It has been reported that the commonly used method of extraction of photosynthetic pigments with aqueous acetone sometimes results in artifactual chlorophyllide formation [18,23]. In the present study, we determined the quantity of chlorophyllide formation before, during or after extraction of these pigments using several different methods of extraction. By suppressing CLH activity during extraction, we demonstrated that only trace amounts of chlorophyllide, if any, are present in cells prior to extraction (see Figures 4, ,5,5, ,77 and and8).8). We also showed that both chlorophyll and chlorophyllide are stable in acetone after extraction (Table 1). Therefore, it is unlikely that chlorophyllide is formed in the solvents after the extraction procedure is completed. Based on our collective results, we concluded that chlorophyllide is formed during the extraction process. We speculate that chlorophyllide is formed when acetone infiltrates the tissue, or when the tissue is homogenized in acetone. During these processes, the actual concentration of acetone to which cells are exposed may increase gradually rather than immediately, thus allowing an opportunity for aberrant enzymatic reactions to occur. Although CLH is known to precipitate in pure acetone, it is capable of remaining highly active in lower concentrations of aqueous acetone [18,27]. Therefore, it is likely that CLH catalyzes the formation of chlorophyllide during extraction until the actual acetone concentration reaches nearly 100%. This hypothesis explains the differential effects of DMF on chlorophyllide formation during chlorophyll extraction from different plant species (Figures 7 and and8).8). DMF suppressed chlorophyllide formation in Arabidopsis leaves almost perfectly, while it allowed chlorophyllide formation in other plant species whose leaves are thicker than Arabidopsis (Figure 8). These observations can be explained by the assumption that the infiltration of DMF occurs more slowly in thicker leaves as compared to in thinner leaves.
มีรายงานที่ ใช้โดยทั่วไปวิธีการสกัดสี photosynthetic ด้วยอะซีโตนอควีบางผลก่อ artifactual chlorophyllide [18,23] ในการศึกษาปัจจุบัน เรากำหนดก่อ chlorophyllide ก่อน ระหว่าง หรือหลัง จากการสกัดสีเหล่านี้หลายวิธีแตกต่างกันของการสกัดโดยใช้ปริมาณ โดยเมื่อ CLH กิจกรรมระหว่างสกัด ว่าเฉพาะติดตามจำนวนของ chlorophyllide ถ้ามี อยู่ในเซลล์ก่อนที่จะแยก (ดูเลข 4,, 5.5,, 77 และ and8) .8) เรายังพบทั้งคลอโรฟิลล์และ chlorophyllide มีเสถียรภาพในอะซิโตนหลังการแยก (ตารางที่ 1) ดังนั้น ก็ไม่น่า chlorophyllide ที่จะเกิดขึ้นในหรือสารทำละลายหลังจากเสร็จสิ้นกระบวนการสกัด ขึ้นอยู่กับผลรวมของเรา เราสรุป chlorophyllide ที่จะเกิดขึ้นในระหว่างกระบวนการแยก เราคาดการณ์ chlorophyllide ที่จะเกิดขึ้น เมื่อเนื้อเยื่อ infiltrates อะซิโตน หรือ เมื่อเนื้อเยื่อมี homogenized เป็นกลุ่มในอะซิโตน ในระหว่างกระบวนการเหล่านี้ ความเข้มข้นจริงของอะซีโตนจะสัมผัสกับเซลล์อาจเพิ่มค่อย ๆ แทนทันที จึง ให้โอกาส aberrant ปฏิกิริยาที่เอนไซม์ในระบบจะเกิดขึ้น แม้ว่า CLH เป็นที่รู้จักกันในอะซีโตนบริสุทธิ์ precipitate มันมีความสามารถในการคงเหลือใช้งานอย่างสูงในความเข้มข้นต่ำของอะซีโตนอควี [18,27] ดังนั้น ก็มีแนวโน้มว่า CLH catalyzes การก่อตัวของ chlorophyllide ในระหว่างการสกัดจนกว่าความเข้มข้นของอะซีโตนจริงถึงเกือบ 100% สมมติฐานนี้อธิบายผลแตกต่างของกรมเกี่ยวกับการก่อตัวของ chlorophyllide ในระหว่างการสกัดคลอโรฟิลล์จากพืชต่างชนิด (ตัวเลข 7 และ and8) .8) กรมระงับก่อ chlorophyllide ใน Arabidopsis ใบเกือบสมบูรณ์ ในขณะที่มันได้ก่อตัว chlorophyllide ชนิดอื่น ๆ พืชใบจะหนากว่า Arabidopsis (8 รูป) ข้อสังเกตเหล่านี้สามารถอธิบายได้ โดยสมมติฐานที่ว่า แทรกซึมของกรมเกิดขึ้นช้ามากในใบหนาเป็น compared เพื่อในบางใบไม้
การแปล กรุณารอสักครู่..
