมไว้ก่อนหน้านี้อธิบายเพิ่มเติมโดย pavlovi
C et al .
( 2012