Test procedurei) The antigen is an

Test procedure
i) The antigen is an aqueous extract of bacteria from which lipid has been removed (strain
M. paratuberculosis 316F). Mycobacterium avium D9 may also be used.
ii) All sera are inactivated in the water bath at 60°C for 30 minutes and diluted at 1/4, 1/8 and
1/16. A positive control serum and a negative control serum should be included on each
plate. The following controls are also prepared: antigen control, complement control and
haemolytic system control.
iii) Reconstituted, freeze-dried complement is diluted to contain six times H50 (50%
haemolysing dose) as calculated by titration against the antigen.
iv) Sheep erythrocytes, 2.5%, are sensitised with 2 units of H100 haemolysin.
v) All dilutions and reagents are prepared in calcium/magnesium veronal buffer; 25 µl
volumes of each reagent are used in 96-well round-bottom microtitration plates.
vi) Primary incubation is at 4°C overnight and secondary incubation is at 37°C for 30 minutes.
vii) Reading and interpreting the results: Plates may be left to settle or centrifuged and read as
follows: 4+ = 100% fixation, 3+ = 75% fixation, 2+ = 50% fixation, 1+ = 25% fixation and
0 = complete haemolysis. The titre of test sera is given as the reciprocal of the highest
dilution of serum giving 50% fixation. A reaction of 2+ at 1/8 is regarded as positive.
Results should be interpreted in relation to clinical signs and other laboratory findings.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขั้นตอนการทดสอบi antigen)เป็นสารสกัดจากแบคทีเรียจากสารละลายไขมันซึ่งได้ถูกเอาออก (สายพันธุ์M. paratuberculosis 316F) ยังอาจใช้มัยโคแบคทีเรีย avium D9ii) ทั้งหมดจะยกในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 60 ° C นาน 30 นาที และเจือจางที่ 1/4, 1/8 และ1/16 เซรั่มควบคุมบวกและเซรั่มควบคุมค่าลบควรถูกรวมในแต่ละแผ่น จัดตัวควบคุมต่อไปนี้: ควบคุม antigen เสริมควบคุม และhaemolytic ระบบควบคุมiii) ถูกสร้างขึ้น เสริมกรอบจะเจือจางมี H50 หกครั้ง (50%ยา haemolysing) คำนวณ โดยการไตเตรทกับ antigeniv) แกะเม็ดเลือดแดง 2.5% จะบอบบางกับ 2 หน่วย haemolysin h 100v) dilutions ทั้งหมดและสารเตรียมไว้ในบัฟเฟอร์แคลเซียม/แมกนีเซียม veronal 25 µlปริมาณของสารแต่ละที่ใช้ในแผ่นดี 96 รอบล่าง microtitrationvi) กกไข่หลักอยู่ที่ 4 ° C ค้างคืน และรองบ่ม 37 ° C นาน 30 นาทีvii) การอ่าน และแปลผล: แผ่นอาจจะต้องชำระ หรือเหวี่ยง และอ่านดังต่อไปนี้: 4 + =ขนาด 100%, 3 + =ขนาด 75%, 2 + =ขนาด 50%, 1 + =มีขนาด 25% และ0 = haemolysis สมบูรณ์ Titre ของการทดสอบจะถูกกำหนดเป็นส่วนกลับของสูงที่สุดผสมของซีรั่มที่ให้มีขนาด 50% ปฏิกิริยาของ 2 + 1/8 จะถือเป็นบวกผลลัพธ์ควรตีความสัมพันธ์กับอาการทางคลินิกและผลการวิจัยห้องปฏิบัติการอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขั้นตอนการทดสอบ
i) แอนติเจนเป็นสารสกัดน้ำของเชื้อแบคทีเรียจากการที่ไขมันได้ถูกลบออก (สายพันธุ์
เอ็ม paratuberculosis 316F) Mycobacterium avium D9 นอกจากนี้อาจใช้.
ii) ซีรั่มทั้งหมดจะถูกยกเลิกไปในอ่างน้ำที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีและเจือจางที่ 1/4, 1/8 และ
1/16 เซรั่มควบคุมบวกและเชิงลบในซีรั่มควบคุมควรจะรวมอยู่ในแต่ละ
จาน การควบคุมต่อไปนอกจากนี้ยังมีการเตรียมการควบคุมแอนติเจนเสริมการควบคุมและการ
. ระบบควบคุม haemolytic
iii) การสร้างส่วนประกอบแห้งเป็นเจือจางจะมีหกครั้ง H50 (50%
haemolysing ยา) ตามที่คำนวณได้จากการไตเตรทกับแอนติเจน.
IV) เม็ดเลือดแดงแกะ 2.5%, ไวมี 2 หน่วย H100 haemolysin.
V) เจือจางทั้งหมดและสารเคมีมีการเตรียมแคลเซียม / แมกนีเซียม veronal บัฟเฟอร์; 25 ไมโครลิตร
ปริมาณของแต่ละน้ำยาที่ใช้ใน 96 หลุมแผ่น microtitration รอบด้านล่าง.
VI) บ่มประถมที่ 4 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืนและการบ่มที่สองคือที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที.
vii) การอ่านและการตีความผล: แผ่นอาจ จะเหลือที่จะชำระหรือปั่นและอ่านเป็น
ดังนี้ 4+ = 100 ตรึง% 3+ = 75% ตรึง 2+ = 50% ตรึง 1+ ตรึง = 25% และ
0 = เม็ดเลือดแตกสมบูรณ์ titre ซีรั่มของการทดสอบจะได้รับเป็นซึ่งกันและกันของผู้สูงสุด
เจือจางของซีรั่มให้ตรึง 50% ปฏิกิริยาของ 2+ ที่ 1/8 ได้รับการยกย่องเป็นบวก.
ผลควรจะตีความในความสัมพันธ์กับอาการทางคลินิกและผลการตรวจทางห้องปฏิบัติการอื่น ๆ