2.10. Cell metabolic activity and i

2.10. Cell metabolic activity and injury/death

Samples seeded with VICs were used to assess cell metabolic activity on the different substrates. After 2 and 7 days culture, samples were washed in PBS and incubated with 5 mg/mL MTT reagent in serum free medium (1:10 ratio) for 3 h at 37 °C in 5% CO2. Medium was extracted from each sample and converted dye was solubilized in 1 mL acidic isopropanol (0.04 m HCl in isopropanol) and vortexed to ensure that the dye dissolved completely. The solution was then transferred to a 96-well plate and read in a plate reader at 570 nm with background subtraction at 650 nm. Cell injury and death was measured via a commercially available lactate dehydrogenase (LDH) cytotoxicity assay (Promega, Fitchburg, WI). Briefly, cardiomyocytes were cultured on SANF scaffolds for 24 h and incubated with conditioned medium using the assay kit for 30 min at 37 °C. Absorbance at 490 nm was measured using a commercially available plate reader. Cells seeded on fibronectin treated PDMS coated glass coverslips served as a comparison.

2.11. Statistical analysis

All data were expressed as mean ± standard error (SEM). Statistical comparisons were done on normally distributed data using analysis of variance (ANOVA) and Tukey's post-hoc tests. ANOVA on ranks followed by Dunn's or Tukey's pairwise comparison was used to analyze data that was not normally distributed. A p-value of less than 0.05 was used as a measure for statistical significance.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.10. กิจกรรมการเผาผลาญเซลล์บาดเจ็บ/ตายตัวอย่างเตรียมกับ VICs ถูกใช้ในการประเมินกิจกรรมการเผาผลาญเซลล์บนพื้นผิวต่าง ๆ หลังจาก 2 และ 7 วันวัฒนธรรม ตัวอย่างล้างใน PBS และได้รับการกกกับรีเอเจนต์ MTT 5 mg/mL ฟรีในซีรั่ม (1:10 อัตราส่วน) สำหรับ 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C ใน 5% CO2 กลางถูกแยกจากแต่ละอย่าง และถูก solubilized แปลงย้อม 1 มิลลิลิตรกรด isopropanol (0.04 m HCl ใน isopropanol) และ vortexed เพื่อให้แน่ใจว่า สีย้อมที่ละลายอย่างสมบูรณ์ การแก้ปัญหาแล้วโอนย้ายไปยังแผ่น 96 ดี และอ่านในเครื่องอ่านแผ่น 570 nm กับลบพื้นหลังที่ 650 nm เซลล์ที่บาดเจ็บและเสียชีวิตที่มีวัดผ่านการทดสอบ cytotoxicity จำหน่ายนม dehydrogenase (LDH) (Promega แมดิสัน WI) สั้น ๆ cardiomyocytes ถูกเพาะเลี้ยงใน SANF เกิดใน 24 h และได้รับการกกกับปานกลางปรับใช้ชุดทดสอบ 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส Absorbance ที่ 490 nm มีวัดโดยใช้เครื่องอ่านแผ่นจำหน่าย เซลล์ยานยนต์บนถือ fibronectin PDMS เคลือบแก้ว coverslips เป็นการเปรียบเทียบ2.11. สถิติวิเคราะห์ข้อมูลทั้งหมดถูกแสดงเป็นข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย± (SEM) เปรียบเทียบเชิงสถิติได้ทำข้อมูลแจกจ่ายโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) และการทดสอบของ Tukey โพสต์เฉพาะกิจ ใช้ ANOVA ในยศตาม ด้วยของดันน์หรือของ Tukey เปรียบเทียบแพร์ไวส์วิเคราะห์ข้อมูลที่มีการแจกจ่ายที่ไม่ปกติ ค่า p ของน้อยกว่า 0.05 ถูกใช้เป็นวัดนัยสำคัญทางสถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.10 