After 24 h incubation, the cells we

After 24 h incubation, the cells were fixed with 4% paraformaldehydeon at room temperature for 20 min in the dark and washed by cold 1× PBS twice. The fixed MBT2 cells were then blocked with 5% fat-free milk in TBST (trisbuffered saline + Tween 20) buffer at room temperature for 1 h to prevent nonspecific binding.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากบ่ม 24 ชม เซลล์ได้คง มี paraformaldehydeon 4% ที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 20 นาทีในมืด และล้าง ด้วยน้ำเย็น 1 × PBS ครั้ง เซลล์ MBT2 ถาวรแล้วถูกบล็อก ด้วยนมปราศจากไขมัน 5% ในบัฟเฟอร์ TBST (trisbuffered น้ำเกลือ Tween 20) ที่อุณหภูมิห้องสำหรับ h 1 ให้ผูกที่เจาะจง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจาก 24 ชั่วโมงการบ่มเซลล์ได้รับการแก้ไขที่มี 4% paraformaldehydeon ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 20 นาทีในที่มืดและล้างด้วยเย็น 1 ×พีบีเอสเป็นครั้งที่สอง เซลล์ MBT2 คงถูกบล็อกแล้วกับนมไขมันฟรี 5% tbst (trisbuffered น้ำเกลือ + Tween 20) บัฟเฟอร์ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงเพื่อป้องกันไม่ให้ nonspecific ผูกพัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากบ่ม 24 ชม. เซลล์ก็แก้ด้วย paraformaldehydeon 4 % ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 20 นาทีในที่มืดและล้างด้วย pbs 1 ×เย็นสองครั้ง คง mbt2 เซลล์จึงถูกปิดกั้นด้วย 5 % นมไขมันฟรีใน tbst ( trisbuffered น้ำเกลือ Tween 20 ) บัฟเฟอร์ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อป้องกันการติดเชื้อที่มีผลผูกพัน