2.4. Cells preparation for nutrient

2.4. Cells preparation for nutrient modification
Cells of Synechocystis wild type, OE strains phaAB, phaEC and phaABEC were grown in 50 mL of BG11 medium (complete nutrients) until late log phase (OD730 1.2). The cultures were harvested by centrifugation at 2790 g, 15 min, room temperature and the cell pellets were washed twice with desired medium prior to the nitrogen deprivation experiment. For nitrogen deprived condition, washed cells were transferred to fresh BG110 medium (BG11 medium lacking NaNO3) in which ferric ammonium citrate and Co (NO3)2 6H2O were replaced with equimolar concentrations of ferric citrate and CoCl2 6H2O, respectively. Phosphorus deprived condition was achieved by replacing K2HPO4 in BG11 medium with equimolar concentration of KCl. The mixotrophic condition was obtained by supplementing acetate at a final concentration of 0.4% (w/v) to the medium without changing any other culture parameters.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. เซลล์เตรียมพร้อมสำหรับการเปลี่ยนแปลงสารอาหารเซลล์ของ Synechocystis ชนิดป่า OE สายพันธุ์ phaAB, phaEC และ phaABEC ที่ปลูกใน 50 มล.สาร BG11 (สารอาหารที่สมบูรณ์) จนถึงขั้นตอนการบันทึกเวลา (OD730 1.2) วัฒนธรรมถูกเก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2790 g, 15 นาที อุณหภูมิห้อง และเม็ดเซลล์ถูกล้างสองครั้ง ด้วยสื่อที่ต้องการก่อนการทดลองกีดกันไนโตรเจน สำหรับสภาวะขาดไนโตรเจน ล้างเซลล์ถ่ายโอนสด BG110 ปานกลาง (ปานกลาง BG11 ขาด NaNO3) ซิเตรทแอมโมเนีย ferric และ Co (NO3) ซึ่ง 2 6H2O ถูกแทนที่ ด้วย equimolar ความเข้มข้นของแหล่งซิเตรตและ CoCl2 6H2O ตามลำดับ สภาวะขาดฟอสฟอรัสสำเร็จ โดยการแทน K2HPO4 ใน BG11 ด้วย equimolar ความเข้มข้นของ KCl สภาพ mixotrophic ได้รับ โดยการเสริม acetate ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.4% (w/v) กับสื่อโดยไม่ต้องเปลี่ยนพารามิเตอร์อื่น ๆ ของวัฒนธรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การเตรียมความพร้อมสำหรับการปรับเปลี่ยนเซลล์สารอาหารที่
เซลล์ของไซยาโนแบคทีเรียชนิดป่า OE สายพันธุ์ phaAB, phaEC และ phaABEC ถูกปลูกใน 50 มลของกลาง BG11 (สารอาหารที่สมบูรณ์) จนกว่าขั้นตอนการเข้าสู่ระบบปลาย (OD730 1.2) วัฒนธรรมที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2,790 กรัม, 15 นาที, อุณหภูมิห้องและเม็ดเซลล์ถูกล้างครั้งที่สองที่มีขนาดกลางที่ต้องการก่อนที่จะมีการทดสอบการขาดไนโตรเจน สภาพไนโตรเจนปราศจากเซลล์ล้างถูกโอนไปยังกลาง BG110 สด (กลาง BG11 ขาด NaNO3) ซึ่งซิเตรตแอมโมเนียมเฟอริกและผู้ร่วม (NO3) 2 6H2O ถูกแทนที่ด้วยความเข้มข้นของ equimolar ซิเตรตและเฟอริก COCl2 6H2O ตามลำดับ ฟอสฟอรัสสภาพปราศจากก็ประสบความสำเร็จโดยการเปลี่ยน K2HPO4 ในสื่อที่มีความเข้มข้น BG11 equimolar ของโพแทสเซียมคลอไรด์ สภาพ mixotrophic ที่ได้รับโดยการเสริมอะซิเตทที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.4% (w / v) กลางโดยไม่ต้องเปลี่ยนพารามิเตอร์วัฒนธรรมอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การเตรียมสำหรับการดัดแปลงสารอาหารที่เซลล์เซลล์ชนิด synechocystis ป่าสายพันธุ์ phaab , OE , และเติบโตใน phaec phaabec 50 มิลลิลิตร bg11 ขนาดกลาง ( สารอาหารที่สมบูรณ์ ) จนถึงระยะปลายของ ( od730 1.2 ) วัฒนธรรมถูกเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยงที่ 2790 g 15 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และเซลล์เม็ดถูกล้างสองครั้งกับที่ต้องการสื่อก่อน ไนโตรเจน การทดลอง สำหรับไนโตรเจนขาดเงื่อนไข , ล้างเซลล์ที่ถูกโอนไปยังสื่อ bg110 สด ( bg11 กลางขาด NaNO3 ) ซึ่งในเตรทแอมโมเนียม CO ( 3 ) ขั้นที่ 2 6h2o ถูกแทนที่ด้วยๆความเข้มข้นของซิเตรตเหล็กและ cocl2 6h2o ตามลำดับ ฟอสฟอรัสเปลื้องได้โดยแทนที่สภาพ k2hpo4 ใน bg11 ขนาดกลางๆ ความเข้มข้นของโพแทสเซียม . สภาพ mixotrophic ได้ โดยเสริมอะซิเตตที่ความเข้มข้นสุดท้าย 0.4 % ( w / v ) สื่อโดยไม่มีการเปลี่ยนแปลงใด ๆของวัฒนธรรมอื่น ๆ