The Bsp143I enzyme (Fermentas, Germ

The Bsp143I enzyme (Fermentas, Germany) was used to
digest the final PCR product of the spa gene. The procedures
were according to the instructions of Fermentas
Co.: 10 μL (~ 0.1-0.5 μg of DNA) of PCR reaction mixture
was added to 18 μL of nuclease-free water, 2 μL of 10X buffer
x Bsp143I buffer, and 2 μL of Bsp143I. The mixture was
mixed gently and spin down for a few seconds and incubated
at 37°C for four hours. Afterwards, Bsp143I was inactivated
by incubation at 65°C for 20 minutes. The OLIGO
software version 5 was also applied to detect the restriction
sites on the gene. The restriction sites of this enzyme
are outside the X region and it recognizes the “GATC” sequence.
The final products after Bsp143I digestion were
analyzed by electrophoresis on 1.5% gel. Finally, they were
compared with S. aureus strain 8325-4 on NCBI.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เอนไซม์ Bsp143I (Fermentas เยอรมนี) ถูกใช้ในการย่อยผลิตภัณฑ์ PCR ขั้นสุดท้ายของยีนสปา ขั้นตอนการได้ตามคำแนะนำของ Fermentasบริษัท: 10 μL (~ 0.1-0.5 μg ของดีเอ็นเอ) ของส่วนผสมของปฏิกิริยา PCRเพิ่มการ μL 18 ฟรี nuclease น้ำ μL 2 บัฟเฟอร์ X 10บัฟเฟอร์ x Bsp143I และ μL 2 ของ Bsp143I มีส่วนผสมผสมเบา ๆ และหมุนลงกี่วินาที และ incubatedที่ 37° C สำหรับสี่ชั่วโมง Bsp143I ถูกยกเลิกภายหลังโดยบ่มที่ 65° C 20 นาที OLIGOซอฟต์แวร์เวอร์ชัน 5 ยังใช้เพื่อตรวจสอบข้อจำกัดไซต์บนยีน อเมริกาจำกัดของเอนไซม์นี้อยู่นอกภูมิภาค X และจะรู้จักลำดับ "GATC"ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายหลังจากย่อยอาหาร Bsp143Iวิเคราะห์ โดย electrophoresis ในเจล 1.5% สุดท้าย พวกเมื่อเทียบกับ S. หมอเทศข้างลายต้องใช้ 8325 4 NCBI

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ Bsp143I (Fermentas, เยอรมนี) ถูกใช้ในการ
แยกแยะสินค้า PCR สุดท้ายของยีนสปา ขั้นตอน
ที่ถูกตามคำแนะนำของ Fermentas
Co .: 10 ไมโครลิตร (~ 0.1-0.5 ไมโครกรัมของ DNA) ของผสมปฏิกิริยา PCR
ถูกบันทึกอยู่ใน 18 ไมโครลิตรน้ำนิฟรี 2 ไมโครลิตรของ 10X บัฟเฟอร์
x บัฟเฟอร์ Bsp143I และ 2 ไมโครลิตร ของ Bsp143I ส่วนผสมที่ได้รับการ
ผสมเบา ๆ และหมุนลงไม่กี่วินาทีและบ่ม
ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสี่ชั่วโมง หลังจากนั้น Bsp143I ถูกยกเลิก
โดยการบ่มที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที Oligo
ซอฟต์แวร์รุ่น 5 นอกจากนี้ยังถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบข้อ จำกัด
เว็บไซต์บนยีน เว็บไซต์ข้อ จำกัด ของเอนไซม์นี้
อยู่นอกภูมิภาค X และตระหนักถึง "GATC" ลำดับ.
ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายหลังจากการย่อยอาหาร Bsp143I ถูก
วิเคราะห์โดย electrophoresis บน 1.5% เจล ในที่สุดพวกเขาก็ถูก
เมื่อเทียบกับสายพันธุ์เชื้อ S. aureus 8325-4 ใน NCBI

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ bsp143i เอนไซม์ ( fermentas , เยอรมนี ) คือใช้
ย่อยสุดท้ายของยีนดีเอ็นเอผลิตภัณฑ์สปา . ขั้นตอน
เป็นตามคำแนะนำของ fermentas
. : 10 μ L ( ~ μกรัมสารละลาย DNA ) เพื่อตรวจหาส่วนผสม
เพิ่ม 18 μลิตรนิวเคลียสน้ำฟรี 2 μผม 10x บัฟเฟอร์
x bsp143i บัฟเฟอร์ และ 2 μ l bsp143i ส่วนผสมคือ
ผสมเบา ๆ และหมุนลงเพื่อไม่กี่วินาทีและบ่ม
ที่ 37 ° C เป็นเวลาสี่ชั่วโมง หลังจากนั้น bsp143i ถูก inactivated
โดยการบ่มที่ 65 ° C เป็นเวลา 20 นาที ส่วนโอลิโก
ซอฟแวร์รุ่น 5 ยังใช้เพื่อตรวจสอบข้อกำหนด
เว็บไซต์ในจีน จำกัดเว็บไซต์ของเอนไซม์
เป็นนอก x ภูมิภาคและมันรู้จัก " gatc " ลำดับ .
ผลิตภัณฑ์สุดท้ายหลังจากการย่อย bsp143i ถูก
วิเคราะห์โดยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซีสบน 1.5 % เจล ในที่สุดพวกเขา
เมื่อเทียบกับ S . aureus สายพันธุ์ 8325-4 บน ncbi .