Cell Culture. The murine melanoma c

Cell Culture. The murine melanoma cell line B16F10 was obtained from the UCSF Cell Culture Facility. The cells were cultured in pre-warmed medium (MEM Eagle's with EBSS medium containing 10% fetal bovine serum, 1% MEM nonessential amino acids, 110 mg/L sodium pyruvate, and 1% penicillin−streptomycin) at 37 °C in a humidified atmosphere composed of 5% CO2. MDA-MB-231 and MDA-MB-435 breast cancer cell lines were cultured in a medium consisting of Dulbecco's Modified Earl's medium (DME) H-16, containing 10% FBS and 1% MEM nonessential amino acids. The medium for culturing the monkey kidney fibroblast CV-1 cells consisted of DME H-21 (high glucose 4.5 g/L) containing 10% fetal bovine serum, 1% MEM nonessential amino acids, 1% HEPES buffer, and 1% penicillin−streptomycin. For all of our experiments, cells were harvested from subconfluent cultures using trypsin-versene (0.05 and 0.02% respectively) and were suspended in medium. Cell viability was determined using the trypan blue exclusion method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัฒนธรรมที่เซลล์ เซลล์ murine melanoma บรรทัด B16F10 ได้รับจาก UCSF เซลล์วัฒนธรรมสถาน เซลล์ถูกล้างในอุ่นก่อน (MEM อีเกิ้ล EBSS ขนาดกลางที่มี 10% ทารกวัวซีรั่ม กรดอะมิโนไม่จำเป็น 1% MEM, pyruvate โซเดียม 110 mg/L และ 1% penicillin−streptomycin) ที่อุณหภูมิ 37 ° C ในบรรยากาศณอุณหภูมิที่ประกอบด้วย 5% CO2 MDA-MB-231 และบรรทัดเซลล์มะเร็งเต้านม MDA-MB-435 ถูกล้างในสื่อประกอบด้วย Dulbecco ของแก้ไขเอิร์ลปานกลาง (DME) H-16 ที่ประกอบด้วย 10% FBS และ 1% MEM ไม่จำเป็นกรดอะมิโน สื่อสำหรับนำไปเลี้ยงเซลล์ fibroblast CV 1 ไตลิงที่ประกอบด้วย DME H-21 (กลูโคสสูง 4.5 g/L) ที่ มี 10% ซีรั่มทารกวัว กรดอะมิโนไม่จำเป็น 1% MEM บัฟเฟอร์ HEPES 1%, 1% penicillin−streptomycin สำหรับการทดลองของเรา เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวจากวัฒนธรรม subconfluent ใช้ versene ทริปซิน (0.05 และ 0.02% ตามลำดับ) และถูกหยุดชั่วคราวในกลาง เซลล์ชีวิตที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธีแยก trypan blue

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเพาะเลี้ยงเซลล์ B16F10 สายพันธุ์ของเซลล์เนื้องอกหมาที่ได้รับจาก UCSF เซลล์เพาะเลี้ยงสิ่งอำนวยความสะดวก เซลล์เพาะเลี้ยงในอาหารก่อนอุ่น (MEM อินทรีกับสื่อ EBSS ที่มี 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์วัว, 1% MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น 110 มิลลิกรัม / ลิตรโซเดียมไพรูและ 1% penicillin-streptomycin) ที่ 37 ° C ในความชื้น บรรยากาศประกอบด้วย CO2 5% MDA-MB-231 และ MDA-MB-435 โรคมะเร็งเต้านมเซลล์เพาะเลี้ยงในอาหารที่ประกอบด้วยดัดแปลงกลางเอิร์ล Dulbecco ของ (DME) H-16 ที่มี 10% FBS และ 1% MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น สื่อสำหรับการเพาะเลี้ยงไตลาสท์ลิง CV-1 เซลล์ประกอบด้วย DME H-21 (กลูโคสสูง 4.5 กรัม / ลิตร) ที่มี 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์วัว, 1% MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น, 1% HEPES บัฟเฟอร์และ 1% penicillin- streptomycin สำหรับทุกการทดลองของเราเก็บเกี่ยวเซลล์จากวัฒนธรรม subconfluent ใช้ trypsin-versene (0.05 และ 0.02% ตามลำดับ) และถูกระงับในระดับปานกลาง เซลล์ที่มีชีวิตถูกกำหนดโดยใช้วิธีการยกเว้น Trypan สีฟ้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์เพาะเลี้ยง โดย ~ เนื้องอกเซลล์เส้น b16f10 ได้จาก UCSF เซลล์สิ่งอำนวยความสะดวก เซลล์เพาะเลี้ยงก่อนอุ่นปานกลาง ( แหม่ม นกอินทรีกับ ebss BAP ความเข้มข้น 10% fetal bovine serum , 1% แหม่มกรดอะมิโน 110 mg / L โซเดียมไพรูเวทและ 1% เพนนิซิลลิน− streptomycin ) ที่ 37 ° C ในบรรยากาศ humidified ประกอบด้วย CO2 5% mda-mb-231 mda-mb-435 มะเร็งเต้านมและเซลล์มะเร็งเพาะเลี้ยงในอาหารที่ประกอบด้วยดัลเบโค่การเอิร์ลขนาดกลาง ( DME ) h-16 ที่มี FBS 10% และ 1% แหม่มกรดอะมิโน . อาหารสำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ไฟโบรบลาสต์ cv-1 ไตลิงเป็นฝูง DME ( กลูโคสสูง 4.5 กรัม / ลิตร ) ผสม 10% fetal bovine serum , 1% แหม่ม กรดอะมิโน , 1% และ 1% ฮีเปส บัฟเฟอร์ เพนนิซิลลิน−เหมือนเคย . สำหรับการทดลองของเรา เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวจากวัฒนธรรม subconfluent โดยใช้เอนไซม์ versene ( 0.05 และ 0.02 ตามลำดับ ) และแขวนลอยในตัวกลาง เซลล์ถูกกำหนดโดยใช้ไตรแพนสีฟ้าไปวิธี