Melatonin showed a pro-oxidant effe

Melatonin showed a pro-oxidant effect,
reduced BCL-2 expression and induced a
caspase-3-independent cell death in P19 cells
with oxidative metabolism
The disruption of the mitochondrial electron transport
chain results in a higher reactive oxygen species (ROS)
production [26]. Differentiated P19 cells (Glu-dCCs and
Gal-dCCs) presented higher malondialdehyde (MDA)
content, a classical marker of oxidative stress, when
compared to their stem counterparts (p < 0.001). Similarly,
cells cultured in galactose (glucose-free), glutamine/
pyruvate- containing media (Gal-CSCs and Gal-dCCs) also
presented higher MDA content than their high glucosecultured
counterparts. Despite these basal differences, 1 mM
melatonin significantly increased MDA levels in all P19 cell
groups compared to their corresponding controls (p < 0.001),
especially in cells cultured in galactose medium (Figure
2D). This effect may be related with the ability of melatonin
to decrease the proliferation rate of highly oxidative cells.
Intriguingly, although 0.1 mM melatonin also impacted
oxygen consumption of cells cultured in galactose media,
this concentration also exhibited an antioxidant effect.
Since excessive ROS production by mitochondria
plays a preponderant role in mitochondrial outer
membrane permeabilization, we investigated alterations
in BCL-2 and BAX protein content. We found no
changes in BAX content in whole-cell extracts in any
of the analyzed cell groups. However, melatonin-treated
cells cultured in galactose media showed a decreased
content of the antiapoptotic protein BCL-2, while this
effect was not found when cells were grown in high
glucose media (Figure 3A). The observed decrease of
BCL-2 content in melatonin-treated and galactosecultured
cells suggests that the intrinsic apoptotic
pathway may have been activated. However, our data
did not show the expected increase in caspase-3-like
activity (Figure 3B). Interestingly, untreated Gal-CSCs
show the highest activity of caspase-3 when compared
to Glu-CSCs (p < 0.001). This observation may occur
as consequence of the forced metabolic remodeling and
its associated differentiation process induced by the
galactose (glucose-free), glutamine/pyruvate- containing
medium. Nonetheless, the calcein-AM and propidium
iodide Live/Dead assay confirmed that 1 mM melatonin
increases the percentage of dead cells (calcein-/
propidium iodide+) in cell populations with higher
mitochondrial metabolism (Gal-CSCs and Gal-dCCs;
p < 0.001). Moreover, this effect was also detected in
Glu-dCCs (p