มันได้รับรายงานว่า มักใช้วิธีการสกัดด้วยสารละลายอะซิโตนรงควัตถุสังเคราะห์แสงคลอโรฟิลไลด์ artifactual บางครั้งผลลัพธ์ในรูปแบบ [ 18,23 ] ในการศึกษาครั้งนี้เราพบปริมาณคลอโรฟิลไลด์เกิดก่อนระหว่างหรือหลังจากการสกัดสารสีเหล่านี้โดยใช้หลายวิธีที่แตกต่างกันของการสกัดโดยการจัดกิจกรรม clh ในระหว่างการสกัดที่เราแสดงให้เห็นเพียงร่องรอยของคลอโรฟิลไลด์ ถ้าใด ๆ ที่มีอยู่ในเซลล์ก่อนการสกัด ( เห็นตัวเลข 4 , 5 , 5 , , 77 และ 8 ) 8 ) นอกจากนี้เรายังพบว่าทั้งคลอโรฟิลล์คลอโรฟิลไลด์คงที่ ) หลังจากการสกัด ( ตารางที่ 1 ) ดังนั้นมันไม่น่าที่คลอโรฟิลไลด์จะเกิดขึ้นในสารละลายหลังจากขั้นตอนการสกัดจะเสร็จสมบูรณ์ ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์โดยรวมของเรา เราพบว่า คลอโรฟิลไลด์เกิดขึ้นในระหว่างกระบวนการสกัด เราคาดการณ์ว่า คลอโรฟิลไลด์จะเกิดขึ้นเมื่ออะซิโตนแทรกซึมเนื้อเยื่อ หรือเมื่อเนื้อเยื่อบดในอะซิโตน ในระหว่างกระบวนการเหล่านี้จริงของอะซิโตนที่เซลล์สัมผัสอาจจะค่อยๆเพิ่มขึ้นมากกว่าทันที จึงทำให้โอกาสสำหรับปฏิกิริยาเอนไซม์ผิดปกติเกิดขึ้น แม้ว่า clh เป็นที่รู้จักกันตกตะกอนในบริสุทธิ์ Acetone มีความสามารถในการใช้งานสูงในที่เหลือลดความเข้มข้นของสารละลายอะซิโตน [ 18,27 ] ดังนั้นมันเป็นโอกาสที่ clh กระตุ้นการก่อตัวของคลอโรฟิลไลด์ระหว่างการสกัดอะซิโตนจนสมาธิจริงถึงเกือบ 100% สมมติฐานนี้จะอธิบายถึงความแตกต่างผลของ DMF ในการพัฒนาคลอโรฟิลไลด์ในระหว่างการสกัดคลอโรฟิลล์จากพืชชนิดต่างๆ ( ตัวเลข 7 และ 8 ) 8 ) ยยับยั้งสร้างคลอโรฟิลไลด์ใน Arabidopsis ใบเกือบสมบูรณ์ในขณะที่มันได้รับอนุญาตการสร้างคลอโรฟิลไลด์ในพืชชนิดอื่นที่มีใบจะหนากว่า Arabidopsis ( รูปที่ 8 ) ข้อสังเกตเหล่านี้สามารถอธิบายได้ด้วยสมมติฐานที่ว่าแทรกซึมของ DMF ขึ้นช้าๆ ใบหนา เมื่อเทียบกับในใบเรียว
การแปล กรุณารอสักครู่..