2.4. Partitioning of oxygen consumption
2.4.1. Bimodal intermittent-closed respirometry
In a further 12 fish (46±5 g), aquatic oxygen uptake (MO2w) was
measured as described above, and the same intermittent-closed
respirometry principle applied to the air phase to measure aerial
oxygen uptake (MO2a). A diagram of the bimodal intermittent-closed
respirometry system is shown in Fig. 2A. PO2 of the air phase (PO2a, see
Fig. 2B and C) was measured using a mini optic O2 sensor (Fibox3,
PreSens Precision Sensing GmbH, Regensburg, Germany) and data
collected by accompanying software (OxyView PST3, V6.02, PreSens
Precision Sensing GmbH, Regensburg, Germany). The system consisted
of a plexiglass chamber submerged in water, with a small air-breathing
chamber of plastic on top. The inlet and outlet of air were sealed with
solenoid valves (Type 6013, Bürkert Fluid Control Systems, Ingelfingen,
Germany) connected to the computer controlled relays. An air pump,
connected to the inlet, blew fresh air into the chamber when the valves
were opened, and this flushing of the air phase was only performed
during the intervals where water flushing was turned off (i.e., during
measurement ofMO2w). This prevented changes inwater level and thus
changes in the air space volume. The air chamberwas flushed for 1 min
every hour, after which the outlet solenoid remained open for a further
2 min to prevent changes in air pressure during closure of the inlet
solenoid valve. During aquatic hypoxia, PO2w was lowered by bubbling
thewater phase with N2 gas. The necessary flow of N2 gaswas adjusted
manually until the required steady state PO2w was reached.
2.4.2. Experimental protocol
Aerial and aquaticMO2weremeasured in a group of fish in normoxic
(19.1±0.5kPa) and hypoxic (6.5±0.9kPa) water, where the level of
hypoxia was below the Pcrit estimate. Both groups had access to
normoxic air, a water temperature of 29.6±0.3 °C and had fasted for
24 h before experiments. The fish were placed in the respirometer at
5–6 pm, and aerial and aquatic MO2 (MO2a and MO2w, respectively)
were measured in 0.5-h intervals for approximately 22 h. Background
MO2 was subsequently determined for both phases. In water the
backgroundMO2was the sumof bacterialMO2 and diffusion of O2 from
the air phase into the water. The contribution from diffusion between
the two phases was negligible in normoxia, but it was necessary to
include it in calculations of MO2w and MO2a during hypoxia.
2.4.3. Data analysis
MO2w was calculated for all points as described above, while MO2a
was determined from the decline in PO2 in the air phase (PO2a; data
examples are shown in Fig. 2B and C). The data trace from the optic O2
sensor was analyzed by calculation of a slope for each interval (ΔPO2a)
as in water phase respirometry. This ΔPO2a was then corrected for the
decline caused by diffusion into the water (~1.28 mg O2 h−1), which
only occurred during hypoxia.MO2a was calculated from ΔPO2a using a
standard curvemade by injecting known volumes of N2 gas into the air
chamber, removing the same volume of mixed air and N2, and
correlating the volume of N2 gas with the corresponding ΔPO2a. The
volume of oxygen displaced was then 20.95% of the corresponding N2
volume. This system also allowed for a determination of breathing
frequency (fb). However, somefish had such a high breathing frequency
in hypoxia that single breaths were difficult to identify, causing an
underestimation of fb. SMRwas estimated as the average of the 5 lowest
points of total MO2.