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แสดงผลสนับสนุนอนุมูลอิสระ เมลาโทนินลด BCL 2 นิพจน์ และเกิดการเซลล์อิสระ caspase-3 ตายในเซลล์ P19มี oxidative เผาผลาญทีมของการขนส่งอิเล็กตรอน mitochondrialผลลูกโซ่ชนิดปฏิกิริยาออกซิเจนสูง (ROS)ผลิต [26] แตกต่างกันที่เซลล์ P19 (Glu dCCs และGal-dCCs) นำเสนอสูงกว่า malondialdehyde (MDA)เนื้อหา เครื่องหมายคลาสสิกความเครียด oxidative เมื่อเมื่อเทียบกับคู่ของก้าน (p < 0.001) ในทำนองเดียวกันเซลล์อ่างในกาแล็กโทสน้ำตาลกลูโคสฟรี), glutamine /pyruvate - ประกอบด้วยสื่อ (CSCs กัลและกัล dCCs) ยังนำเสนอเนื้อหา MDA สูงกว่า glucosecultured ของพวกเขาสูงคู่นี้ แม้ มีโรคต่าง 1 mMเมลาโทนินเพิ่มระดับ MDA ในเซลล์ P19 ทั้งหมดกลุ่มเปรียบเทียบกับการควบคุมที่สอดคล้องกัน (p < 0.001),โดยเฉพาะอย่างยิ่งในอ่างในกาแล็กโทส (รูปเซลล์2D) ได้ผลนี้อาจเกี่ยวข้องกับความสามารถของเมลาโทนินเพื่อลดอัตราการงอกของเซลล์ oxidative สูงIntriguingly แม้ว่าเมลาโทนิน 0.1 มม.ยังผลกระทบต่อปริมาณการใช้ออกซิเจนของเซลล์อ่างกาแล็กโทสสื่อความเข้มข้นนี้ยังจัดแสดงผลเป็นสารต้านอนุมูลอิสระตั้งแต่ผลิต ROS มากเกินไปโดย mitochondriaมีบทบาท preponderant ใน mitochondrial นอกpermeabilization เมมเบรน เราตรวจสอบเปลี่ยนแปลงในเนื้อหาโปรตีน BAX และ BCL-2 เราพบไม่การเปลี่ยนแปลงในเนื้อหา BAX ในสารสกัดจากเซลล์ทั้งหมดในกลุ่มเซลล์ที่วิเคราะห์ อย่างไรก็ตาม เมลาโทนินถือเซลล์ที่อ่างกาแล็กโทสสื่อแสดงให้เห็นการลดลงเนื้อหาของโปรตีน antiapoptotic BCL-2 ขณะนี้ผลไม่พบเมื่อเซลล์ถูกปลูกสูงสื่อกลูโคส (รูปที่ 3A) สังเกตลดลงBCL 2 เนื้อหาถือว่าเมลาโทนินและ galactoseculturedเซลล์แนะนำที่ intrinsic apoptoticทางเดินอาจมีการเรียกใช้งาน อย่างไรก็ตาม ข้อมูลไม่ได้แสดงการเพิ่มคาดใน caspase-3-ชอบกิจกรรม (รูปที่ 3B) เป็นเรื่องน่าสนใจ ไม่ถูกรักษากัล CSCsแสดงกิจกรรมสูงสุดของ caspase-3 เมื่อเปรียบเทียบการ Glu-CSCs (p < 0.001) สังเกตดูอาการนี้อาจเกิดขึ้นเป็นผลมาจากการเผาผลาญการบังคับเปลี่ยนแปลง และเกิดจากกระบวนการสร้างความแตกต่างที่เกี่ยวข้องทางการกาแล็กโทสน้ำตาลกลูโคสฟรี), glutamine/pyruvate - มีสื่อ กระนั้น calcein AM และ propidiumไอโอไดด์ Live/ตาย วิเคราะห์ยืนยันว่า เมลาโทนิน 1 มม.เพิ่มเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ตายแล้ว (calcein- /propidium ไอโอไดด์ +) ในเซลล์กลุ่มประชากรที่มีสูงขึ้นเผาผลาญ mitochondrial (CSCs กัลและกัล-dCCsพี < 0.001) นอกจากนี้ ผลนี้ยังพบในGlu dCCs (p < 0.001) ซึ่งแนวโน้มการลดลงชีวิตถูกวัด โดยวิเคราะห์ trypan blue สุดท้ายเมลาโทนิน 0.1 มม.นอกจากนี้ยังเพิ่มเปอร์เซ็นต์ของคนตายเซลล์แต่ในเซลล์ที่เติบโตในกาแล็กโทสน้ำตาลกลูโคสฟรี),glutamine/pyruvate-ประกอบด้วยขนาดกลาง (รูปที่ 3C)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เมลาโทนิได้แสดงให้เห็นผลกระทบที่มีโปรอนุมูลอิสระ
ลดการแสดงออก BCL-2 และเหนี่ยวนำให้เกิด
