The main focus of transgenic animal

The main focus of transgenic animal models in the study of adipose tissue biology has been the expression or knockout of selected genes specifically in adipose tissue. Adipose-tissue-specific expression/knockout of genes became possible with the identification and characterization of promoter regions conferring adipose-tissue-specific expression. The promoters for the adipocyte lipid binding protein aP215 and for phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK)16 are commonly used to target both white and brown adipose tissue (WAT/BAT), whereas the UCP-1 promoter only targets BAT.17 Using the recombinase activity of the cyclization recombination (Cre) gene from the P1 bacteriophage, conditional transgenesis and knockout of specific genes became a commonly used method to create transgenic animal models. The Cre recombinase, a 38-kDa site-specific DNA recombinase, catalyses the recombination of two 34-bp-long loxP (locus of X-over of P1) sites, making it possible to excise loxP-flanked DNA segments.10 and 18 The major application of the Cre/LoxP system is the generation of spatially or temporally regulated gene knockouts.19 Cre/LoxP-mediated recombination requires two steps. First, the endogenous gene to be targeted is modified by homologous recombination in murine embryonic stem (ES) cells so that LoxP sites flank a portion of the gene, and mice are generated from these recombinant ES cells to obtain flox (flanked by lox) mice. Second, the heterozygous flox mice are bred with mice expressing a Cre transgene to generate double heterozygous mice. These double heterozygous mice are bred with single heterozygous flox mice to generate conditional knockout mice

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โฟกัสหลักของแบบจำลองสัตว์ถั่วเหลืองในการศึกษาชีววิทยาเปลวมีนิพจน์หรือของยีนที่เลือกเฉพาะในเปลว Adipose เนื้อเยื่อเฉพาะนิพจน์/น่าพิศวงของยีนเป็นไปได้ ด้วยการระบุและจำแนกภูมิภาคโปรโมเตอร์ conferring นิพจน์ adipose เนื้อเยื่อเฉพาะ ก่อ adipocyte ไขมันรวมโปรตีน aP215 และ phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK) 16 ใช้กับเป้าหมายทั้งสีขาว และสีน้ำตาลมันเปลว (ค้างคาววัด) โดยโปรโมเตอร์ UCP 1 เฉพาะเป้าหมาย BAT.17 ใช้กิจกรรม recombinase ของ recombination cyclization (Cre) ยีน จาก P1 แบคที transgenesis เงื่อนไขของยีนเฉพาะกลายเป็น วิธีที่ใช้กันทั่วไปการสร้างแบบจำลองสัตว์ถั่วเหลือง 38 kDa เฉพาะดีเอ็นเอ recombinase, catalyses, Cre recombinase recombination ของอเมริกายาว 34 bp loxP (โลกัสโพลของ X มากกว่าของ P1) 2 ทำให้สามารถสรรพสามิตขนาบข้าง loxP segments.10 ดีเอ็นเอและ 18 ใช้หลักระบบ Cre/LoxP เป็นการสร้าง spatially หรือยีนควบคุม temporally knockouts.19 Cre/LoxP-mediated recombination มีสองขั้นตอน ครั้งแรก แก้ไขยีน endogenous จะมีการกำหนดเป้าหมาย โดย homologous recombination ใน murine ตัวอ่อนสเต็มเซลล์ (ES) เพื่อให้ส่วนของยีนอยู่ขนาบข้างไซต์ LoxP และเมาส์จะถูกสร้างขึ้นจากเซลล์ ES นี้ recombinant รับหนู flox (นัก lox) สอง หนู heterozygous flox มี bred กับหนูแสดง transgene Cre สร้างหนูคู่ heterozygous หนู