2.4 การพาร์ทิชันของปริมาณการใช้ออกซิเจน2.4.1. bimodal ขาด ๆ หาย ๆ ปิด respirometryในการเพิ่มเติมถูกดูดซับออกซิเจนน้ำ (MO2w) ปลา 12 (46±5 g),วัดที่อธิบายข้างต้น และเหมือนไม่ต่อเนื่องปิดใช้ระยะอากาศวัดทางอากาศหลัก respirometryดูดซับออกซิเจน (MO2a) ไดอะแกรมของแบบ bimodal ปิดไม่ต่อเนื่องระบบ respirometry จะแสดงใน Fig. 2A PO2 ระยะอากาศ (PO2a ดูFig. 2B และ C) ถูกวัดโดยใช้มินิใย O2 เซนเซอร์ (Fibox3PreSens แม่นยำ Sensing GmbH, Regensburg เยอรมนี) และข้อมูลรวบรวม โดยมาพร้อมกับซอฟต์แวร์ (OxyView PST3, V6.02, PreSensความแม่นยำตรวจ GmbH, Regensburg เยอรมนี) ระบบประกอบด้วยของหอ plexiglass จมอยู่ในน้ำ หายใจอากาศขนาดเล็กท่อพลาสติกด้านบน ทางเข้าของและเต้าเสียบของเครื่องถูกปิดสนิทด้วยวาล์ว solenoid (ชนิด 6013 ระบบควบคุมน้ำมัน Bürkert, Ingelfingenเยอรมนี) เชื่อมต่อกับรีเลย์ควบคุมคอมพิวเตอร์ เป็นเครื่องสูบลมเชื่อมต่อกับทางเข้าของ ได้พัดอากาศเป็นห้องเมื่อลิ้นเปิดปิดเปิด และนี้ลบระยะอากาศเท่าทำในระหว่างช่วงเวลาที่น้ำลบถูกปิด (เช่นวัด ofMO2w) นี้ไม่สามารถ inwater การเปลี่ยนแปลงระดับ และทำการเปลี่ยนแปลงในปริมาตรช่องว่างอากาศ Chamberwas แอร์ล้างใน 1 นาทีทุกชั่วโมง หลังจาก solenoid ร้านยังคงเปิดเป็น2 นาทีเพื่อป้องกันการเปลี่ยนแปลงในความดันอากาศระหว่างปิดทางเข้าของsolenoid วาล์ว ระหว่างน้ำ hypoxia, PO2w ถูกลดลง โดยพัทยาระยะ thewater กับก๊าซ N2 ปรับปรุงขั้นตอนการจำเป็นของ N2 gaswasด้วยตนเองจนครบตามต้องใช้ท่อน PO2w2.4.2 การทดลองการใช้โพรโทคอลชั้นและ aquaticMO2weremeasured ในกลุ่มของปลา normoxic(19.1±0.5kPa) น้ำแปร (6.5±0.9kPa) ซึ่งระดับของhypoxia ด้านล่างการประเมิน Pcrit ทั้งสองกลุ่มได้เข้าถึงnormoxic อากาศ อุณหภูมิน้ำของ 29.6±0.3 ° C และมีอดสำหรับเออก่อนทดลอง ปลาไว้ใน respirometer ที่5 – 6 น. และทางอากาศ และทางน้ำ MO2 (MO2a และ MO2w ตามลำดับ)มีวัดในช่วง 0.5-h ประมาณ 22 h. พื้นหลังต่อมาได้กำหนด MO2 สำหรับทั้งสองระยะ ในน้ำbackgroundMO2was sumof bacterialMO2 และแพร่ของ O2 จากระยะอากาศในน้ำ เงินสมทบจากแพร่ระหว่างระยะสองระยะใน normoxia แต่มันจำเป็นต้องรวมในการคำนวณของ MO2w และ MO2a ในช่วง hypoxia2.4.3. ข้อมูลวิเคราะห์MO2w ถูกคำนวณสำหรับจุดทั้งหมดที่อธิบายข้างต้น ในขณะที่ MO2aกำหนดจากการลดลงของ PO2 ในระยะอากาศ (PO2a ข้อมูลตัวอย่างมีแสดงใน Fig. 2B และ C) การติดตามข้อมูลจาก O2 ใยแก้วนำแสงเซนเซอร์ถูกวิเคราะห์ โดยการคำนวณความชันในแต่ละช่วง (ΔPO2a)เป็นในน้ำระยะ respirometry ΔPO2a นี้ถูกแก้ไขแล้วสำหรับการลดลงเกิดจากแพร่ในน้ำ (~1.28 mg O2 h−1), ซึ่งเกิดขึ้นเฉพาะ ช่วง hypoxia MO2a ถูกคำนวณจากการใช้ ΔPO2a การcurvemade มาตรฐาน โดย injecting ทราบปริมาณของแก๊ส N2 ในอากาศหอการค้า ลบไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันของอากาศแบบผสมและ N2 และกำลังรวบรวมปริมาตรของก๊าซ N2 กับ ΔPO2a ที่สอดคล้องกัน ที่ปริมาณของออกซิเจนที่พลัดถิ่นถูกแล้ว 20.95% ของ N2 ที่สอดคล้องกันไดรฟ์ข้อมูล ระบบนี้ยัง อนุญาตให้สำหรับการกำหนดหายใจความถี่ (fb) อย่างไรก็ตาม somefish มีความถี่การหายใจสูงเช่นใน hypoxia ที่เดียวหายใจยาก ทำให้เกิดการunderestimation ของ fb ประเมินเป็นค่าเฉลี่ยของ 5 ต่ำสุด SMRwasจุดรวม MO2
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 พาร์ทิชันของการใช้ออกซิเจน
2.4.1 Bimodal respirometry
เนื่องปิดในอีก12 ปลา (46 ± 5 กรัม) การดูดซึมออกซิเจนน้ำ (MO2w)
ได้รับการวัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและต่อเนื่องปิดเดียวกันหลักการ
respirometry
นำไปใช้ในขั้นตอนการอากาศในการวัดอากาศออกซิเจน(MO2a) . แผนภาพของเนื่องปิด bimodal
ระบบ respirometry แสดงในรูป 2A PO2 เฟสอากาศ (PO2a
ให้ดูรูปที่. 2B และ C) ได้รับการวัดโดยใช้มินิแก้วนำแสงเซ็นเซอร์ O2 (Fibox3,
PreSens ความแม่นยำในการตรวจจับ GmbH, Regensburg, เยอรมนี)
และข้อมูลที่เก็บรวบรวมโดยซอฟแวร์ที่มาพร้อมกับ(OxyView PST3, V6.02, PreSens
ความแม่นยำในการตรวจจับ GmbH, Regensburg, เยอรมนี) ระบบประกอบด้วยห้องลูกแก้วจมอยู่ใต้น้ำในน้ำที่มีอากาศหายใจขนาดเล็กห้องจากพลาสติกด้านบน ทางเข้าและทางออกของอากาศที่ถูกปิดผนึกด้วยวาล์วขดลวดแม่เหล็กไฟฟ้า (ชนิด 6013, Bürkertระบบควบคุมของไหล Ingelfingen, เยอรมนี) เชื่อมต่อกับรีเลย์ควบคุมคอมพิวเตอร์ ปั๊มอากาศที่เชื่อมต่อกับทางเข้าพัดอากาศบริสุทธิ์เข้าไปในห้องเมื่อวาล์วเปิดและล้างเฟสอากาศนี้ได้ดำเนินการเฉพาะในระหว่างช่วงเวลาที่ล้างน้ำถูกปิด(กล่าวคือในช่วงการวัด ofMO2w) ป้องกันไม่ให้เกิดการเปลี่ยนแปลงนี้ inwater ระดับและทำให้การเปลี่ยนแปลงในปริมาณพื้นที่อากาศ chamberwas อากาศล้างเป็นเวลา 1 นาทีทุกชั่วโมงหลังจากที่โซลินอยร้านยังคงเปิดอยู่อีก2 นาทีเพื่อป้องกันไม่ให้การเปลี่ยนแปลงในความดันอากาศในระหว่างการปิดทางเข้าวาล์วขดลวดแม่เหล็กไฟฟ้า ในระหว่างการขาดออกซิเจนในน้ำลดลง PO2w โดยฟองเฟสก๊าซN2 thewater การไหลที่จำเป็นของ N2 gaswas ปรับตนเองจนความมั่นคงของรัฐต้องPO2w ก็มาถึง. 2.4.2 โปรโตคอลการทดลองทางอากาศและ aquaticMO2weremeasured อยู่ในกลุ่มของปลาใน normoxic (19.1 ± 0.5kPa) และ hypoxic (6.5 ± 0.9kPa) น้ำที่ระดับของออกซิเจนต่ำกว่าประมาณการPcrit