PAPER PCRSTUDENT MANUALBackground I

PAPER PCR
STUDENT MANUAL
Background Information
The term PCR is an acronym that stands for the phrase polymerase chain reaction.
PCR is a scientific technique used to amplify, or create millions of identical copies of, a
particular DNA sequence, all within a tiny reaction tube. You can think of this procedure as
similar to the DNA replication that occurs in your body cells every time they divide.
However, PCR is different in two major ways. First, PCR only copies a specific region of
DNA (rather than your entire genome). And second, it makes millions of copies of DNA
(rather than just one).
PCR is an incredibly powerful tool that scientists use to analyze DNA. We refer to
these kinds of reactions as DNA amplification reactions, although most people just call them
PCR reactions. You may be most familiar with the use of PCR reactions in constructing
human DNA profiles or “fingerprints” that can be used for forensics, paternity testing, and
genetic disease diagnosis.
So, what things do you need to put into a tiny reaction tube to do a PCR-based DNA
amplification reaction? Let’s deal with each of the key components separately so you can
understand the role that each one plays in the reaction.
DNA Template – This is double-stranded genomic DNA isolated from the cells of
the organism being studied. It can be human DNA, plant DNA, mouse DNA,
bacterial DNA, whatever DNA you would like to have copied! The point is that if
you would like to copy something, then you must have a master template from which
to start.
Taq DNA Polymerase – This enzyme can add complementary nucleotides to a DNA
strand during DNA synthesis. It is similar to the human DNA polymerase responsible
for copying your genome every time one of your body cells divides.
Oligonucleotide Primers – These are short pieces of single-stranded DNA that
match up to DNA sequences flanking (to either side of) the region of genomic DNA
that you would like to copy. One is a forward primer and one is a reverse primer.
When they have bound to the complementary sequences on the genomic DNA
template strand, they show the Taq where to start DNA synthesis. The “oligos” or
“primers” are responsible for making sure that only the region of interest is copied.
Nucleotides – Free floating single nucleotides must be present in the reaction because
they are what the Taq puts in place during DNA synthesis. We can’t copy DNA if we
don’t have something to make the copies with! So we must have As, Ts, Cs, and Gs
in our reaction tube.
Unfortunately, we can’t just micropipette all of these components into a tube and expect new
DNA strands to magically synthesize. There is another critical part to PCR and this is the
thermal cycling.
Paper PCR
Specific changes in temperature, or thermal cycling, are what make the PCR DNA
amplification reaction work. There are three different temperatures involved and a specific
thing happens to the reaction components at each of those temperatures. Let’s look at each
one separately.
STEP 1 – DENATURING
The reaction mixture is heated up to 96°C so that the double-stranded DNA template
denatures and becomes single-stranded. (This high temperature breaks the hydrogen
bonds between the complementary bases in double-stranded DNA.)
STEP 2 – ANNEALING
The reaction mixture is cooled down to 50°C so that the oligonucleotide primers can
base pair with, or anneal to, the DNA template. (This cooler temperature allows
hydrogen bonds to form between complementary bases.)
STEP 3 – EXTENSION
The reaction mixture is warmed up to 60°C, so Taq DNA polymerase can perform
DNA synthesis. Taq can recognize an oligonucleotide primer as a starting point for
DNA synthesis. It is able to put free-floating nucleotides into the correct places along
the DNA template so that a new complementary strand of DNA is extended from the
primer.
So, how do we get our tiny reaction tube to go through this series of temperatures?
The tube is placed in a PCR machine, or thermal cycler, which is able to make rapid
transitions between the different temperatures. Each time the reaction mixture is heated for
denaturing, cooled for annealing, and warmed for extending, more DNA fragments are
created. The reaction mixture in a single tiny tube can generate millions of copies of the
region of interest. How is this possible? In the first round of PCR, only the initial genomic
DNA serves as a template. However, in the second and all subsequent rounds of PCR, the
newly synthesized copies can also be used as templates. This concept will become clear as
you and your partner complete the Paper PCR modeling activity that follows.
