To further confirm the interactions

To further confirm the interactions between MaERF9 and -11 and MaACO1 observed in the Y2H assay, this study performed a BiFC assay in tobacco BY-2 protoplasts. MaERF9 or MaERF11 tagged with pSPYNE (split YFP N-terminal fragment expression) and MaACO1 tagged with pSPYCE (split YFP C-terminal fragment expression) were transiently co-expressed in tobacco BY-2 protoplasts following PEG transfection. A robust YFP fluorescent signal was detected in the nucleus of BY-2 cells which expressed MaERF9-pSPYNE or MaERF11-pSPYNE and MaACO1-pSPYCE (Fig. 7). No YFP fluorescent signal was observed either in the cells which expressed MaERF9 or -11-pSPYNE with only the pSPYCE or in those expressed MaACO1-pSPYCE with only the pSPYNE (Fig. 7). Similar results were also observed when MaERF9/MaERF11-pSPYCE were co-transfected with MaACO1-pSPYNE (Fig. 7). These results of Y2H and BiFC assays not only demonstrate in vitro and in vivo interactions between MaERF9 and -11 and MaACO1, but also the specific localization of the interacting proteins in the nucleus.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ศึกษานี้ทำทดสอบ BiFC ในยาสูบ BY 2 โปต่อ ยืนยันการโต้ตอบระหว่าง MaERF9 และ-11 และ MaACO1 ในการทดสอบ Y2H MaERF9 หรือ MaERF11 ติดแท็ก ด้วย pSPYNE (แยกนิพจน์ส่วนสถานี YFP N) และ MaACO1 ที่ติดแท็ก ด้วย pSPYCE (แยกนิพจน์ส่วน YFP C เทอร์มินัล) transiently ร่วมแสดงในโปยาสูบ BY 2 วิธี PEG transfection สัญญาณฟลูออเรส YFP แข็งแรงพบในนิวเคลียสของเซลล์ BY 2 ซึ่งแสดง MaERF9 pSPYNE หรือ MaERF11-pSPYNE และ MaACO1-pSPYCE (Fig. 7) ไม่มีสัญญาณฟลูออเรส YFP ถูกพบในเซลล์ที่แสดง MaERF9 หรือ-11-pSPYNE เท่านั้น pSPYCE หรือผู้แสดง MaACO1 pSPYCE มีเฉพาะ pSPYNE (Fig. 7) ผลคล้ายถูกยังสังเกตเมื่อ MaERF9/MaERF11-pSPYCE ได้ transfected ร่วมกับ MaACO1-pSPYNE (Fig. 7) Y2H และ BiFC assays ผลลัพธ์เหล่านี้ไม่เพียงแต่แสดงให้เห็นในหลอดทดลอง และสัตว์ทดลองในการโต้ตอบระหว่าง MaERF9 และ-11 และ MaACO1 แต่ยังแปลเฉพาะของโปรตีน interacting ในนิวเคลียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อเป็นการยืนยันการปฏิสัมพันธ์ระหว่าง MaERF9 และ -11 และ MaACO1 ตั้งข้อสังเกตในการทดสอบ Y2H การศึกษานี้ดำเนินการทดสอบ BIFC ในยาสูบ BY-2 protoplasts MaERF9 หรือ MaERF11 ติดแท็กด้วย pSPYNE (แยก YFP แสดงออกส่วน N-Terminal) และ MaACO1 ติดแท็กด้วย pSPYCE (แยก YFP แสดงออกส่วน C-มินัล) เป็น transiently ร่วมแสดงในยาสูบ BY-2 protoplasts ต่อไปนี้ transfection PEG ที่แข็งแกร่งสัญญาณเรืองแสง YFP ถูกตรวจพบในนิวเคลียสของ BY-2 เซลล์ซึ่งแสดง MaERF9-pSPYNE หรือ MaERF11-pSPYNE และ MaACO1-pSPYCE (รูปที่. 7) ไม่มี YFP สัญญาณเรืองแสงก็สังเกตเห็นอย่างใดอย่างหนึ่งในเซลล์ซึ่งแสดง MaERF9 หรือ -11-pSPYNE มีเพียง pSPYCE หรือในสิ่งที่ได้แสดง MaACO1-pSPYCE มีเพียง pSPYNE (รูปที่. 7) ผลที่คล้ายกันนอกจากนี้ยังได้ตั้งข้อสังเกตเมื่อ MaERF9 / MaERF11-pSPYCE ถูก transfected ร่วมกับ MaACO1-pSPYNE (รูปที่. 7) ผลลัพธ์เหล่านี้ของ Y2H และการตรวจ BIFC ไม่เพียง แต่แสดงให้เห็นในหลอดทดลองและในการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างร่างกายและ MaERF9 -11 และ MaACO1 แต่ยังการแปลที่เฉพาะเจาะจงของโปรตีนที่มีปฏิสัมพันธ์ในนิวเคลียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพิ่มเติม ยืนยันระหว่าง maerf9 และ - 11 และ maaco1 สังเกตใน y2h โดยการศึกษานี้ได้ทำการ bifc assay ในยาสูบ by-2 พลาสต์ . maerf9 หรือ maerf11 แท็กด้วย pspyne ( แยก yfp กรดอะมิโนส่วนการแสดงออก ) และ maaco1 แท็กด้วย pspyce ( แยก yfp ส่วนการแสดงออกซึ่งเป็นบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวร่วมแสดงออกในยาสูบ by-2 เอนไซม์ตรึงต่อไปสำหรับ .ประสิทธิภาพ yfp ฟลูออเรสเซนต์สัญญาณที่ตรวจพบในนิวเคลียสของเซลล์ซึ่งแสดงออก by-2 maerf9 pspyne หรือ maerf11 และ pspyne maaco1 pspyce ( รูปที่ 7 ) ไม่มีสัญญาณ yfp เรืองแสง พบทั้งในเซลล์ที่แสดง maerf9 หรือ - 11 pspyne เท่านั้น pspyce หรือในผู้ที่แสดง maaco1 pspyce pspyne เท่านั้น ( รูปที่ 7 )ผลที่คล้ายกันพบเมื่อ maerf9 / maerf11 pspyce เป็น Co transfected กับ maaco1 pspyne ( รูปที่ 7 ) ผลของ y2h ) และไม่เพียง แต่แสดงให้เห็นถึง bifc ในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลอง และปฏิสัมพันธ์ระหว่าง maerf9 - 11 และ maaco1 แต่ยังเฉพาะท้องถิ่นของปฏิสัมพันธ์โปรตีนในนิวเคลียส