The aim of this study was to purify

The aim of this study was to purify and characterize the lipase produced by Burkholderia sp. EQ3, a
bacterium isolated from the wastewater pond of a canned fish factory. The lipase was purified to homogeneity
with a 70-fold increase in its activity by chilled acetone precipitation, Q-Sepharose Fast Flow
and Sephadex G-50 column chromatography, respectively. The molecular mass of the purified lipase was
30.7 kDa. The purified lipase showed optimal activity at pH 7.0–7.5 and 30 ◦C. The enzyme was stable over
the pH range of 5.0–8.0 and temperatures between 30 and 55 ◦C for 1 h. Its half-life was 2 h at 55 ◦C. The
lipase activity was enhanced in the presence of Ca2+, Mg2+ and K+ while it was inactivated by Cu2+, Fe2+ and
Zn2+. It hydrolyzed the naturaltriglycerides with its highest activity on coconut oil(120%), olive oil(101%)
and palm olein (100%). Gum arabic (1%) significantly increased the lipase activity whereas 1.0 mM phenyl
methyl sulphonyl fluoride strongly reduced the activity. The purified lipase EQ3 retained 80% activity in
iso-propanol, but was inactivated by ethanol and iso-octane as well as other hydrophobic solvents. The
lipase EQ3 was immobilized by adsorption with Accurel MP-100 and used for wax esters synthesis and
compared with five commercial immobilized lipases (Lipozyme RM IM, Lipozyme TL IM, Novozyme 435,
Lipase PS and Lipase AK). The transesterification reaction was carried out between coconut oil, palm olein
and jatropha oil with oleyl alcohol by using 1 U of enzyme, a substrate molar ratio of oil and oleyl alcohol
of 1:3 in hexane at 37 ◦C and 150 rpm for 72 h. The immobilized lipase EQ3 was most efficient in the
synthesis of wax esters with 60.3, 49.6 and 50.1% wax esters from coconut oil, palm olein and jatropha
oil, respectively. For the five commercial immobilized lipases, Lipozyme RM IM exhibited the highest
wax esters synthesis with 49.2, 41.4 and 48.1% wax esters, respectively

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ ทำให้บริสุทธิ์ และเอนไซม์ไลเปสที่ผลิต โดย Burkholderia sp. EQ3 ลักษณะเป็นแบคทีเรียที่แยกจากบ่อบำบัดน้ำเสียของโรงงานปลากระป๋อง เอนไซม์ไลเปสที่บริสุทธิ์ไปเนื้อเดียวกันกับการเพิ่มขึ้น 70-fold ของกิจกรรมโดยฝนเย็นอะซิโตน Q Sepharose ไหลเร็วและ Sephadex G-50 คอลัมน์ chromatography ตามลำดับ คือมวลโมเลกุลของเอนไซม์ไลเปสที่บริสุทธิ์30.7 kDa เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์พบว่ากิจกรรมที่เหมาะสมที่สุดที่ pH 7.0 – 7.5 และ 30 ◦C เอนไซม์นี้มีเสถียรภาพมากกว่าช่วง pH 5.0-8.0 และอุณหภูมิระหว่าง 30 และ 55 ◦C สำหรับ 1 h ครึ่งชีวิตของมันคือ 2 ชม.