ทั้งสองกลุ่มมีการเข้าถึงอากาศ normoxic อุณหภูมิของน้ำ 29.6 ± 0.3 องศาเซลเซียสและได้อดอาหาร 24 ชั่วโมงก่อนที่จะทดลอง ปลาที่ถูกวางไว้ใน respirometer ที่5-6 นและ MO2 ทางอากาศและทางน้ำ (MO2a และ MO2w ตามลำดับ) วัดในช่วงเวลา 0.5 ชั่วโมงประมาณ 22 ชั่วโมง พื้นหลังMO2 ถูกกำหนดสำหรับขั้นตอนต่อมาทั้งสอง ในน้ำbackgroundMO2was sumof bacterialMO2 และการแพร่กระจายของ O2 จากเฟสอากาศลงไปในน้ำ ผลงานจากการแพร่กระจายระหว่างทั้งสองขั้นตอนได้เล็กน้อยใน normoxia แต่มันก็เป็นสิ่งจำเป็นที่จะรวมไว้ในการคำนวณของMO2w และ MO2a ในระหว่างการขาดออกซิเจน. 2.4.3 การวิเคราะห์ข้อมูลMO2w ที่คำนวณได้สำหรับทุกจุดตามที่อธิบายไว้ข้างต้นในขณะที่ MO2a ถูกกำหนดจากการลดลงของ PO2 ในช่วงอากาศ (PO2a; ข้อมูลตัวอย่างที่แสดงในรูปที่2B และ C.) ร่องรอยข้อมูลจาก O2 แก้วนำแสงเซ็นเซอร์ได้รับการวิเคราะห์โดยการคำนวณของความลาดชันสำหรับแต่ละช่วงเวลา(ΔPO2a) เช่นเดียวกับในเฟสน้ำ respirometry ΔPO2aนี้ถูกแก้ไขแล้วสำหรับการลดลงที่เกิดจากการแพร่กระจายลงไปในน้ำ (~ 1.28 มิลลิกรัม O2 H-1) ซึ่งเพียงแต่เกิดขึ้นในช่วง hypoxia.MO2a ที่คำนวณได้จากΔPO2aใช้curvemade มาตรฐานโดยการฉีดปริมาณที่รู้จักกันของก๊าซ N2 ขึ้นไปในอากาศในห้องลบปริมาณเดียวกันของอากาศผสมและ N2 และความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณของก๊าซN2 กับΔPO2aที่สอดคล้องกัน ปริมาณของออกซิเจนย้ายได้แล้ว 20.95% ของ N2 สอดคล้องปริมาณ ระบบนี้ยังได้รับอนุญาตสำหรับการกำหนดหายใจความถี่ (FB) อย่างไรก็ตาม somefish ได้เช่นการหายใจความถี่สูงในการขาดออกซิเจนที่หายใจเดียวเป็นเรื่องยากที่จะระบุสาเหตุของเบาของFB SMRwas ประมาณเป็นค่าเฉลี่ยของ 5 ต่ำสุดจุดจากทั้งหมดMO2
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 . การใช้ออกซิเจน
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย .
respirometry ไบโมดอลแบบปิดในอีก 12 ปลา ( 46 ± 5 กรัม ) , ออกซิเจนน้ํา ( mo2w ) คือ
วัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและเดียวกันต่อเนื่องปิด
respirometry หลักการที่ใช้กับอากาศระยะวัดออกซิเจนอากาศ
( mo2a ) แผนภาพของไบโมดอลต่อเนื่องปิด
respirometry ระบบแสดงในรูปที่ 2A .po2 ของอากาศ ( ( po2a ดู
รูปที่ 2B และ C ) การวัดแสงเซนเซอร์ ( O2 mini fibox3
พเรเซนสความแม่นยำ , การ GmbH , วีสบาเดิน , เยอรมนี ) และข้อมูลที่เก็บรวบรวมโดยมาพร้อมกับซอฟต์แวร์ (
oxyview pst3 v6.02 พเรเซนส
, , ยําข้อมูล GmbH , วีสบาเดิน , เยอรมนี ) ระบบประกอบด้วย
ของห้องลูกแก้วแช่ในน้ำที่มีขนาดเล็กอากาศหายใจ