Activity Overview
In this activity, you and a partner will play the part of Taq DNA polymerase as you
amplify, or make several copies of, a particular DNA sequence of interest. Your whole class
will represent several DNA amplification reactions occurring simultaneously in a single
reaction tube. Your teacher will play the part of the PCR machine, directing the timed
changes in temperatures during three cycles of PCR.
Paper PCR
Materials
1 DNA Template (blue)
7 Forward Primers (green)
7 Reverse Primers (green)
1 Nucleotide Grab Bag (envelope) containing the following:
36 As
36 Ts
36 Cs
36 Gs
1 roll of transparent tape
Procedure
1. Locate all of the materials listed above. Lay out your double-stranded DNA
Template in front of you and your partner. Wait for your teacher (the PCR machine)
to start the first cycle of PCR.
2. Your teacher will indicate that the PCR machine has reached a temperature of 96°C.
You may now denature your DNA Template, or separate it into two single strands of
DNA. Slide one strand in front of you and slide the complementary strand in front of
your partner.
3. Your teacher will indicate that the PCR machine has dropped to a temperature of
50°C. You and your partner may now anneal Oligonucleotide Primers to the
complementary bases at each end of your single-stranded DNA Templates. One of
you will be using a Forward Primer one of you will be using a Reverse Primer,
depending upon which single-stranded DNA Template you have in front of you. (The
Forward Primer will match up at the left end of one DNA Template and the Reverse
Primer will match up on the right end of the other DNA Template.) Lay your Primer
down so that the correct bases match up to those on your DNA Template.
4. Your teacher will indicate that the PCR machine has heated up to a temperature of
60°C. You will now act as Taq DNA Polymerase, extending a complementary strand
of DNA out from your Oligonucleotide Primer, one base at a time. To do this, you
and your partner will each blindly choose a nucleotide from the Nucleotide Grab Bag.
a. If your selected nucleotide does NOT correctly match up to the corresponding
base on the DNA Template, then you must put it back in the Nucleotide Grab
