Flow cytometrySGC-7901 cells (4.5 ×

Flow cytometry
SGC-7901 cells (4.5 × 105 cells/plate) growing in six-well
plates were cultured for 24 h. Cells were divided into
eight groups—A: without nano-AE, pDNA and no light,
treated as blank control; B: pDNA group; C: nano-AE
group; D: nano-AE transfection group; E: pure light group;
F: pDNA and light group; G: nano-AE PDT group; H:
nano-AE transfection and PDT group. Groups A and E
were cultured with fresh culture RPMI 1640 medium
(1 mL) free of FBS. Groups C and G were incubated
with RPMI 1640 medium (1 mL) free of FBS with liposomes
(6 μL). Groups B, D, F, and H were incubated with the
mixture (1 mL) containing the nano-AE (6 μL) and pDNA
(2 μg). All groups were incubated for 6 h. The medium
was replaced with culture medium (2 mL) with FBS (10%)
and was cultured for 72 h. Cells were exposed (except
for the dark controls) to UV light from the LED at a
wavelength of 430 nm and an energy density of 40 mw/
cm2 for 160 sec (the final energy density of 6.4 J/cm2).
Cells were then cultured for 12 h in the dark. All cells
were harvested for Annexin V/PI double staining and
measured using a BD FACScalibur flow cytometry system
(BD Bioscience, Franklin lakes, NJ).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การตรวจวิเคราะห์เซลล์เติบโตในดีหกเซลล์ SGC 7901 (4.5 × 105 เซลล์/จาน)แผ่นมีอ่างสำหรับ 24 h. เซลล์ถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มที่ 8 — a:นาโน-AE, pDNA และไม่มี แสงถือว่าเป็นตัวควบคุมว่าง B:กลุ่ม pDNA C:นาโน-AEกลุ่ม D:กลุ่มนาโน-AE transfection E:บริสุทธิ์สว่างกลุ่มF:กลุ่มแสง และ pDNA G:กลุ่มนาโน-AE PDT H:นาโน-AE transfection และกลุ่ม PDT กลุ่ม A และ Eมีอ่าง ด้วยสื่อวัฒนธรรมสด RPMI 1640(1 mL) ฟรีของ FBS กลุ่ม C และ G ได้รับการกกกับ RPMI 1640 ปานกลาง (1 mL) ฟรีของ FBS liposomes(6 ΜL) ได้รับการกกกลุ่ม B, D, F และ H ด้วยการส่วนผสม (1 mL) ที่ประกอบด้วยนาโน-AE (6 μL) และ pDNA(2 ไมโครกรัม) กลุ่มทั้งหมดได้รับการกก 6 ชม สื่อถูกแทนที่ ด้วยวัฒนธรรมกลาง (2 mL) กับ FBS (10%)และอ่างสำหรับ 72 h. เซลล์ได้สัมผัส (ยกเว้นตัวควบคุมเข้ม) กับ UV แสงจาก LED ในการความยาวคลื่น 430 นาโนเมตรและมีความหนาแน่นของพลังงานของ 40 mw /ซม. 2 160 วินาที (สุดท้ายพลังงานความหนาแน่นของ 6.4 J/cm2)เซลล์ได้แล้วอ่างสำหรับ 12 ชม.ในมืด เซลล์ทั้งหมดได้เก็บเกี่ยว Annexin V/ปี่ คู่ย้อม และวัดโดยใช้ระบบการตรวจวิเคราะห์เซลล์ไหล BD FACScalibur(BD วิทยาศาสตร์ชีวภาพ แฟรงคลินทะเลสาบ NJ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