การตายของเซลล์ caspase-3-อิสระในเซลล์ P19
กับการเผาผลาญอาหารออกซิเดชัน
การหยุดชะงักของการขนส่งอิเล็กตรอนยล
ผลในห่วงโซ่ออกซิเจนสูงกว่า (ROS)
ผลิต [26 ] แตกต่างเซลล์ P19 (Glu-dCCs และ
Gal-dCCs) นำเสนอ Malondialdehyde สูงกว่า (MDA)
เนื้อหาเครื่องหมายคลาสสิกของความเครียดออกซิเดชันเมื่อ
เทียบกับ counterparts ต้นกำเนิดของพวกเขา (p <0.001) ในทำนองเดียวกัน
เซลล์เพาะเลี้ยงในกาแลคโต (กลูโคสฟรี), glutamine /
pyruvate- มีสื่อ (Gal-CSCS และ Gal-dCCs) นอกจากนี้ยัง
นำเสนอเนื้อหาที่สูงขึ้นกว่าภาคตะวันออกเฉียงเหนือ glucosecultured สูงของพวกเขา
counterparts แม้จะมีความแตกต่างพื้นฐานเหล่านี้ 1 มิลลิ
เมลาโทนิอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มขึ้นในระดับภาคตะวันออกเฉียงเหนือในเซลล์ P19 ทุก
กลุ่มเมื่อเทียบกับการควบคุมที่สอดคล้องกัน (p <0.001)
โดยเฉพาะอย่างยิ่งในเซลล์เพาะเลี้ยงในอาหารกาแลคโต (รูป
แบบ 2 มิติ) ผลกระทบนี้อาจจะเกี่ยวข้องกับความสามารถของเมลาโทนิ
เพื่อลดอัตราการแพร่กระจายของเซลล์ออกซิเดชันสูง.
Intriguingly แม้ว่า 0.1 มิลลิเมลาโทนิยังส่งผลกระทบต่อ
การใช้ออกซิเจนของเซลล์เพาะเลี้ยงในสื่อกาแลคโต,
ความเข้มข้นนี้ยังแสดงผลสารต้านอนุมูลอิสระ.
ตั้งแต่การผลิตที่มากเกินไปโดย ROS mitochondria
มีบทบาทสำคัญยิ่งในด้านนอกยล
เมมเบรน permeabilization เราตรวจสอบการเปลี่ยนแปลง
ใน BCL-2 และปริมาณโปรตีน BAX เราพบว่าไม่มี
การเปลี่ยนแปลงเนื้อหาใน BAX ทั้งสารสกัดจากเซลล์ใน
กลุ่มเซลล์วิเคราะห์ แต่เมลาโทนิได้รับการรักษา
เซลล์เพาะเลี้ยงในสื่อแสดงให้เห็นว่ากาแลคโตลดลง
เนื้อหาของโปรตีน antiapoptotic BCL-2 ขณะนี้
มีผลไม่พบเมื่อเซลล์ถูกปลูกในที่สูง
สื่อกลูโคส (รูปที่ 3A) ลดลงสังเกตของ
เนื้อหา BCL-2 ในเมลาโทนิได้รับการรักษาและ galactosecultured
แสดงให้เห็นว่าเซลล์ apoptotic ภายใน
ทางเดินอาจจะถูกเปิดใช้งาน อย่างไรก็ตามข้อมูลของเรา
ไม่ได้แสดงการเพิ่มขึ้นคาดว่าใน caspase-3-เช่น
กิจกรรม (รูปที่ 3B) ที่น่าสนใจได้รับการรักษา Gal-CSCS
แสดงกิจกรรมสูงสุดของ caspase-3 เมื่อเทียบกับ
การ Glu-CSCS (p <0.001) ข้อสังเกตนี้อาจเกิดขึ้น
เป็นผลมาจากการเปลี่ยนแปลงการเผาผลาญบังคับและ
ความแตกต่างของกระบวนการที่เกี่ยวข้องที่เกิดจาก
กาแลคโต (กลูโคสฟรี), glutamine / pyruvate- ที่มี
ขนาดกลาง อย่างไรก็ตาม calcein-AM และ propidium
ไอโอไดด์สด / ทดสอบตายยืนยันว่าเมลาโทนิมิลลิ 1
เพิ่มขึ้นร้อยละของเซลล์ที่ตายแล้ว (calcein- /
propidium ไอโอไดด์ +) ในมือถือที่มีประชากรที่สูงขึ้น
การเผาผลาญยล (Gal-CSCS และ Gal-dCCs;
p <0.001 ) นอกจากนี้ผลกระทบนี้ยังถูกตรวจพบใน
Glu-dCCs (p <0.001) ซึ่งแนวโน้มที่ลดลง
มีชีวิตโดยวัดจากการทดสอบสีฟ้า Trypan ในที่สุด
เมลาโทนิ 0.1 มิลลิเพิ่มขึ้นร้อยละของการตาย
ของเซลล์ แต่เฉพาะในเซลล์ที่ปลูกในกาแลคโต (กลูโคสฟรี),
glutamine / pyruvate- ที่มีขนาดกลาง (รูปที่ 3 C)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมลาโทนิน พบผล Pro สามารถลดการแสดงออกและทำให้ bcl-2

