The morphology of the nuclei for ap

The morphology of the nuclei for apoptotic changes of cells treated with 200 μM of EGCG for 24 h was observed by DAPI staining (4′,6-diamidino-2-phenylindole, 50 μg/ml), using an inverting fluorescence microscope with Axio camera (Zeiss, Germany). TUNEL staining was conducted to observe the cells undergoing apoptosis. The cells were treated with 200 μM EGCG for 24 h and then apoptotic cells were stained by the TUNEL method using an in situ apoptosis detection kit. The cells were fixed in 4% paraformaldehyde, washed twice with phosphate buffered saline (PBS), and permeabilized in 0.5% Triton X-100 for 5 min on ice. TUNEL staining was conducted with fluorescein-dUTP (Roche Applied Science, Germany) in the presence of terminal deoxynucleotidyl transferase for 1 h at 37 °C. Following labeling, the cells were washed with PBS twice and then directly observed under a fluorescence microscope. Samples were visualized using an LSM5 PASCAL confocal laser-scanning microscope (Zeiss, Germany). The percentage of apoptotic cells was scored by counting at least 200 cells within the treatment group.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สัณฐานวิทยาของแอลฟา apoptotic การเปลี่ยนแปลงของเซลล์รักษา ด้วย 200 μ m ของ EGCG 24 ชั่วโมงที่ถูกตรวจสอบ โดย DAPI ย้อมสี (4′, 6-diamidino-2-phenylindole มล.μ) การใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเป็นสีตรงกันข้ามกับกล้อง Axio (Zeiss เยอรมัน) ย้อมสี TUNEL ดำเนินการสังเกตเซลล์ที่ตายในระหว่าง เซลล์ได้รับการรักษา ด้วย 200 μ m EGCG ใน 24 ชมแล้ว ภาพ apoptotic เซลล์ โดยวิธี TUNEL การใช้ชุดตรวจการตายในแหล่งกำเนิด เซลล์ได้รับการแก้ไขใน paraformaldehyde 4% ล้างสองครั้ง ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ saline (PBS), และ permeabilized ใน 0.5% Triton X-100 5 นาทีบนน้ำแข็ง ย้อมสี TUNEL จัดทำ fluorescein-dUTP (วิทยาศาสตร์ประยุกต์โรช เยอรมนี) ในเทอร์มินัล deoxynucleotidyl transferase สำหรับ h 1 ที่ 37 องศาเซลเซียส ต่อการติดฉลาก ล้าง ด้วย PBS สองครั้ง และจากนั้น โดยตรงสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเซลล์ ตัวอย่างที่แสดงเป็นภาพโดยใช้การ LSM5 PASCAL โฟคอแกนเลเซอร์กล้องจุลทรรศน์ (Zeiss เยอรมัน) เปอร์เซ็นต์ของ apoptotic เซลล์แก้ไขคะแนน โดยนับจำนวนเซลล์น้อย 200 ภายในกลุ่มการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของนิวเคลียสสำหรับการเปลี่ยนแปลงที่เกิด apoptosis ของเซลล์รับการรักษาด้วย 200 ไมครอนของ EGCG เป็นเวลา 24 ชั่วโมงพบว่าโดย DAPI ย้อมสี (4 '6 diamidino-2-phenylindole 50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง Inverting กับกล้อง Axio (Zeiss, เยอรมนี) TUNEL ย้อมสีได้ดำเนินการในการสังเกตเซลล์ระหว่างการตายของเซลล์ เซลล์ที่ได้รับการรักษากับ 200 ไมครอน EGCG เป็นเวลา 24 ชั่วโมงและจากนั้นเซลล์ apoptotic มีการย้อมโดยวิธี TUNEL ใช้ในแหล่งกำเนิดชุดการตรวจสอบการตายของเซลล์ เซลล์ที่ได้รับการแก้ไขใน 4 paraformaldehyde% ล้างครั้งที่สองกับฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS) และ permeabilized 0.5% Triton X-100 เป็นเวลา 5 นาทีบนน้ำแข็ง TUNEL ย้อมสีได้ดำเนินการกับ fluorescein-dUTP (Roche วิทยาศาสตร์ประยุกต์เยอรมนี) ในการปรากฏตัวของ transferase deoxynucleotidyl ขั้วเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ต่อไปนี้การติดฉลากเซลล์ถูกล้างด้วยพีบีเอสสองครั้งแล้วสังเกตโดยตรงภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง ตัวอย่างที่ถูกมองเห็นโดยใช้ LSM5 PASCAL confocal กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน (Zeiss, เยอรมนี) ร้อยละของเซลล์ที่เกิด apoptosis เป็นฝ่ายโดยการนับจำนวนอย่างน้อย 200 เซลล์ภายในกลุ่มการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สัณฐานวิทยาของนิวเคลียสของเซลล์ในกลุ่มที่มีการรักษาด้วย 200 μ M ของ EGCG สำหรับ 24 ชั่วโมง สังเกตได้จากการ dapi staining ( 4 นั้น 6-diamidino-2-phenylindole , 50 , μ g / ml ) โดยใช้กล้องจุลทรรศน์กล้องกลับหัวเรืองแสงกับโรล่า แอกซิโอ ( Zeiss , เยอรมัน ) อุโมงค์การศึกษาสังเกตการเกิด apoptosis ในเซลล์ . เซลล์ที่ได้รับการรักษาด้วยμ 200 M EGCG 24 H และเนื้อเยื่อถูกย้อมโดยวิธี TUNEL ใช้ในชุดตรวจพบแหล่งกำเนิด เซลล์ที่ถูกกำหนดใน 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์ ล้างหน้าสองครั้งด้วยเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) และ permeabilized 0.5% Triton X-100 เป็นเวลา 5 นาที บนน้ำแข็ง อุโมงค์ staining จำนวนี่ได้ ( โรชวิทยาศาสตร์ประยุกต์เยอรมนี ) ในการแสดงตนของทรานสเฟอเรสเทอร์มินอล deoxynucleotidyl เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศา ตามฉลาก เซลล์ก็ล้างด้วย pbs สองครั้งแล้วโดยตรง สังเกตใต้แสงกล้องจุลทรรศน์ ตัวอย่างที่มองเห็นการใช้ lsm5 ปาสคาลด้วยเลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์ , เยอรมัน ) เปอร์เซ็นต์ของเนื้อเยื่อถูกคะแนนโดยนับอย่างน้อย 200 เซลล์ภายในกลุ่มการรักษา