Library Construction. A site direct

Library Construction.
A site directed hlyz library, using the NDT degenerate codon at target sites,was constructed from synthetic oligonucleotides as described in detail elsewhere. The external N-and C-terminal primers included overlap with the EcoRI and XhoI restriction sites in the p416-GAL1-αMF vector.The library was cloned into the p416-GAL1-αMF vector by yeast gap repair homologous recombination in the BJ5464::yEGFP S. cerevisiae strain.The statistics of library coverage were calculated using the GLUE algorithm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ก่อสร้างไลบรารี ไซต์นำไลบรารี hlyz ใช้รหัสพันธุกรรม degenerate ผู้ที่เว็บไซต์เป้าหมาย ถูกสร้างขึ้นจาก oligonucleotides สังเคราะห์ตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดอื่น ๆ N ภายนอก- และไพรเมอร์ C-เทอร์มินัลที่อยู่ทับซ้อนกับไซต์จำกัด EcoRI และ XhoI ในเวกเตอร์ p416-GAL1-αMF ไลบรารีถูกโคลนเป็นเวกเตอร์ p416-GAL1-αMF โดยยีสต์ช่วงซ่อมแซม homologous recombination ใน BJ5464::yEGFP S. cerevisiae สายพันธุ์ สถิติของความครอบคลุมของไลบรารีถูกคำนวณโดยใช้อัลกอริทึมกาว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ก่อสร้างห้องสมุด.
เว็บไซต์กำกับห้องสมุด hlyz ใช้ NDT codon เลวที่เว็บไซต์เป้าหมายที่ถูกสร้างขึ้นมาจาก oligonucleotides สังเคราะห์ตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดอื่น ๆ ภายนอก N-และไพรเมอร์มินัล C-รวมทับซ้อนกับ EcoRI และ XhoI เว็บไซต์ข้อ จำกัด ในห้องสมุด p416-GAL1-αMF vector.The เป็นโคลนเข้าไปใน p416-GAL1-αMFเวกเตอร์โดยการซ่อมแซมช่องว่างยีสต์รวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันใน BJ5464 :: yEGFP สถิติ S. cerevisiae strain.The ของความคุ้มครองที่ห้องสมุดจะถูกคำนวณโดยใช้อัลกอริทึมกาว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ก่อสร้างห้องสมุด โดยห้องสมุด hlyz
เว็บไซต์ โดยใช้ degenerate codon NDT ที่เว็บไซต์เป้าหมาย ถูกสร้างจากโอลิโกนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ที่ระบุรายละเอียดอื่น ในและภายนอกโดยรวมซึ่งทับซ้อนกับ EcoRI และ xhoi จำกัดเว็บไซต์ใน p416-gal1 เวกเตอร์ -- MF α .ห้องสมุดถูกโคลนเข้าไปใน p416-gal1 - α MF เวกเตอร์ซ่อมแซมช่องว่างการเปรียบเทียบยีสต์ใน bj5464 : : yegfp S . cerevisiae สายพันธุ์ สถิติที่ครอบคลุมห้องสมุดคำนวณโดยใช้กาวขั้นตอนวิธี