ห้องพลาสติกด้านบนทางเข้าและทางออกของอากาศที่ถูกผนึกด้วย
Solenoid Valves ( ประเภท 1 , B ü rkert ของไหลควบคุมระบบ ingelfingen
, เยอรมนี ) เชื่อมต่อกับคอมพิวเตอร์ควบคุมรีเลย์ . แอร์ปั๊ม ,
เชื่อมต่อกับขาที่พัดอากาศบริสุทธิ์เข้าไปในห้องเมื่อวาล์ว
ถูกเปิด และด้วยอากาศระยะเพียงดำเนินการในช่วงเวลาที่น้ำล้าง
ปิดในระหว่าง
( เช่นการวัด ofmo2w ) นี้ป้องกันการเปลี่ยนแปลงและการเปลี่ยนแปลงในระดับปาน
ในอากาศพื้นที่ปริมาตร อากาศ chamberwas หน้าแดง 1 นาที
ทุกชั่วโมง หลังจากที่ร้าน solenoid ยังคงเปิดสำหรับอีก
2 นาทีเพื่อป้องกันการเปลี่ยนแปลงในความดันอากาศในช่วงปิดของปากน้ำ
solenoid วาล์ว ในน้ำภาวะ po2w ลดลง โดยมีเสียงน้ำด้วย N2
ระยะก๊าซการไหลที่จำเป็นของ N2 gaswas
ด้วยตนเองจนต้องปรับสถานะคงตัว po2w ครบ
2.4.2 . ทดลองโปรโตคอล
ทางอากาศและ aquaticmo2weremeasured ในกลุ่มของปลาใน normoxic
( 19.1 ± 0.5kpa ) และติดตั้ง ( 6.5 ± 0.9kpa ) น้ำที่ระดับออกซิเจน pcrit
ต่ำกว่าประมาณการ ทั้งสองกลุ่มมีการเข้าถึง
normoxic อากาศ น้ำอุณหภูมิราว± 0.3 องศา C และทรงอดอาหาร
24 ชั่วโมง ก่อนการทดลอง ปลาที่ถูกวางไว้ใน respirometer ที่
5 – 6 โมงเย็น และ ทางอากาศและทางน้ำ mo2 ( mo2a และ mo2w ตามลำดับ )
0.5-h วัดในช่วงเวลาประมาณ 22 ชั่วโมง หลัง
mo2 ต่อมาได้ทั้งระยะ ในน้ำ
backgroundmo2was ที่ sumof bacterialmo2 และการแพร่ของออกซิเจนจากอากาศ
เฟสลงไปในน้ำผลงานจากการแพร่กระจายระหว่าง
สองขั้นตอนสำคัญในวิทยาศาสตร์ แต่มันเป็นเรื่องจำเป็น
รวมในการคำนวณ mo2w mo2a และระหว่างสังคม
2.4.3 . การวิเคราะห์ข้อมูล mo2w
ถูกคำนวณสำหรับคะแนนตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ในขณะที่ mo2a
ถูกกำหนดจากการลดลงของ po2 ในอากาศ ( ( po2a ตัวอย่างข้อมูลที่แสดงในรูปที่ 2B
C ) ข้อมูลที่สืบค้นจาก O2
จักษุเครื่องมือวิเคราะห์โดยการคำนวณความลาดชันในแต่ละช่วงเวลา ( Δ po2a )
ใน respirometry เฟสน้ำ นี้Δ po2a ก็แก้ไขให้
ลดลงเกิดจากการแพร่กระจายไปในน้ำ ( ~ 1.28 มก. O2 H − 1 ) ซึ่งเกิดขึ้นในช่วง hypoxia.mo2a
เพียงแต่คำนวณจากΔ po2a ใช้
curvemade มาตรฐานโดยการฉีดหรือปริมาณก๊าซ N2 ในอากาศ
ห้องถอดปริมาณเดียวกันของ N2 และอากาศผสม และปริมาณก๊าซ N2
เทียบเคียงกับ po2a Δสอดคล้องกัน
ปริมาณออกซิเจนที่พลัดถิ่นก็ 20.95 % ของปริมาณ N2
ที่สอดคล้องกัน ระบบนี้ยังอนุญาตให้กำหนดลมหายใจ
ความถี่ ( FB ) อย่างไรก็ตาม somefish มีความถี่สูงหายใจ
ขาดออกซิเจนที่หายใจเดียวยากที่จะระบุสาเหตุการ
การประเมินค่าต่ำไปของ FB smrwas ประมาณเป็นค่าเฉลี่ยของค่า
5 จุด mo2 ทั้งหมด
การแปล กรุณารอสักครู่..