Bag and select again.
b. If your selected nucleotide correctly matches up to the corresponding base on
the DNA Template then you may lay it down and tape it to the end of the
Primer.
5. Keep selecting nucleotides and putting them in place, taping each one to the previous
one, until you have completed the whole double-stranded DNA fragment. Notice that

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กระดาษ PCRคู่มือนักศึกษาข้อมูลเบื้องหลังคำว่า PCR เป็นคำย่อที่หมายถึงปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสวลีPCR เป็นเทคนิคทางวิทยาศาสตร์ที่ใช้ในการขยาย หรือสร้างสำเนาที่เหมือนกันของ ล้านคำเฉพาะดีเอ็นเอลำดับ ในหลอดปฏิกิริยาเล็ก ๆ คุณคิดว่า ของขั้นตอนนี้เป็นคล้ายกับการจำลองดีเอ็นเอที่เกิดขึ้นในเซลล์ร่างกายของคุณทุกครั้งที่พวกเขาแบ่งอย่างไรก็ตาม PCR จะแตกต่างกันสองวิธีหลัก ครั้งแรก PCR คัดลอกเฉพาะภูมิภาคที่เฉพาะเจาะจงของดีเอ็นเอ (แทนกลุ่มของคุณทั้งหมด) และสอง ทำสำเนาดีเอ็นเอเป็นล้าน ๆ(แทนที่จะเพียงหนึ่ง)PCR เป็นเครื่องมือมีประสิทธิภาพอย่างเหลือเชื่อที่นักวิทยาศาสตร์ใช้ในการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ เราอ้างอิงถึงเป็นดีเอ็นเอขยายปฏิกิริยา ปฏิกิริยาต่าง ๆ เหล่านี้แม้ว่าคนส่วนใหญ่เพียงแค่โทรไปปฏิกิริยา PCR คุณอาจจะคุ้นเคยมากที่สุด ด้วยการใช้ปฏิกิริยา PCR ในสร้างโพรไฟล์ดีเอ็นเอมนุษย์หรือ "รอยนิ้วมือ" ที่สามารถใช้สำหรับนิติ paternity ทดสอบ และวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรมดังนั้น สิ่งใดคุณต้องการใส่ลงในหลอดปฏิกิริยาเล็ก ๆ ทำดีเอ็นเอผลขยายปฏิกิริยา ลองจัดการกับส่วนประกอบสำคัญแต่ละแยกต่างหากได้เข้าใจบทบาทที่แต่ละคนเล่นในปฏิกิริยาดีเอ็นเอแม่แบบเป็นคู่ควั่น genomic DNA แยกต่างหากจากเซลล์สิ่งมีชีวิตการศึกษา ให้มนุษย์ DNA ดีเอ็นเอพืช เมาส์ DNAแบคทีเรีย DNA ดีเอ็นเอสิ่งที่คุณต้องการคัดลอก จุดอยู่ที่ถ้าคุณต้องการคัดลอกสิ่งที่ แล้วคุณต้องมีแม่เป็นหลักซึ่งเริ่มต้นTaq DNA พอลิเมอเรสเอนไซม์นี้สามารถเพิ่มเสริมนิวคลีโอไทด์ DNA เป็นสแตรนระหว่างการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ก็เหมือนกับมนุษย์ DNA พอลิเมอเรสรับผิดชอบสำหรับการคัดลอกกลุ่มการ ทุกครั้งหนึ่งของเซลล์ร่างกายแบ่งไพรเมอร์ oligonucleotide-เป็นชิ้นดีเอ็นเอเดียวควั่นสั้นที่ตรงกับลำดับดีเอ็นเอ flanking (ไปด้านใดด้านหนึ่งของ) ขอบเขตของ genomic DNAที่คุณต้องการคัดลอก เป็นรองพื้นไปข้างหน้า และเป็นแนวทางสำหรับการกลับรายการเมื่อพวกเขาได้ผูกไว้กับลำดับเสริมบน