caspase-3-independent การตายของเซลล์ในเซลล์ p19

กับปฏิกิริยาการเผาผลาญการหยุดชะงักของการเคลื่อนย้ายอิเล็กตรอน
โซ่ผลลัพธ์ในที่สูงปฏิกิริยาชนิดออกซิเจน ( ROS )
การผลิต [ 26 ] ความแตกต่าง p19 เซลล์ ( dccs GLU และ
สาว dccs ) ที่สูงมาลอนไดอัลดีไฮด์ ( MDA )
นำเสนอเนื้อหาเครื่องหมายคลาสสิกของภาวะเครียดออกซิเดชัน , เมื่อเทียบกับ counterparts ต้น
( p < 0.001 ) โดย
เซลล์ที่เพาะเลี้ยงในกาแลกโตส ( กลูโคสฟรี ) , กลูตามีน /
ไพรูเวทที่มีสื่อ ( cscs เกล และ สาว dccs ) ยังเสนอเนื้อหาที่สูงกว่า counterparts (

glucosecultured สูงของพวกเขา แม้จะมีความแตกต่างเหล่านี้แรกเริ่ม เมลาโทนิน 1 mm
เพิ่มขึ้นระดับ MDA ใน p19 เซลล์
กลุ่มเปรียบเทียบกับการควบคุมที่สอดคล้องกันของพวกเขา ( p < 0.001 ) โดยเฉพาะอย่างยิ่งในเซลล์เพาะเลี้ยง
กาแลคโตสขนาดกลาง ( รูป
2d ) ผลกระทบนี้อาจเกี่ยวข้องกับความสามารถของเมลาโทนิน
เพื่อลดการเกิดอัตราสูงเซลล์
ฟังดู ถึงแม้ว่าเมลาโทนิน 0.1 มิลลิเมตร ก็ได้รับผลกระทบการใช้ออกซิเจนของเซลล์เพาะเลี้ยง

กาแลคโตสสื่อสมาธินี้ยังแสดงผลการต่อต้านอนุมูลอิสระ เนื่องจากการผลิต ROS มากเกินไปด้วย )

มีบทมากกว่าในอุตสาหกรรมเยื่อ permeabilization นอก

เราศึกษาการเปลี่ยนแปลงใน bcl-2 BAX และปริมาณโปรตีน เราไม่พบการเปลี่ยนแปลงในเนื้อหาใน แบกซ์

สารสกัดเซลล์ทั้งหมดในใด ๆของวิเคราะห์เซลล์กลุ่ม อย่างไรก็ตามการรักษา
เมลาโทนินเพาะเลี้ยงเซลล์ในกาแลกโตสสื่อแสดงเนื้อหาของ antiapoptotic โปรตีนลดลง

bcl-2 ในขณะที่ผลกระทบนี้ไม่พบเมื่อเซลล์เติบโตในสื่อกลูโคสสูง
( รูปที่ 3 ) จากการลดลงของปริมาณในการรักษาและ bcl-2 เมลาโทนิน

galactosecultured เซลล์แสดงให้เห็นว่าทางกลุ่มที่มี
ที่แท้จริงอาจถูกเปิดใช้งาน
ข้อมูลของเรา อย่างไรก็ตามไม่ได้แสดงการเพิ่มขึ้นคาดว่าจะได้ในกิจกรรม caspase-3-like
( รูปที่ 3B ) น่าสนใจ และสาว cscs
แสดงกิจกรรมสูงสุดของการศึกษาลักษณะเมื่อเทียบกับกลู cscs
( p < 0.001 ) การสังเกตนี้อาจเกิดขึ้นได้ เช่น การบังคับ การสลาย

ที่เกี่ยวข้องกระบวนการเปลี่ยนแปลงและการกระตุ้นด้วย
( กลูโคสกาแลคโตส ฟรี ) , กลูตามีน / ไพรูประกอบด้วย
- ) อย่างไรก็ตาม