heterozygous คู่เหล่านี้มี bred กับหนู flox heterozygous เดียวเพื่อสร้างหนูชนะน็อกโดยเทคนิคแบบมีเงื่อนไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดสนใจหลักของรูปแบบสัตว์ดัดแปลงพันธุกรรมในการศึกษาชีววิทยาเนื้อเยื่อไขมันที่ได้รับการแสดงออกหรือน่าพิศวงของยีนที่เลือกเฉพาะในเนื้อเยื่อไขมัน ไขมันเนื้อเยื่อเฉพาะการแสดงออก / ที่น่าพิศวงของยีนที่เป็นไปได้ที่มีการระบุและลักษณะของภูมิภาคก่อการหารือแสดงออกไขมันเนื้อเยื่อเฉพาะ โปรโมเตอร์สำหรับ adipocyte ไขมันโปรตีน aP215 และ Phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK) 16 มักใช้ในการกำหนดเป้​​าหมายเนื้อเยื่อไขมันทั้งสีขาวและสีน้ำตาล (WAT / BAT) ในขณะที่ผู้ก่อการ UCP-1 เป้าหมายเพียง BAT.17 ใช้กิจกรรม recombinase ของ รวมตัวกันอีก cyclization (Cre) ยีนจากแบคทีเรีย P1, transgenesis เงื่อนไขและน่าพิศวงของยีนที่เฉพาะเจาะจงได้กลายเป็นวิธีการที่ใช้ในการสร้างแบบจำลองสัตว์ดัดแปรพันธุกรรม recombinase Cre, 38 กิโลดาลตัน recombinase ดีเอ็นเอที่เฉพาะเจาะจงสถานที่เร่งการรวมตัวกันของทั้งสอง 34 bp ยาว loxP (สถานทีของ X มากกว่าของ P1) เว็บไซต์ที่ทำให้มันเป็นไปได้ที่จะภาษีสรรพสามิต segments.10 ดีเอ็นเอ loxP-ขนาบข้างและ 18 แอพลิเคชันที่สำคัญของ Cre / ระบบ LoxP เป็นรุ่นของสันนิฐานหรือชั่วคราวยีนควบคุม knockouts.19 Cre / recombination LoxP สื่อต้องมีขั้นตอนที่สอง ครั้งแรกของยีนภายนอกที่จะกำหนดเป้​​าหมายมีการแก้ไขโดยการรวมตัวกันคล้ายคลึงกันในต้นกำเนิดตัวอ่อนหนู (ES) เซลล์เพื่อให้เว็บไซต์ LoxP ด้านข้างส่วนของยีนและหนูถูกสร้างขึ้นจาก recombinant ES เซลล์เหล่านี้จะได้รับ Flox (ขนาบข้างด้วยปลาแซลมอนรมค) หนู . ประการที่สองหนู Flox heterozygous เป็นพันธุ์ที่มีหนูแสดงยีน Cre เพื่อสร้างหนูคู่ heterozygous เหล่านี้หนู heterozygous คู่เป็นพันธุ์ที่มีหนู Flox heterozygous เดียวที่จะสร้างหนูที่น่าพิศวงเงื่อนไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เน้นหลักของพันธุกรรมสัตว์ในรูปแบบการศึกษาชีววิทยาของเนื้อเยื่อไขมันที่ได้รับการแสดงออกของยีนโดยเฉพาะหรือน่าพิศวงที่เนื้อเยื่อไขมัน . เนื้อเยื่อไขมันเฉพาะการแสดงออกของยีน / น็อกกลายเป็นไปได้กับการจำแนกและลักษณะสมบัติของโปรโมเตอร์ภูมิภาคปรึกษาเนื้อเยื่อไขมันเฉพาะการแสดงออกโปรโมเตอร์สำหรับดิโปไซต์ไขมันโปรตีน ap215 และฟอสโฟอีนอลไพรูเวต carboxykinase ( pepck ) 16 มักใช้เพื่อเป้าหมายทั้งขาวและเนื้อเยื่อไขมันสีน้ำตาล ( วัด / ค้างคาว ) , ในขณะที่การ ucp-1 เป้าหมายเฉพาะ bat.17 โดยใช้กิจกรรมการ recombinase ของอัล ( CRE ) ของยีนแบคเทอริโอเฟจจาก P1 ,transgenesis เงื่อนไขและโดยเฉพาะยีนที่เป็นที่นิยมใช้วิธีการสร้างรูปแบบสัตว์ดัดแปลงพันธุกรรม . ส่วนครีม recombinase , 38 kDa recombinase พันธุ์เฉพาะดีเอ็นเอ , recombination 2 34 BP นาน loxp ( ความเชื่อ x-over P1 ) เว็บไซต์ทำให้มันเป็นไปได้เพื่อกำจัด loxp ขนาบข้าง ส่วน DNA10 และ 18 การประยุกต์ใช้หลักของระบบด้วย / loxp เป็นรุ่นเชิงพื้นที่หรือชั่วคราวการควบคุมยีน knockouts.19 CRE / loxp โดยการใช้สองขั้นตอน แรก , เป้าหมายในยีนจะดัดแปลงโดยการเปรียบเทียบใน ~ ตัวอ่อน ( ES ) เซลล์ต้นเพื่อให้เว็บไซต์ loxp ปีกส่วนของยีนและหนูจะถูกสร้างขึ้นจากเซลล์และเซลล์เหล่านี้จะได้รับ flox ( ขนาบด้วยปลาแซลมอนรมควัน ) หนู ประการที่สอง หนูนากับหนูก่อน flox เป็นพันธุ์ที่แสดงด้วยยีนเพื่อสร้างคู่ก่อนหนู นี้คู่ก่อนหนูเป็นพันธุ์เดียวกับการสร้าง flox หนูเพื่อสร้างเงื่อนไข โดยหนู