flow cytometry
เซลล์ SGC-7901 (4.5 × 105 เซลล์ / แผ่น) การเจริญเติบโตใน Six-ดี
จานเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์ที่ถูกแบ่งออกเป็น
แปดกลุ่ม A: โดยไม่ต้องนาโน AE, pDNA และแสงไม่
ได้รับการรักษาควบคุมที่ว่าง; B: กลุ่ม pDNA; C: นาโน AE
กลุ่ม; D: นาโน AE กลุ่ม transfection; E: กลุ่มแสงอันบริสุทธิ์;
F: pDNA และกลุ่มแสง; G: กลุ่มนาโน AE PDT; H:
นาโน AE transfection และกลุ่ม PDT กลุ่ม A และ E
เลี้ยงกับวัฒนธรรมสด RPMI 1640 กลาง
(1 มิลลิลิตร) ฟรี FBS กลุ่ม C และ G ถูกบ่ม
กับ RPMI 1640 กลาง (1 มิลลิลิตร) ฟรี FBS กับไลโปโซม
(6 ไมโครลิตร) กลุ่ม B, D, F และ H ถูกบ่มกับ
ส่วนผสม (1 มิลลิลิตร) มีนาโน AE (6 ไมโครลิตร) และ pDNA
(2 ไมโครกรัม) ทุกกลุ่มได้รับการบ่มเป็นเวลา 6 ชั่วโมง สื่อที่
ถูกแทนที่ด้วยสื่อวัฒนธรรม (2 มิลลิลิตร) กับ FBS (10%)
และเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 72 ชั่วโมง เซลล์ได้สัมผัส (ยกเว้น
สำหรับการควบคุมเข้ม) กับแสงยูวีจาก LED ที่
ความยาวคลื่น 430 นาโนเมตรและความหนาแน่นของพลังงานจาก 40 เมกะวัตต์ /
cm2 160 วินาที (ความหนาแน่นของพลังงานขั้นสุดท้ายของ 6.4 J / cm2).
เซลล์แล้วเพาะเลี้ยง สำหรับ 12 ชั่วโมงในที่มืด ทุกเซลล์
ที่ถูกเก็บเกี่ยวสำหรับ Annexin V / PI ย้อมสีคู่และ
วัดโดยใช้การไหล BD FACSCalibur ภูมิคุ้มกันระบบ
(BD ชีววิทยาศาสตร์แฟรงคลินทะเลสาบ, นิวเจอร์ซีย์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เครื่องนับเซลล์sgc-7901 เซลล์ ( 4.5 × 105 เซลล์ / จาน ) เติบโตในหกดีจานเพาะเลี้ยงเซลล์แบ่งออกเป็น 24 ชั่วโมงแปด groups-a : ไม่มีนาโน เอ pdna และไม่มีแสงถือว่าเป็นการควบคุมว่าง ; B : pdna กลุ่ม ; C : นาโน เอกลุ่ม ; D : นาโนสำหรับกลุ่มเอ ; E : กลุ่มแสงบริสุทธิ์F : pdna และแสงกลุ่ม ; G : นาโนเอรายกลุ่ม เอช :นาโนเอสำหรับ PDT และกลุ่ม กลุ่ม A และ Eเพาะเลี้ยง RPMI 1640 ร่วมกับวัฒนธรรมสดขนาดกลาง( 1 มล. ) ฟรีของ FBS กลุ่ม C และ G ถูกบ่มด้วย RPMI 1640 ขนาดกลาง ( 1 มล. ) ฟรีของ FBS กับไลโปโซม( 6 μ L ) กลุ่ม B , D , F , H ถูกบ่มกับส่วนผสม ( 1 มิลลิลิตร ) ผสมนาโนเอ ( 6 μ L ) และ pdna( 2 μกรัม ) ทุกกลุ่มมี 6 ชั่วโมง ) ขนาดกลางถูกแทนที่ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ ( 2 มล. ) กับ FBS ( 10 % )และถูกเลี้ยงเป็นเวลา 72 ชั่วโมง เซลล์ที่ถูกเปิดเผย ( ยกเว้นสำหรับการควบคุมเข้ม UV แสงจาก LED ที่ความยาวคลื่น 430 nm และความหนาแน่นพลังงานของ 40 MW /CM2 160 วินาที ( สุดท้ายความหนาแน่นพลังงานของ 6.4 J / cm2 )เซลล์ แล้วเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 12 ชั่วโมงในที่มืด ทุกเซลล์เก็บสำหรับของเซลล์ v / ปี่สองชนิดวัดการไหล facscalibur BD ( ระบบ( BD วิทยาศาสตร์ชีวภาพ Franklin Lakes , NJ )