The liver was homogenized in four v

The liver was homogenized in four volumes (v:wt) of cold methanol/chloroform (1:2, by volume)
containing 0.01% BHT. Dinonadecanoyl phosphatidylcholine (PC 19:0/19:0) and diheptadecanoyl
phosphatidylethanolamine (PE 17:0/17:0) were added to the homogenate as internal standards with
final concentrations of 1 and 0.75 µmol/g of tissue respectively. The total lipids were extracted as
described previously [20] and stored at −80 °C until analysis. The liver extracts were analyzed on a
QTRAP 5500 mass spectrometer (AB Sciex, Concord, Vaughan, Canada) combined with a Nanomate
Triversa robotic nanospray source (Advion Biosciences, Ithaca, NY, USA). All samples were infused
with a spray gas pressure of 0.4 psi and voltage of 1.2 kV. Lipid extracts were diluted 100-fold into
MeOH/CHCl3 (2:1, by volume) containing 7.5 mM ammonium acetate. PC was identified by precursor
ion scanning for the m/z 184.1 product ion in the positive mode. PE was identified by neutral loss
scanning for a loss of 141 Da in the positive mode. Collision energy was set at 55 and 30 eV respectively
for precursor ion and neutral loss experiments and 400 scans were summed for each experiment. Data
were analyzed with LipidView [21] including de-isotoping, smoothing and isotope correction. Lipid
concentrations were calculated using LipidView by comparison with internal standards. Lipid
concentrations were then exported to Excel [22]. The ratio of PC to PE was calculated as PC
concentration per PE concentration (mol/mol).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตับถูก homogenized เป็นกลุ่มในปริมาณ 4 (v: wt) ของเมทานอลเย็นคลอโรฟอร์ม (1:2 โดยปริมาตร) ประกอบด้วย 0.01% บาท Dinonadecanoyl สำคัญ (PC 19:0 / 19:0) และ diheptadecanoyl phosphatidylethanolamine (PE 17:17:0 / 0) ถูกเพิ่มเข้าไป homogenate ที่เป็นมาตรฐานภายในด้วย ความเข้มข้นสุดท้ายของ 1 และ 0.75 µmol/กรัม ของเนื้อเยื่อตามลำดับ โครงการทั้งหมดถูกแยกเป็น อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [20] และเก็บไว้ที่ −80 ° C จนถึงการวิเคราะห์ สารสกัดจากตับถูกวิเคราะห์ในการ สเปกโตรมิเตอร์มวล QTRAP 5500 (Sciex AB คอนคอร์ด วอน แคนาดา) รวมกับ Nanomate เป็น แหล่ง nanospray หุ่นยนต์ Triversa (เวลาออก Advion, Ithaca, NY สหรัฐอเมริกา) ตัวอย่างทั้งหมดได้ลงตัว มีความดันแก๊สสเปรย์ของ 0.4 psi และแรงดันไฟฟ้า 1.2 kV ไขมันบางส่วนถูกทำให้ 100-fold เป็น ทา นอ/CHCl3 (2:1 โดยปริมาตร) ประกอบด้วย acetate แอมโมเนีย 7.5 mM PC ไม่ระบุสารตั้งต้น ไอออนหาไอออนผลิตภัณฑ์ m/z 184.1 ในโหมดบวก PE ถูกระบุสูญกลาง การสแกนการสูญเสียของดา 141 ในโหมดบวก พลังงานชนตั้งที่ eV 55 และ 30 ตามลำดับ ไอออนของสารตั้งต้นและร่วงกลาง ทดลองและสแกน 400 ถูกรวมในการทดลองแต่ละ ข้อมูล ได้วิเคราะห์ ด้วย LipidView [21] รวมถึงการแก้ไข de isotoping ราบเรียบ และไอโซโทป ระดับไขมันในเลือด มีคำนวณความเข้มข้นโดยใช้ LipidView by comparison with มาตรฐานภายใน ระดับไขมันในเลือด ความเข้มข้นขึ้นแล้วส่งออกไปยัง Excel [22] คำนวณอัตราส่วนของพีซี PE เป็น PC ความเข้มข้นต่อ PE ความเข้มข้น (โมล/โมล)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตับก็หดหายในสี่เล่ม (V: WT) เย็นเมทานอล / คลอโรฟอร์ม (1: 2 โดยปริมาตร)