ที่ 55 ◦C การเพิ่มกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสใน Ca2 + Mg2 + และ K + ในขณะที่มันถูกยก โดย Cu2 + Fe2 + และZn2 + มัน hydrolyzed naturaltriglycerides กับของกิจกรรมสูงสุดบน oil(120%) มะพร้าว มะกอก oil(101%)และปาล์มมา (100%) ภาษาอาหรับเหงือก (1%) เพิ่มกิจกรรมเอนไซม์ไลเปสในขณะที่ฟีนิล 1.0 มิลลิเมตรเมธิลฟลูออไรด์ sulphonyl ขอลดกิจกรรม เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์ EQ3 สะสม 80% กิจกรรมไร propanol iso แต่ถูกยก โดยเอทานอล และ iso นสูง เป็นสารไล่น้ำอื่น ๆ การเอนไซม์ไลเปส EQ3 ตรึง โดยการดูดซับกับ Accurel MP 100 และใช้สำหรับการสังเคราะห์เอสเทขี้ผึ้ง และเปรียบเทียบกับห้าค้าแบบตรึงผสม (Lipozyme RM IM, Lipozyme TL IM, Novozyme 435PS เอนไซม์ไลเปสและเอนไซม์ไลเปส AK) ปฏิกิริยาเพิ่มดำเนินการระหว่างน้ำมันมะพร้าว ปาล์มมาและน้ำมันสบู่ดำกับเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ oleyl โดยใช้ 1 U ของเอนไซม์ อัตราส่วนพื้นผิวโมเลกุลของน้ำมันและแอลกอฮอล์ oleylของเฮกเซนใน 1:3 ที่ 37 ◦C และ 150 rpm สำหรับ 72 ชั่วโมง เอนไซม์ไลเปสที่ถูกตรึงกับ EQ3 คือมีประสิทธิภาพสูงสุดในการสังเคราะห์ของเอสเทขี้ผึ้ง 60.3, 49.6 และ esters 50.1% ขี้ผึ้งจากน้ำมันมะพร้าว ปาล์มมา และสบู่ดำน้ำมัน ตามลำดับ สำหรับห้าค้าแบบตรึงผสม Lipozyme RM IM จัดแสดงสูงสุดขี้ผึ้งสังเคราะห์ esters ถึง 49.2, 41.4 และเอส เทขี้ผึ้ง 48.1% ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการชำระล้างและลักษณะของเอนไซม์ไลเปสที่ผลิตโดย Burkholderia SP EQ3 เป็น
แบคทีเรียที่แยกได้จากบ่อบำบัดน้ำเสียของโรงงานปลากระป๋อง ไลเปสบริสุทธิ์จะเป็นเนื้อเดียวกัน
กับการเพิ่มขึ้น 70 เท่าในกิจกรรมโดยการตกตะกอนแช่เย็นอะซิโตน, Q-Sepharose ด่วนไหล
และ Sephadex G-50 คอลัมน์ตามลำดับ มวลโมเลกุลของเอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์
30.7 กิโลดาลตัน ไลเปสบริสุทธิ์แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมที่ดีที่สุดที่ pH 7.0-7.5 และ 30 ◦C เอนไซม์ที่มีเสถียรภาพมากกว่า
ในช่วงที่ค่า pH 5.0-8.0 และอุณหภูมิระหว่าง 30 และ 55 ◦Cเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ครึ่งชีวิตของมันคือ 2 ชั่วโมงที่ 55 ◦C
กิจกรรมเอนไซม์ไลเปสได้รับการปรับปรุงในการปรากฏตัวของ Ca2 +, Mg2 + และ K + ในขณะที่มันถูกยกเลิกโดย Cu2 + Fe2 + และ
Zn2 + มันไฮโดรไลซ์ naturaltriglycerides กับกิจกรรมสูงสุดในน้ำมันมะพร้าว (120%) น้ำมันมะกอก (101%)
และปาล์มโอเลอิน (100%) หมากฝรั่งอาหรับ (1%) เพิ่มขึ้นอย่างมากของไลเปสในขณะที่ 1.0 มิลลิฟีนิล
เมธิล sulphonyl ฟลูออไรลดลงอย่างมากกิจกรรม EQ3 เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์สะสมกิจกรรม 80% ใน
ISO โพรพาน แต่ถูกยกเลิกโดยเอทานอลและ ISO ออกเทนเช่นเดียวกับตัวทำละลายกับน้ำอื่น ๆ
EQ3 เอนไซม์ไลเปสที่ถูกตรึงโดยการดูดซับด้วย Accurel MP-100 และใช้สำหรับการสังเคราะห์เอสเทอขี้ผึ้งและ
เมื่อเทียบกับห้าไลเปสตรึงพาณิชย์ (RM Lipozyme IM, Lipozyme TL IM, Novozyme 435,
เอนไซม์ไลเปสพีเอสและเอนไซม์ไลเปส AK) ปฏิกิริยา transesterification ได้ดำเนินการระหว่างน้ำมันมะพร้าวปาล์มโอเลอิน
และน้ำมันสบู่ดำกับเครื่องดื่มแอลกอฮอล์โดยใช้ oleyl 1 U ของเอนไซม์ที่เป็นสารตั้งต้นอัตราส่วนของน้ำมันและ oleyl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์
ของ 1: 3 ในเฮกเซนที่ 37 ◦Cและ 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง . EQ3 เอนไซม์ไลเปสตรึงมีประสิทธิภาพมากที่สุดใน
การสังเคราะห์ของขี้ผึ้ง esters กับ 60.3, 49.6 และ 50.1% ขี้ผึ้ง esters จากน้ำมันมะพร้าวปาล์มโอเลอินและสบู่ดำ
น้ำมันตามลำดับ สำหรับห้าไลเปสตรึงพาณิชย์ Lipozyme RM IM แสดงสูงสุด
สังเคราะห์ขี้ผึ้ง esters กับ 49.2, 41.4 และ 48.1% ขี้ผึ้ง esters ตามลำดับ