genomic DNAต้นสาระ พวกเขาแสดง Taq เพื่อเริ่มต้นการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ "Oligos" หรือ"ไพรเมอร์" มีหน้าที่ในการทำให้แน่ใจว่า เฉพาะภูมิภาคน่าสนใจจะถูกคัดลอกนิวคลีโอไทด์ – นิวคลีเดียวลอยฟรีโอไทด์ต้องมีปฏิกิริยาเนื่องจากพวกเขามีสิ่ง Taq ทำให้ในระหว่างการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ เราไม่สามารถคัดลอกดีเอ็นเอถ้าเราไม่มีสิ่งที่จะทำสำเนาด้วย ดังนั้นเราต้อง เป็น Ts, Cs, Gsในหลอดปฏิกิริยาของเราขออภัย เราไม่เพียง micropipette ทุกส่วนประกอบเหล่านี้เข้าไปในหลอด และคาดหวังใหม่Strands ดีเอ็นเอสังเคราะห์ทำให้แขก มีส่วนสำคัญอื่นการ PCR และนี้คือจักรยานความร้อนกระดาษ PCRการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ หรือจักรยานความร้อน มีอะไรทำให้ PCR DNAขยายงานปฏิกิริยา มีอุณหภูมิที่แตกต่างกันสามเกี่ยวข้องและการสิ่งที่เกิดขึ้นกับส่วนประกอบของปฏิกิริยาที่อุณหภูมิแต่ละ ลองดูที่แต่ละหนึ่งแยกต่างหากขั้นตอนที่ 1 – DENATURINGผสมปฏิกิริยามีความร้อนสูงสุด 96° C เพื่อให้แบบดีเอ็นเอคู่ควั่นdenatures และกลายเป็นขนเดียว (นี้อุณหภูมิสูงแยกไฮโดรเจนพันธบัตรระหว่างฐานเสริมในขนคู่ดีเอ็นเอ)ขั้นตอนที่ 2 การอบเหนียวผสมปฏิกิริยาจะระบายความร้อนด้วยจนถึง 50 องศาเซลเซียสเพื่อให้ไพรเมอร์ oligonucleotide สามารถฐานคู่กับ หรือหลอมแบบกับ ดีเอ็นเอแม่แบบ (อุณหภูมิเย็นนี้ช่วยให้ไฮโดรเจนพันธบัตรฟอร์มระหว่างฐานเสริม)ขั้นตอนที่ 3 – นามสกุลWarmed ผสมปฏิกิริยาถึง 60° C เพื่อทำ Taq DNA พอลิเมอเรสการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ Taq สามารถจดจำสีรองพื้นเป็น oligonucleotide เป็นจุดเริ่มต้นการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ สามารถบรรจุนิวคลีโอไทด์ free-floating สถานถูกต้องตามแบบดีเอ็นเอเพื่อให้สาระเสริมตัวใหม่ของดีเอ็นเอจะขยายจากการรองพื้นดังนั้น ว่าเราเรียกหลอดปฏิกิริยาเล็ก ๆ ของเราไปผ่านชุดของอุณหภูมินี้ท่อจะถูกวางในเครื่อง PCR หรือความร้อน cycler ซึ่งจะต้องทำอย่างรวดเร็วภาพระหว่างอุณหภูมิแตกต่างกัน กันความร้อนสำหรับส่วนผสมของปฏิกิริยาdenaturing ระบายความร้อนด้วยสำหรับการอบเหนียว และมีชิ้นส่วนดีเอ็นเอเพิ่มเติม warmed สำหรับขยายสร้าง ส่วนผสมของปฏิกิริยาในหลอดขนาดเล็กสามารถสร้างล้านสำเนาภูมิภาคที่น่าสนใจ วิธีนี้จะเป็นไปได้หรือไม่ ในรอบแรกของ PCR เฉพาะต้น genomicดีเอ็นเอทำหน้าที่เป็นแม่แบบ อย่างไรก็ตาม ในรอบที่สอง และต่อมาทั้งหมดของ PCR การสำเนาใหม่สังเคราะห์สามารถใช้เป็นแม่แบบ แนวคิดนี้จะชัดเจนเป็นคุณและคู่ของคุณทำ PCR กระดาษที่โมเดลกิจกรรมต่อไปนี้ภาพรวมกิจกรรมในกิจกรรมนี้ และพันธมิตรจะเล่นส่วนของ Taq DNA พอลิเมอเรสเป็นคุณขยาย หรือทำหลายสำเนา ลำดับดีเอ็นเอเฉพาะน่าสนใจ ทั้งชั้นแสดงถึงปฏิกิริยาขยายดีเอ็นเอหลายที่เกิดขึ้นพร้อมกันในครั้งเดียวหลอดปฏิกิริยา อาจารย์จะเล่นส่วนหนึ่งของเครื่อง PCR ผู้กำกับการหมดเวลาการเปลี่ยนแปลงในอุณหภูมิระหว่างสามรอบของ PCRกระดาษ PCRวัสดุ1 ดีเอ็นเอแม่แบบ (สีฟ้า)7 หน้าไพรเมอร์ (สีเขียว)7 กลับไพรเมอร์ (สีเขียว)1 นิวคลีโอไทด์คว้าถุง (ซองจดหมาย) ที่ประกอบด้วยต่อไปนี้:36 เป็น36 ts36 Cs36 gsเทปใส 1 ม้วนขั้นตอนการ1. หาตำแหน่งของรายการข้างต้น เค้าดีเอ็นเอของขนคู่แม่แบบหน้าคุณและคู่ของคุณ รออาจารย์ (เครื่อง PCR)เริ่มรอบแรกของ PCR2.ครูจะบ่งชี้ว่า เครื่อง PCR แล้วอุณหภูมิของ 96 องศาเซลเซียสคุณตอนนี้ denature แม่แบบดีเอ็นเอของคุณ หรือแยกเป็นสอง strands เดียวของดีเอ็นเอ เลื่อนสาระหนึ่งหน้าของคุณ และภาพนิ่งเดอะสแตรนด์เสริมหน้าคู่ของคุณ3. อาจารย์จะบ่งชี้ว่า เครื่อง PCR ได้ลดลงอุณหภูมิของ50 องศาเซลเซียส คุณและคู่ของคุณอาจตอนนี้หลอมแบบไพรเมอร์ Oligonucleotide เพื่อฐานเสริมที่แต่ละแม่แบบดีเอ็นเอของขนเดียว หนึ่งคุณจะใช้การรอรองพื้นหนึ่งคุณจะใช้การกลับวัสดุรองพื้นขึ้นที่เดียวขนดีเอ็นเอแม่แบบที่คุณมีหน้าของคุณ (รองพื้นไปข้างหน้าจะตรงกับที่ซ้ายสุดของดีเอ็นเอแม่แบบที่หนึ่งและที่ตรงกันข้ามรองพื้นจะตรงกับค่าบนขวาสุดของอื่น ๆ ดีเอ็นเอต้นแบบ) วางของคุณลงเพื่อให้ฐานถูกต้องตรงกับของคุณแม่ดีเอ็นเอ4. อาจารย์จะบ่งชี้ว่า เครื่อง PCR มีความร้อนขึ้นอุณหภูมิของ60 องศาเซลเซียส คุณตอนนี้จะทำหน้าที่เป็น Taq DNA พอลิเมอเรส ขยายสาระเพิ่มเติมเอ็นออกจากคุณ Oligonucleotide รองพื้น base หนึ่งครั้ง การทำเช่นนี้ คุณและคู่ของคุณจะละอย่างคนตาบอดเลือกเป็นนิวคลีโอไทด์จากนิวคลีโอไทด์คว้ากระเป๋าa. ถ้านิวคลีโอไทด์ของคุณเลือกไม่ถูกต้องตรงกับการให้สอดคล้องกับยึดตามแม่แบบดีเอ็นเอ แล้วคุณต้องใส่กลับในนิวคลีโอไทด์ที่คว้าถุง และเลือกอีกครั้งถ้านิวคลีโอไทด์ของคุณเลือกได้อย่างถูกต้องตรงกับค่าฐานที่เกี่ยวข้องในแบบดีเอ็นเอแล้วคุณอาจวางมันลง และเทปตามรองพื้น5. ให้เลือกนิวคลีโอไทด์ และวางพวกเขาในสถานที่ เทป เทปแต่ละคนไปก่อนหน้าหนึ่ง จนกว่าคุณได้สมบูรณ์แล้วส่วนดีเอ็นเอทั้งสองขน สังเกตที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กระดาษ

และคู่มือนักเรียน ข้อมูล
คำว่า PCR เป็นตัวย่อที่ยืนสำหรับวลีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอร์เรส .