ที่มี 0.01% บาท phosphatidylcholine Dinonadecanoyl (PC 19: 0/19: 0) และ diheptadecanoyl
phosphatidylethanolamine (PE 17: 0/17: 0) ถูกเพิ่มเข้าไปใน homogenate เป็นมาตรฐานภายในที่มี
ความเข้มข้นสุดท้ายของที่ 1 และ 0.75 ไมโครโมล / กรัมของเนื้อเยื่อตามลำดับ ไขมันทั้งหมดถูกสกัดเป็น
อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [20] และเก็บไว้ที่ -80 ° C จนการวิเคราะห์ สารสกัดจากตับถูกนำมาวิเคราะห์ใน
QTRAP 5500 มวลสเปกโตรมิเตอร์ (AB Sciex สามัคคีวอห์น, แคนาดา) รวมกับ Nanomate
แหล่ง nanospray Triversa หุ่นยนต์ (Advion ชีววิทยาศาสตร์, Ithaca, NY, USA) ตัวอย่างทั้งหมดถูก infused
กับความดันก๊าซสเปรย์ 0.4 psi และแรงดันไฟฟ้า 1.2 กิโลโวลต์ สารสกัดจากไขมันถูกเจือจาง 100 เท่าใน
เมธานอล / CHCl3 (2: 1 โดยปริมาตร) ที่มี 7.5 มิลลิแอมโมเนียมอะซิเตท เครื่องคอมพิวเตอร์ถูกระบุโดยผู้นำ
สแกนไอออนสำหรับไอออนผลิตภัณฑ์ M / Z 184.1 ในโหมดบวก PE ถูกระบุโดยการสูญเสียความเป็นกลาง
สแกนสำหรับการสูญเสียของ 141 ดาในโหมดบวก พลังงานการปะทะกันเป็นชุดที่ 55 และ 30 ตามลำดับ eV
สำหรับการทดลองไอออนสารตั้งต้นและการสูญเสียความเป็นกลางและ 400 สแกนได้สรุปสำหรับการทดลองแต่ละ ข้อมูลที่
ได้มาวิเคราะห์ด้วย LipidView [21] รวมทั้งยกเลิกการ isotoping เรียบและการแก้ไขไอโซโทป ไขมันในเลือด
ความเข้มข้นนี้จะถูกคำนวณโดยใช้ LipidView โดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานภายใน ไขมัน
เข้มข้นถูกส่งออกไปยัง Excel แล้ว [22] อัตราส่วนของเครื่องคอมพิวเตอร์ไปยัง PE ที่คำนวณได้เป็นเครื่องคอมพิวเตอร์ที่
เข้มข้นต่อความเข้มข้น PE (mol / mol)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตับถูกบดในสี่เล่ม ( V : WT ) ของเย็นเมทานอลคลอโรฟอร์ม ( 1 : 2 โดยปริมาตร )
ที่ 0.01 บาท dinonadecanoyl ฟอสฟาติดิลโคลีน ( PC 19:0 / 19:0 ) และ diheptadecanoyl
phosphatidylethanolamine ( PE 17:0 / 17:0 ) ถูกเพิ่มไปยังแยกเป็นมาตรฐานภายในกับ
ความเข้มข้นสุดท้าย 1 และ 0.75 µ mol / g ของเนื้อเยื่อตามลำดับ ไขมันทั้งหมดถูกสกัดเป็น
อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 20 ] และที่อุณหภูมิ 80 องศา C −จนถึงการวิเคราะห์ ตับสารสกัดจากข้อมูลบน
qtrap 5500 แมสสเปกโตรมิเตอร์ ( AB sciex Concord , วอห์น , แคนาดา ) รวมกับ nanomate
triversa หุ่นยนต์ nanospray แหล่ง ( advion ชีววิทยา Ithaca , NY , USA ) ตัวอย่าง infused
กับสเปรย์ความดันก๊าซ 0.4 psi และแรงดัน 1.2 KV . สารสกัดลดไขมัน 100 พับลง
ปริมาณ / chcl3 ( 2 : 1 โดยปริมาตร ) ที่มีแอมโมเนียมอะซิเตท 7.5 มิลลิเมตร คอมพิวเตอร์ระบุสารตั้งต้น
ไอออนสแกนสำหรับผลิตภัณฑ์ M / Z 184.1 ไอออนในโหมดบวก PE ระบุเป็นกลางขาดทุน
สแกนสำหรับการสูญเสียคุณดาในโหมดบวก พลังงานการชนไว้ที่ 55 และ 30 EV ตามลำดับ
ไอออนของสารตั้งต้นและผลขาดทุนที่เป็นกลางและ 400 สแกนเป็นสรุปสำหรับแต่ละการทดลอง
วิเคราะห์ด้วยข้อมูล lipidview [ 21 ] รวมถึง เดอ isotoping เรียบและแก้ไขของมันด้วย ไขมัน
ความเข้มข้นคำนวณโดยใช้ lipidview โดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานภายใน ไขมัน
ความเข้มข้นแล้วส่งออกไปยัง Excel [ 22 ] อัตราส่วนของ PC PE มีค่าความเข้มข้น PC
ต่อ PE สมาธิ ( mol / mol )