กิจกรรมการเผาผลาญของเซลล์และการบาดเจ็บ / เสียชีวิตตัวอย่างเมล็ดกับ VICs ถูกนำมาใช้ในการประเมินเซลล์กิจกรรมการเผาผลาญกับพื้นผิวที่แตกต่างกัน หลังจากวัฒนธรรม 2 และ 7 วัน, ตัวอย่างที่ถูกล้างในพีบีเอสและบ่ม 5 mg / ml MTT น้ำยาในซีรั่มขนาดกลางฟรี (01:10 Ratio) เป็นเวลา 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสใน 5% CO2 กลางถูกสกัดจากแต่ละตัวอย่างและเปลี่ยนสีย้อมถูกละลายใน 1 มิลลิลิตร isopropanol เป็นกรด (0.04 M HCl ใน isopropanol) และหมุนวนเพื่อให้มั่นใจว่าสีย้อมละลายได้อย่างสมบูรณ์ การแก้ปัญหานั้นก็ย้ายไปแผ่น 96 หลุมและอ่านในเครื่องอ่านแผ่นที่ 570 นาโนเมตรที่มีการลบฉากหลังที่ 650 นาโนเมตร ได้รับบาดเจ็บที่มือและความตายวัดผ่านใช้ได้ในเชิงพาณิชย์นม dehydrogenase (LDH) เป็นพิษทดสอบ (Promega ฟิตช์, WI) สั้น ๆ , cardiomyocytes เพาะเลี้ยงบนโครง SANF เป็นเวลา 24 ชั่วโมงและบ่มกับสื่อปรับอากาศโดยใช้ชุดทดสอบเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส การดูดกลืนแสงที่ 490 นาโนเมตรได้รับการวัดโดยใช้เครื่องอ่านแผ่นใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ เซลล์ในเมล็ด fibronectin รับการรักษา PDMS เคลือบ coverslips แก้วทำหน้าที่เป็นเปรียบเทียบ. 2.11 การวิเคราะห์สถิติข้อมูลทั้งหมดถูกแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐาน (SEM) การเปรียบเทียบทางสถิติได้กระทำในการกระจายข้อมูลตามปกติโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) และการทดสอบการโพสต์เฉพาะกิจของ Tukey การวิเคราะห์ความแปรปรวนในการจัดอันดับตามมาด้วยดันน์หรือการเปรียบเทียบจากจำนวนของ Tukey ถูกใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลที่ไม่ได้รับการกระจายตามปกติ P-ค่าน้อยกว่า 0.05 ได้ถูกใช้เป็นตัวชี้วัดความสำคัญทางสถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.10 . เซลล์การเผาผลาญอาหารและบาดเจ็บ / เสียชีวิตกิจกรรมตัวอย่างเมล็ด กับ เหยื่อถูกใช้เพื่อประเมินกิจกรรมการเผาผลาญเซลล์บนพื้นผิวที่แตกต่างกัน หลังที่ 2 และ 7 วัฒนธรรมวัน ตัวอย่างที่ล้างใน PBS บ่มด้วย 5 mg / ml เซรั่ม MTT กระทำปานกลางฟรี ( 1 : 10 อัตรา ) 3 H ที่ 37 ° C ในคาร์บอนไดออกไซด์ 5% ขนาดกลางถูกสกัดจากแต่ละตัวอย่าง และเปลี่ยนสีเป็นสารละลายในกรดไอโซโพรพานอล 1 มิลลิลิตร ( 0.04 M HCl ในไอโซโพรพานอล ) และ vortexed เพื่อให้แน่ใจว่าสีละลายอย่างสมบูรณ์ ทางออกได้ถูกโอนไปยังจานและ 96 ก็อ่านอ่านป้ายที่ 570 nm ด้วยการลบฉากหลังที่ 650 nm . การบาดเจ็บของเซลล์และการตายของวัดผ่าน lactate dehydrogenase ( LDH ) เซลล์ที่ใช้ในเชิงพาณิชย์ ( promega Fitchburg , การทดสอบ , WI ) สั้น ๆ , cardiomyocytes เพาะเลี้ยงบน sanf นั่งร้านสำหรับ 24 ชั่วโมง โดยสามารถใช้กับอาหาร ( ชุดสำหรับ 30 นาทีที่ 37 ° C ค่าการดูดกลืนแสงที่ 490 nm วัดใช้อ่านแผ่นสามารถใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ เซลล์เมล็ดบนไฟโบรเนกตินปฏิบัติโดยเคลือบแก้ว coverslips เสิร์ฟเป็นเปรียบเทียบ2.11 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลข้อมูลทั้งหมดถูกแสดงเป็นค่าเฉลี่ยความคลาดเคลื่อนมาตรฐาน± ( SEM ) การเปรียบเทียบสถิติทำในแบบปกติโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) และทดสอบ Post Hoc Tests . ในอันดับรองลงมา คือ ความดัน หรือคู่เป็นคู่เปรียบเทียบ เพื่อวิเคราะห์ข้อมูลที่ได้แบบปกติ เป็น p-value น้อยกว่า 0.05 ถูกใช้เป็นเกณฑ์ อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