PCR เป็นเทคนิคทางวิทยาศาสตร์ที่ใช้ในการขยายหรือสร้างล้านสำเนาที่เหมือนกันของ ,
ลำดับดีเอ็นเอโดยเฉพาะ ภายในหลอดนิด คุณสามารถคิดวิธีนี้
คล้ายกับดีเอ็นเอที่เกิดขึ้นในเซลล์ของร่างกายของคุณทุกครั้งที่พวกเขาแยก
แต่ PCR ที่แตกต่างกันสองวิธีหลัก โดยเฉพาะเล่มแรก เป็นเขตเฉพาะของ
DNA ( มากกว่าจีโนมทั้งหมดของคุณ ) และอย่างที่สอง มันทำให้ล้านสำเนาดีเอ็นเอ
( มากกว่าหนึ่ง )
) เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพอย่างเหลือเชื่อที่นักวิทยาศาสตร์ใช้ในการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ เราอ้างถึง
เหล่านี้ชนิดของปฏิกิริยาเป็นปฏิกิริยา การเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอ ถึงแม้ว่าคนส่วนใหญ่จะเรียกพวกเขา
ปฏิกิริยา PCRคุณอาจจะคุ้นเคยกับการใช้ปฏิกิริยา PCR ในการตรวจดีเอ็นเอโปรไฟล์
มนุษย์หรือ " รอยนิ้วมือ " ที่สามารถใช้สำหรับการตรวจสอบการทดสอบความเป็นพ่อและ

การวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรม ดังนั้น สิ่งที่คุณต้องใส่ในหลอดนิดทำเพื่อตรวจหา DNA amplification
ตาม ? เราจัดการกับแต่ละองค์ประกอบหลักแยกต่างหากเพื่อให้คุณสามารถ
เข้าใจบทบาทที่แต่ละคนเล่น ในปฏิกิริยา
แม่แบบดีเอ็นเอ–นี้เป็นคู่ที่ควั่นดีเอ็นเอที่แยกได้จากเซลล์ของสิ่งมีชีวิตถูก
) มันสามารถเป็น DNA ของมนุษย์ดีเอ็นเอ , พืช DNA เมาส์
แบคทีเรียดีเอ็นเอ ดีเอ็นเอ อะไรก็ตามที่คุณต้องการคัดลอก ! จุดคือว่าถ้าคุณต้องการที่จะคัดลอก
บางอย่าง จากนั้นคุณต้องต้นแบบแม่แบบที่

เพื่อเริ่มต้นได้ดี–เอนไซม์ DNA polymerase สามารถเพิ่มขนาดจาก DNA
เกลียวในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ จะคล้ายคลึงกับการรับผิดชอบสำหรับการคัดลอกดีเอ็นเอมนุษย์
จีโนมของคุณทุกครั้งที่หนึ่งของเซลล์ร่างกายของคุณแบ่ง .
ซึ่งไพรเมอร์–เหล่านี้เป็นชิ้นเดียวควั่นดีเอ็นเอ
ตรงกับลำดับดีเอ็นเอ flanking ( ทั้งสองข้าง ) ของภูมิภาค
ดีเอ็นเอที่คุณต้องการคัดลอก หนึ่งคือรองพื้นไปข้างหน้าและเป็นย้อนกลับรองพื้น
เมื่อพวกเขาได้ผูกไว้กับผู้ประกอบใน genomic DNA
แม่แบบเกลียวพวกเขาแสดงได้ดีจุดเริ่มต้นการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ " โอลิโกส "
" ดีเอ็นเอ " รับผิดชอบเพื่อให้แน่ใจว่าเฉพาะเขตที่น่าสนใจคือ คัดลอก
นิวคลีโอไทด์ นิวคลีโอไทด์–ฟรีลอยเดี่ยวต้องมีอยู่ในปฏิกิริยาเพราะพวกเขาจะเกิดได้ดี
วางในสถานที่ในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ เราไม่สามารถคัดลอกดีเอ็นเอถ้าเรา
ไม่ได้มีอะไรที่จะทำให้สำเนาด้วย ดังนั้นเราต้องเป็น , TS , CS , และ GS ในหลอดปฏิกิริยาของเรา
.
