MATERIALS AND METHODSMaterials. Thr

MATERIALS AND METHODS
Materials. Three different sample lots of mango, cultivar
Keitt, produced in Bahia, Brazil, were bought at the fully ripe
stage in Campinas, Sa˜ o Paulo, Brazil. For each sample, peel
and seed of three fruits were removed, the pulp was homogenized,
and 100 g was taken for identification and 15 g for
quantification.
Identification of the Carotenoids. Initial provisional
identification of the carotenoids was carried out by HPLC
through the combined use of the retention time, visible
absorption spectrum obtained with a photodiode array detector,
co-injection with carotenoid standards, and response to
chemical tests, as monitored by HPLC. Iodine-catalyzed
isomerization, methylation, and acid-catalyzed epoxide-furanoxide
rearrangement (Davies, 1976; Eugster, 1995) were
undertaken on the whole extract and also on fractions separated
by open column chromatography, according to the
method of Rodriguez-Amaya et al. (1988).
A Varian liquid chromatograph equipped with a Waters
photodiode array detector Model 994 was used. The separation
was carried out with a 150 × 4.6 i.d. mm Spherisorb nitrile
column (5 µm particle size), protected by a 30 × 4.6 mm Varian
guard column (10 µm particle size). A multilinear gradient
with increasing concentration of acetone in n-hexane from 0
to 15% in 10 min, to 20% in 20 min, to 30% in 10 min, and to
40% in 2 min was used with a flow rate of 1 mL/min. The
re-equilibration time to the initial conditions was 8 min.
Identification was confirmed by mass spectrometry. The
carotenoids were isolated either by accumulation of the carotenoids
separated by HPLC through several runs or by a
procedure involving several chromatography steps. In this,
separation on a neutral alumina open column (activity grade
III) gave three broad fractions, each of which was separated
by TLC on silica, developed with petroleum ether, petroleum
ether/diethyl ether (3:2), and ether according to increasing
polarity of the fractions. Each carotenoid isolated by silica
TLC was further purified by TLC on MgO/kieselguhr (1:1) with
combinations of acetone and petroleum ether as mobile phase.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการวัสดุ สามแตกต่างกันอย่างมากมายของมะม่วง cultivarKeitt เฮีย บราซิล ผลิตได้ซื้อที่สุกทั้งหมดขั้นตอนใน Campinas, Sa˜ o เซาเปาโล บราซิล สำหรับตัวอย่างแต่ละ ลอกและเมล็ดของผลไม้สามออก เนื้อเยื่อถูก homogenized เป็น กลุ่มและ 100 กรัมถูกใช้สำหรับรหัสและ 15 กรัมสำหรับนับการระบุของ Carotenoids เริ่มต้นสำรองรหัสของ carotenoids ถูกดำเนินการ โดย HPLCโดยรวมใช้เวลาเก็บข้อมูล มองเห็นได้สเปกตรัมการดูดซึมได้ ด้วยเครื่องตรวจจับเรย์ photodiodeฉีดร่วมกับมาตรฐาน carotenoid ตอบเคมีทดสอบ เป็นการตรวจสอบ โดย HPLC ไอโอดีนกระบวนisomerization ปรับ และกรดกระบวน epoxide-furanoxiderearrangement (เดวีส์ 1976 Eugster, 1995) ได้ดำเนินการ ในการดึงข้อมูลทั้งหมด และ ในส่วนที่แยกออกโดยคอลัมน์เปิด chromatography ตามวิธีของคาร็อดริเกซและ al. (1988)Chromatograph เหลวแล้วแต่กำหนดพร้อมกับน้ำใช้จับเรย์ photodiode รุ่น 994 แยกได้ดำเนินการกับตัว 150 × 4.6 ประชาชนมม. Spherisorb ระบบรอบคอลัมน์ (5 µm ขนาดอนุภาค), ป้องกัน โดยการ 30 × 4.6 มม.แล้วแต่กำหนดรักษาคอลัมน์ (10 µm ขนาดอนุภาค) ไล่ multilinearด้วยการเพิ่มความเข้มข้นของอะซีโตนในเอ็นเฮกเซนจาก 0เป็น 15% ใน 10 นาที 20% ใน 20 นาที 30% ใน 10 นาที และใช้ 40% ใน 2 นาที ด้วยอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาทีของการเวลา equilibration ใหม่เงื่อนไขเริ่มต้นเป็น 8 นาทีระบุได้รับการยืนยัน โดยรเมท ที่carotenoids ถูกแยกอย่างใดอย่างหนึ่ง โดยการสะสมของ carotenoidsคั่น ด้วย HPLC ทำหลาย หรือโดยการขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับหลายขั้นตอน chromatography ในที่นี้แยกบนอลูมินากลางเปิดคอลัมน์ (เกรดกิจกรรมIII) ให้สามส่วนกว้าง ซึ่งถูกคั่นโดย TLC ในซิลิก้า พัฒนา ด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์ ปิโตรเลียมอีเทอร์ อีเทอร์/diethyl (3:2), และอีเทอร์ตามเพิ่มขั้วของเศษส่วน แต่ละ carotenoid ที่แยกต่างหาก โดยซิลิกาTLC ที่บริสุทธิ์ โดย TLC ใน kieselguhr MgO (1:1) ด้วยเพิ่มเติมชุดของอะซีโตนและปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นระยะเคลื่อน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการวัสดุ สามตัวอย่างจำนวนมากที่แตกต่างกันของมะม่วงพันธุ์
Keitt ผลิตใน Bahia, บราซิล,
ซื้อที่สุกเต็มที่เวทีกัมปีSa~ เซาเปาโลประเทศบราซิล
สำหรับแต่ละตัวอย่างเปลือกและเมล็ดของสามผลไม้ที่ถูกตัดออกเยื่อกระดาษที่ถูกปั่น,
และ 100 กรัมถูกนำสำหรับการระบุและ 15
กรัมปริมาณ.
บัตรประจำตัวของ Carotenoids เริ่มต้นชั่วคราวบัตรประจำตัวของนอยด์ได้ดำเนินการโดยวิธี HPLC ผ่านการใช้งานร่วมกันของเวลาการเก็บรักษาที่มองเห็นสเปกตรัมการดูดซึมได้ด้วยเครื่องตรวจจับอาร์เรย์โฟโตไดโอด, ร่วมกับมาตรฐานการฉีด carotenoid และการตอบสนองต่อการทดสอบทางเคมีเช่นการตรวจสอบโดยวิธีHPLC ไอโอดีนเร่งisomerization, methylation และกรดเร่งปฏิกิริยาอิพอกไซด์-furanoxide ปรับปรุงใหม่ (เดวีส์ 1976; Eugster 1995) ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับสารสกัดจากทั้งหมดและนอกจากนี้ยังมีเศษแยกออกจากกันโดยคอลัมน์เปิดตามวิธีการของโรดริเก-Amaya et al, . (1988). chromatograph ของเหลว Varian พร้อมกับน้ำตรวจจับอาร์เรย์โฟโตไดโอดรุ่น994 ถูกนำมาใช้ แยกได้ดำเนินการกับ 150 × 4.6 มมไนไตรล์รหัส Spherisorb คอลัมน์ (5 ไมครอนขนาดอนุภาค) การคุ้มครองจาก 30 × 4.6 มม Varian คอลัมน์ยาม (10 ไมครอนขนาดอนุภาค) ลาด multilinear ที่มีความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้นของอะซิโตน n-เฮกเซนจาก 0 เป็น 15% ในเวลา 10 นาที, 20% ในอีก 20 นาที, 30% ในเวลา 10 นาทีและ40% ใน 2 นาทีถูกนำมาใช้กับอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที เวลาอีกสมดุลกับสภาพเริ่มต้น 8 นาที. ประจำตัวประชาชนได้รับการยืนยันจากมวลสาร นอยด์ที่แยกได้ทั้งโดยการสะสมของ carotenoids แยกจากกันโดยวิธี HPLC วิ่งผ่านหลายคนหรือโดยขั้นตอนหลายขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับโค ในการนี้แยกบนอลูมิเป็นกลางคอลัมน์เปิด (เกรดกิจกรรม III) ให้สามเศษส่วนในวงกว้างซึ่งแต่ละถูกแยกออกโดยTLC บนซิลิกาพัฒนาด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์ปิโตรเลียมอีเธอร์/ อีเทอร์ (3: 2) และอีเธอร์ตาม เพิ่มขึ้นขั้วของเศษส่วน carotenoid แต่ละแยกจากซิลิกาTLC บริสุทธิ์ต่อไปโดยการเอาใจใส่ใน MgO / ส้ม (1: 1) ที่มีการรวมกันของอะซีโตนและปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นเฟสเคลื่อนที่