แต่น่าเสียดายที่เราไม่สามารถแค่ไมโครปิเปตต์ทั้งหมดขององค์ประกอบเหล่านี้เป็นหลอดใหม่
และคาดว่าดีเอ็นเอเกลียวอย่างน่าอัศจรรย์สังเคราะห์ได้ มีอีกส่วนหนึ่งที่สำคัญเพื่อ PCR และนี่คือ


เทคนิคการขี่จักรยานการระบายความร้อน กระดาษเฉพาะ การเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิ หรือจักรยานความร้อนเป็นสิ่งที่ทำให้ PCR DNA amplification
ปฏิกิริยางาน มีสามที่แตกต่างกันอุณหภูมิที่เกี่ยวข้องและสิ่งที่เฉพาะเจาะจง
เกิดปฏิกิริยาส่วนประกอบในแต่ละอุณหภูมินั้น ดูแต่ละคน

หนึ่งแยกต่างหากขั้นตอนที่ 1 –ี่
ปฏิกิริยาผสม ร้อนถึง 96 ° C เพื่อให้คู่ตีเกลียว
แม่แบบดีเอ็นเอ และกลายเป็นผู้ผลิตเดียวติด ( อุณหภูมิสูงแยกไฮโดรเจน
พันธบัตรระหว่างฐานประกอบในคู่ที่ควั่นดีเอ็นเอ )
2 )
ปฏิกิริยาขั้นตอนการหลอมส่วนผสมเย็นลงถึง 50 ° C เพื่อให้ ซึ่งไพรเมอร์สามารถ
คู่ฐาน หรือหลอมไปแม่แบบดีเอ็นเอ ( เย็นนี้อุณหภูมิให้
พันธะไฮโดรเจนในรูปแบบระหว่างฐาน ขั้นที่ 3 –การเสริม )

ปฏิกิริยาส่วนผสมอุ่นขึ้นถึง 60 ° C ดังนั้นดีเอ็นเอพอลิเมอเรสได้ดีสามารถปฏิบัติงาน
การสังเคราะห์ดีเอ็นเอ แท็กสามารถรับรู้ ซึ่งใช้เป็นจุดเริ่มต้นสำหรับ
การสังเคราะห์ดีเอ็นเอ มันสามารถใส่ฟรีเบสลอยเข้าไปในสถานที่ตาม
ถูกต้องแม่แบบดีเอ็นเอเพื่อให้เส้นคู่ใหม่ของดีเอ็นเอจะขยายจาก

รองพื้น แล้วเราจะเอาหลอดเล็กปฏิกิริยาของเราที่จะไปผ่านชุดของอุณหภูมิ ?
หลอดวางอยู่ใน PCR เครื่องหรือวงจรความร้อน ซึ่งจะทำให้การเปลี่ยนอย่างรวดเร็ว
ระหว่างอุณหภูมิต่าง ๆ เวลาปฏิกิริยา ส่วนผสมอุ่นสำหรับ
ี่ , เย็นสำหรับขนาดของและเปิดสำหรับการขยายชิ้นส่วนดีเอ็นเอเพิ่มเติม
ตั้งขึ้น ปฏิกิริยาที่ผสมในหลอดเดียวเล็ก ๆสามารถสร้างล้านเล่มของ
1 . เป็นไปได้ยังไง ? ในรอบแรกของ PCR เพียงเริ่มต้นจีโนม
ดีเอ็นเอทำหน้าที่เป็นแม่แบบ อย่างไรก็ตาม ใน 2 รอบต่อไปของ PCR
สังเคราะห์ชุดใหม่ ยังสามารถใช้เป็นแม่แบบแนวคิดนี้จะกลายเป็นที่ชัดเจนว่า
คุณและคู่ของคุณเสร็จสมบูรณ์และกระดาษแบบกิจกรรมดังนี้ กิจกรรมภาพรวม

ในกิจกรรมนี้ คุณและคู่จะเล่นเป็นส่วนหนึ่งของดีเอ็นเอพอลิเมอเรสได้ดีอย่างที่คุณ
ขยาย หรือทำสำเนาหลายของลำดับ DNA เฉพาะดอกเบี้ย
ห้องเรียนทั้งหมดจะเป็นตัวแทนของ DNA Amplification ปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นพร้อมกันหลายในที่เดียว
หลอดปฏิกิริยา ครูของคุณจะเล่นเป็นส่วนหนึ่งของ PCR เครื่องกำกับหมดเวลา
การเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิในช่วงสามรอบของ PCR PCR


วัสดุกระดาษ 1 ดีเอ็นเอแม่แบบ ( สีฟ้า )
7 ชนิดไปข้างหน้า ( สีเขียว )
7 reverse primers ( สีเขียว )
1 นิวคลีโอไทด์คว้ากระเป๋า ( ซอง ) ที่มีดังต่อไปนี้ :
36 โดย
36 TS
36 36 GS CS

1 ม้วนเทปใสขั้นตอน

1 ค้นหาทั้งหมดของวัสดุที่ระบุไว้ข้างต้นวางออกคู่เกลียวดีเอ็นเอ
แม่แบบในหน้าของคุณและคู่ของคุณ รออาจารย์ของคุณ ( PCR machine )
เริ่มรอบแรกของ PCR .
2 ครูของคุณจะพบว่า PCR เครื่องได้ถึงอุณหภูมิ 96 ° C .
ตอนนี้คุณอาจนมแม่แบบดีเอ็นเอ หรือแยกเป็นสองเส้นเดียว
ดีเอ็นเอสไลด์เกลียวหนึ่งในหน้าของคุณและสไลด์เกลียวประกอบในหน้าพันธมิตรของคุณ
.
3 ครูของคุณจะพบว่า PCR เครื่องลดลงอุณหภูมิ
50 องศา คุณและคู่ของคุณตอนนี้อาจหลอม ซึ่งไพรเมอร์เพื่อ
ฐานประกอบที่ปลายแต่ละด้านของเดียวควั่นดีเอ็นเอแม่แบบ หนึ่งของ
คุณจะใช้รองพื้นไปข้างหน้าหนึ่งของ คุณจะใช้ Reverse ไพรเมอร์
ซึ่งขึ้นอยู่กับเดียวควั่นดีเอ็นเอแม่แบบที่คุณมีในหน้าของคุณ (
ส่งต่อรองพื้นจะตรงกับที่ซ้ายสุดของแม่แบบดีเอ็นเอ และย้อนกลับ
primer จะตรงบนขวาสุดของแม่แบบ ดีเอ็นเออื่น ๆ ) วาง
primer ลงเพื่อให้ถูกต้องตรงกับฐานที่เกี่ยวกับแม่แบบดีเอ็นเอของคุณ .
4ครูของคุณจะพบว่า PCR เครื่องร้อนขึ้นถึงอุณหภูมิ 60 องศา C .
ตอนนี้คุณจะแสดงเป็นดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ทัค ขยายเส้นของ DNA ซึ่งเป็น
จากไพรเมอร์ ซึ่งคุณ ฐานเวลา การทำเช่นนี้คุณ
และคู่ของคุณจะแต่ละสุ่มสี่สุ่มห้าเลือกเบสจากยีนที่คว้ากระเป๋า .
Aถ้าเบสของคุณเลือกไม่ได้ถูกต้องตรงกับฐานที่สอดคล้องกัน
แม่แบบดีเอ็นเอ จากนั้นคุณจะต้องใส่มันกลับในนิวคลีโอไทด์คว้ากระเป๋าและเลือกอีกครั้ง

. B . ถ้าเบสของคุณเลือกได้อย่างถูกต้องตรงกับที่ฐาน
แม่แบบดีเอ็นเอ แล้วคุณจะวางมันลงและเทปไปยังที่สุดของรองพื้น
.
5 ให้เลือกขนาด และใส่ไว้ในสถานที่เทปแต่ละตัวไปก่อนหน้านี้
หนึ่ง จนกว่าคุณจะเสร็จสมบูรณ์ทั้งคู่ที่ควั่นดีเอ็นเอ . สังเกตได้ว่า